| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-13页 |
| ·帕金森氏病与L-DOPA | 第8页 |
| ·L-DOPA 生产的国内外研究进展 | 第8-12页 |
| ·生物合成L-DOPA | 第8-9页 |
| ·生物合成L-DOPA 的重要酶-酪氨酸酚裂解酶 | 第9-11页 |
| ·利用基因工程技术进行L-DOPA 合成的研究 | 第11-12页 |
| ·立题背景及意义 | 第12页 |
| ·课题研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 酪氨酸酚裂解酶结构基因的克隆与表达 | 第13-25页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·材料与方法 | 第13-16页 |
| ·菌株与质粒 | 第13页 |
| ·培养基 | 第13页 |
| ·酶与试剂 | 第13-14页 |
| ·方法 | 第14-16页 |
| ·结果与讨论 | 第16-24页 |
| ·克隆及重组质粒pQTPL 的构建 | 第16-17页 |
| ·pQTPL 的酶切鉴定 | 第17页 |
| ·TPL 基因在E. coli M15 中的表达 | 第17-20页 |
| ·重组菌的TPL 活性比较 | 第20-21页 |
| ·重组菌株质粒pQTPL 稳定性 | 第21页 |
| ·产酶培养基1 中重组E.coli M15(pQTPL)合成L-DOPA 的能力 | 第21-24页 |
| ·本章小结 | 第24-25页 |
| 第三章 重组菌E.COLI DH5Α(PTPL)培养条件优化 | 第25-39页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·材料与方法 | 第25-26页 |
| ·菌种 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26页 |
| ·结果与讨论 | 第26-38页 |
| ·乳糖诱导TPL 表达对L-DOPA 合成的影响 | 第26-29页 |
| ·培养基组分对重组菌生长的影响 | 第29-35页 |
| ·台式发酵罐中重组菌培养的研究 | 第35-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 第四章 生物合成L-DOPA 工艺条件的研究 | 第39-48页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·材料与方法 | 第39-40页 |
| ·菌种 | 第39页 |
| ·培养基 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-47页 |
| ·温度对L-DOPA 合成的影响 | 第40-41页 |
| ·pH 对L-DOPA 合成的影响 | 第41-42页 |
| ·铵盐及其浓度对L-DOPA 合成的影响 | 第42页 |
| ·Na2503 和EDTA 对L-DOPA 合成的影响 | 第42-43页 |
| ·底物浓度配比对L-DOPA 合成的影响 | 第43-44页 |
| ·底物起始浓度对L-DOPA 合成的影响 | 第44页 |
| ·底物补加对L-DOPA 合成的影响 | 第44-45页 |
| ·L-DOPA 的合成曲线 | 第45-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 主要结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第53页 |
