| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-22页 |
| ·几丁质 | 第14-15页 |
| ·几丁质的结构及应用 | 第14页 |
| ·几丁质降解产物的研究与应用 | 第14-15页 |
| ·微生物几丁质降解酶的研究进展 | 第15-19页 |
| ·产几丁质酶的微生物 | 第15-17页 |
| ·微生物几丁质酶的分子生物学特点 | 第17-19页 |
| ·微生物几丁质酶的应用 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 几丁质酶基因的克隆、表达及酶学性质分析 | 第22-38页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·菌株及质粒 | 第22页 |
| ·工具酶与试剂 | 第22页 |
| ·相关溶液 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·引物合成 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-29页 |
| ·维氏气单胞菌B565 基因组的提取 | 第23页 |
| ·几丁质酶chiB565 基因的克隆 | 第23-24页 |
| ·目的基因的纯化 | 第24页 |
| ·真核表达载体pPIC9-chiB565 的构建 | 第24-25页 |
| ·pPIC9-chiB565 连接产物的转化及验证 | 第25页 |
| ·pPIC9-chiB565 在毕赤酵母中的表达及检测 | 第25-26页 |
| ·重组几丁质酶ChiB565 的纯化及鉴定 | 第26-28页 |
| ·重组几丁质酶ChiB565 的酶学性质分析 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-37页 |
| ·细菌基因组的提取 | 第29-30页 |
| ·几丁质酶基因的克隆 | 第30-32页 |
| ·真核表达载体pPIC9-chiB565 的构建 | 第32-33页 |
| ·pPIC9-chiB565 连接产物的转化及验证 | 第33页 |
| ·重组几丁质酶ChiB565 的纯化及鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组几丁质酶ChiB565 的酶学性质分析 | 第34-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 重组几丁质酶在水产养殖中的应用 | 第38-47页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·菌株与实验用鱼 | 第38页 |
| ·引物、试剂与工具酶 | 第38页 |
| ·基础饲料与实验仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·虾壳粉体外降解实验 | 第38-39页 |
| ·HPLC分析降解产物 | 第39页 |
| ·罗非鱼饲喂实验 | 第39-40页 |
| ·生长指标的测定 | 第40页 |
| ·细胞因子表达水平的检测 | 第40页 |
| ·攻毒试验 | 第40-41页 |
| ·数据处理 | 第41页 |
| ·实验结果 | 第41-45页 |
| ·虾壳粉体外降解试验结果 | 第41-42页 |
| ·产物分析 | 第42-43页 |
| ·ChiB565 对罗非鱼生长性能的影响 | 第43-44页 |
| ·ChiB565 对罗非鱼应激性和非特异性免疫的影响 | 第44-45页 |
| ·ChiB565 对罗非鱼抗嗜水气单胞菌感染的影响 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆、表达及性质分析 | 第47-60页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·菌株与质粒 | 第47页 |
| ·引物合成 | 第47页 |
| ·试剂与工具酶 | 第47页 |
| ·溶液 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·主要实验仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-51页 |
| ·维氏气单胞菌B565 基因组的提取 | 第47-48页 |
| ·nagB565 基因的扩增 | 第48页 |
| ·目的基因的纯化 | 第48页 |
| ·原核表达载体pET-28a(+)-nagB565 的构建 | 第48-49页 |
| ·pET-28a(+)-nagB565 连接产物的转化及筛选 | 第49页 |
| ·pET-28a(+)-nagB565 在大肠杆菌中的表达及检测 | 第49-50页 |
| ·重组β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性的测定 | 第50页 |
| ·重组β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的纯化 | 第50页 |
| ·重组β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的酶学性质分析 | 第50-51页 |
| ·实验结果 | 第51-58页 |
| ·β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的克隆 | 第51-54页 |
| ·原核表达载体pET28a(+)-nagB565 的构建 | 第54页 |
| ·NagB565 在大肠杆菌中的表达 | 第54页 |
| ·重组NagB565 活性的测定 | 第54-55页 |
| ·重组NagB565 的纯化 | 第55-56页 |
| ·重组NagB565 的酶学性质分析 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简历 | 第68页 |
