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对羟基苯乙腈水解酶产生菌的选育及转化过程研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
目录第9-13页
第一章 绪论第13-31页
   ·前言第13-14页
   ·腈水解酶的来源第14-19页
   ·底物的特异性第19-20页
   ·酶的结构第20-22页
   ·反应机理第22-23页
   ·本课题研究的背景、内容和意义第23-26页
     ·研究背景及意义第23-25页
     ·研究内容第25页
     ·研究意义第25-26页
 参考文献第26-31页
第二章 腈水解酶产生菌的筛选与鉴定第31-50页
   ·引言第31页
   ·菌种筛选第31-37页
     ·材料与方法第31-37页
       ·土样第31-32页
       ·试剂第32页
       ·主要仪器第32-33页
       ·筛选路线第33页
       ·富集培养第33页
       ·菌体培养与制备第33页
       ·转化第33-34页
       ·检测方法第34-37页
     ·结果与讨论第37页
   ·菌种鉴定第37-48页
     ·材料与方法第38-43页
       ·材料第38-39页
       ·方法第39-43页
     ·结果与讨论第43-48页
       ·形态观察第43-46页
       ·仪器鉴定结果第46页
       ·分子鉴定结果第46-48页
   ·小结第48-49页
 参考文献第49-50页
第三章 菌株B.subtilis E9产腈水解酶的条件研究第50-74页
   ·引言第50页
   ·液体种子的生长曲线第50-52页
     ·材料与方法第50-51页
       ·材料第50页
       ·方法第50-51页
     ·结果与讨论第51-52页
       ·菌体干重与OD的标准曲线第51-52页
       ·液体种子的生长曲线第52页
   ·细胞活力与培养时间的关系第52-54页
     ·材料与方法第52-53页
       ·材料第52页
       ·方法第52-53页
     ·结果与讨论第53-54页
   ·细胞腈水解酶活力的遗传稳定性第54-55页
     ·材料与方法第54页
       ·材料第54页
       ·方法第54页
     ·结果与讨论第54-55页
   ·不同碳源对细胞活力的影响第55-56页
     ·材料与方法第55页
       ·材料第55页
       ·方法第55页
     ·结果与讨论第55-56页
   ·不同氮源对细胞活力的影响第56-57页
     ·材料与方法第56-57页
       ·材料第56页
       ·方法第56-57页
     ·结果与讨论第57页
   ·不同添加剂对细胞活力的影响第57-60页
     ·材料与方法第57-58页
       ·材料第58页
       ·方法第58页
     ·结果与讨论第58-60页
   ·金属离子对细胞活力的影响第60-61页
     ·材料与方法第60页
       ·材料第60页
       ·方法不同培养基的产酶效果比较第60页
     ·结果与讨论第60-61页
   ·显著性因子的检出第61-63页
     ·材料与方法第61-62页
       ·材料第61-62页
       ·方法第62页
     ·结果与讨论第62-63页
   ·线性回归正交法优化产酶条件第63-67页
     ·材料与方法第63-64页
       ·材料第63页
       ·方法第63-64页
     ·结果与讨论第64-67页
   ·最速上升法第67-69页
     ·材料与方法第67-68页
       ·材料第67-68页
       ·方法第68页
     ·结果与讨论第68-69页
   ·Ca~(2+)及Fe~(2+)对细胞活力的影响第69-71页
     ·材料与方法第69-70页
       ·材料第69页
       ·方法第69-70页
     ·结果与讨论第70-71页
   ·接种量的确定第71-72页
     ·材料与方法第71页
       ·材料第71页
       ·方法第71页
     ·结果与讨论第71-72页
   ·小结第72-73页
 参考文献第73-74页
第四章 整体细胞生物转化对羟基苯乙腈的酶学性质及反应过程研究第74-94页
   ·引言第74页
   ·酶种类的鉴别第74-76页
     ·材料与方法第74-75页
       ·材料第74-75页
       ·方法第75页
     ·结果与讨论第75-76页
   ·细胞的底物特异性第76-77页
     ·材料与方法第76-77页
       ·材料第76页
       ·方法第76-77页
     ·结果与讨论第77页
   ·温度的影响第77-80页
     ·材料与方法第77-78页
       ·材料第77页
       ·方法第77-78页
     ·结果与讨论第78-80页
       ·转化最适温度第78-79页
       ·细胞的热稳定性第79-80页
   ·pH的影响第80-82页
     ·材料与方法第80-81页
       ·材料第80页
       ·方法第80-81页
     ·结果与讨论第81-82页
   ·金属离子对细胞的活性影响第82-83页
     ·材料与方法第82-83页
       ·材料第82页
       ·方法第82-83页
     ·结果与讨论第83页
   ·底物浓度的影响第83-84页
     ·材料与方法第83-84页
       ·材料第83-84页
       ·方法第84页
     ·结果与讨论第84页
   ·细胞浓度对反应的影响第84-85页
     ·材料与方法第84-85页
       ·材料第84-85页
       ·方法第85页
     ·结果与讨论第85页
   ·产物浓度对反应的影响第85-86页
     ·材料与方法第85-86页
       ·材料第85-86页
       ·方法第86页
     ·结果与讨论第86页
   ·离子强度对细胞活力的影响第86-87页
     ·材料与方法第86-87页
       ·材料第86-87页
       ·方法第87页
     ·结果与讨论第87页
   ·反应动力学第87-92页
     ·材料与方法第87-88页
       ·材料第87-88页
       ·方法第88页
     ·结果与讨论第88-92页
       ·产物形成过程第88-89页
       ·底物消耗与产物形成的关系第89页
       ·细胞的K_m及K_s第89-92页
   ·小结第92-93页
 参考文献第93-94页
第五章 总结与建议第94-97页
   ·总结第94-95页
   ·建议第95-97页
附录第97-99页
攻读学位期间发表的论文第99-100页
致谢第100页

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