英文缩略词表 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
前言 | 第11-15页 |
第一部分 人肺巨细胞癌高低转移株差异表达基因cDNA片段的获取 | 第15-31页 |
1 从培养细胞中提取总RNA | 第15-17页 |
2 从总RNA中抽提PolyA~+RNA | 第17页 |
3 抑制消减杂交 | 第17-23页 |
4 可能的人肺巨细胞癌高转移正相关基因cDNA片段的获取 | 第23-25页 |
5 讨论 | 第25-31页 |
第二部分 差异cDNA片段的筛选及同源性分析 | 第31-41页 |
1 重组子中外源片段的PCR扩增和纯化 | 第31-32页 |
2 cDNA Microarray的制备 | 第32-33页 |
3 Microarrav与荧光探针进行杂交 | 第33-34页 |
4 利用ImageGene图像分析软件分析两种荧光信号 | 第34-35页 |
5 差异表达片段的测序及同源性分析 | 第35-38页 |
6 讨论 | 第38-41页 |
第三部分 两条新的肺癌转移相关基因的鉴定及功能研究 | 第41-79页 |
1 两条候选EST片段的选取及其在模型细胞株中表达差异的进一步确证 | 第41-46页 |
2 对pmag-1、 2的生物信息学分析表明,二者均是全长的cDNA序列 | 第46-49页 |
3 pmag-1编码产物在细胞内定位于细胞浆中 | 第49-53页 |
4 pmag-1、 pmag-2正、反义真核表达载体的构建 | 第53-56页 |
5 以细胞株PLA-801C、D为模型研究pmag-1、 2的功能 | 第56-72页 |
·pmag、2的正/反义载体增加/抑制了相应基因的转录 | 第56-58页 |
·MTT比色实验表明pmag-1、 2均影响细胞的增殖 | 第58-60页 |
·pmag-1促进细胞在软琼脂中形成集落 | 第60-61页 |
·pmag-1、 2均能增加细胞S期和S+G2/M期所占的比例 | 第61-62页 |
·pmag-1、 2能增加细胞对基质的粘附 | 第62-63页 |
·pmag-1、 2不影响模型细胞的运动能力 | 第63-66页 |
·pmag-1、 2增加模型细胞的侵袭能力 | 第66-68页 |
·反义pmag-1、 2的表达降低了细胞内游离Ca~(2+)浓度 | 第68-69页 |
·pmag-1、 2对PCNA、MMP-2、 P53等基因的调节作用 | 第69-72页 |
6 利用RLT-PCR观察pmag-1、 2在临床标本中的表达 | 第72-74页 |
7 讨论 | 第74-79页 |
总结 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
文献综述 | 第86-102页 |
在读期间发表的论文及参加的会议交流等 | 第102-103页 |