| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 正文 | 第10-59页 |
| 引言 | 第10-16页 |
| ·胚胎干细胞介绍 | 第10-11页 |
| ·小鼠胚胎干细胞的神经发生介绍 | 第11-14页 |
| ·LIF 和胚胎干细胞神经发生 | 第12-13页 |
| ·p53 和胚胎干细胞神经、肌肉分化 | 第13-14页 |
| ·实验设计及结果 | 第14-16页 |
| ·小鼠胚胎干细胞平台的建立 | 第14页 |
| ·LIF 促进小鼠胚胎干细胞向神经元样细胞命运转换 | 第14-15页 |
| ·RNAi 介导的p53 下调导致RA 诱导的胚胎干细胞易分化成肌肉细胞 | 第15-16页 |
| 2 材料和实验方法 | 第16-27页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·间接免疫荧光 | 第16-17页 |
| ·小鼠胚胎干细胞培养 | 第17-20页 |
| ·胚胎饲养层细胞的准备 | 第17-19页 |
| ·胚胎干细胞培养 | 第19-20页 |
| ·EBs 形成与分化 | 第20页 |
| ·X-Gal 染色 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR | 第21页 |
| ·细胞调亡检测 | 第21-22页 |
| ·细胞增殖标记实验 | 第22页 |
| ·AP(alkaline phosphatase) 显色 | 第22-23页 |
| ·胚胎干细胞转染 | 第23-24页 |
| ·PCR 鉴定稳定表达克隆 | 第24页 |
| ·质粒构建 | 第24-26页 |
| ·实验中所用到的基因引物序列 | 第26页 |
| ·TUNEL 和BrdU 细胞记数 | 第26-27页 |
| 3. 实验结果和讨论 | 第27-59页 |
| ·建立小鼠胚胎干细胞实验技术平台 | 第27-30页 |
| ·LIF 信号通路和胚胎干细胞的神经发生 | 第30-48页 |
| ·LIF 信号通路对神经细胞的作用 | 第30页 |
| ·在各种培养条件下,LIF+培养基中的ES 细胞能产生较多的Tuj1 阳性细胞 | 第30-38页 |
| ·-1 在EB 分化条件下,LIF 促进胚胎干细胞向的神经元样细胞分化 | 第30-34页 |
| ·-2 LIF 促进胚胎干细胞的神经发生有剂量效应 | 第34-36页 |
| ·-3 LIF 也促进单层培养条件下的胚胎干细胞神经生成 | 第36-37页 |
| ·-4 LIF 也加强了RA 诱导下的神经元样细胞分化 | 第37-38页 |
| ·LIF 信号通路促进了胚胎干细胞的神经分化 | 第38-40页 |
| ·LIF 抑制细胞调亡和促进细胞增殖 | 第40-43页 |
| ·LIF 促进胚胎干细胞的神经前体细胞生成和抑制胚外内胚层和中胚层命运细胞的产生 | 第43-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·p53 和神经发生 | 第48-59页 |
| ·p53 与胚胎发育 | 第48页 |
| ·胚胎干细胞中的p53 表达被RNAi 稳定的下调 | 第48-51页 |
| ·胚胎干细胞中p53 表达下调没有影响Oct4 的表达 | 第51-52页 |
| ·胚胎干细胞的p53 表达下调使 RA 诱导的胚胎干细胞没有分化出神经元样细胞 | 第52页 |
| ·p53 表达下调促进了RA 诱导的胚胎干细胞向肌肉细胞分化 | 第52-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-70页 |
| 发表文章 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
