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两条新的肺癌转移相关基因的获取、鉴定与功能研究

英文缩略词表第1-6页
中文摘要第6-8页
英文摘要第8-11页
前言第11-15页
第一部分 人肺巨细胞癌高低转移株差异表达基因cDNA片段的获取第15-31页
 1 从培养细胞中提取总RNA第15-17页
 2 从总RNA中抽提PolyA~+RNA第17页
 3 抑制消减杂交第17-23页
 4 可能的人肺巨细胞癌高转移正相关基因cDNA片段的获取第23-25页
 5 讨论第25-31页
第二部分 差异cDNA片段的筛选及同源性分析第31-41页
 1 重组子中外源片段的PCR扩增和纯化第31-32页
 2 cDNA Microarray的制备第32-33页
 3 Microarrav与荧光探针进行杂交第33-34页
 4 利用ImageGene图像分析软件分析两种荧光信号第34-35页
 5 差异表达片段的测序及同源性分析第35-38页
 6 讨论第38-41页
第三部分 两条新的肺癌转移相关基因的鉴定及功能研究第41-79页
 1 两条候选EST片段的选取及其在模型细胞株中表达差异的进一步确证第41-46页
 2 对pmag-1、 2的生物信息学分析表明,二者均是全长的cDNA序列第46-49页
 3 pmag-1编码产物在细胞内定位于细胞浆中第49-53页
 4 pmag-1、 pmag-2正、反义真核表达载体的构建第53-56页
 5 以细胞株PLA-801C、D为模型研究pmag-1、 2的功能第56-72页
   ·pmag、2的正/反义载体增加/抑制了相应基因的转录第56-58页
   ·MTT比色实验表明pmag-1、 2均影响细胞的增殖第58-60页
   ·pmag-1促进细胞在软琼脂中形成集落第60-61页
   ·pmag-1、 2均能增加细胞S期和S+G2/M期所占的比例第61-62页
   ·pmag-1、 2能增加细胞对基质的粘附第62-63页
   ·pmag-1、 2不影响模型细胞的运动能力第63-66页
   ·pmag-1、 2增加模型细胞的侵袭能力第66-68页
   ·反义pmag-1、 2的表达降低了细胞内游离Ca~(2+)浓度第68-69页
   ·pmag-1、 2对PCNA、MMP-2、 P53等基因的调节作用第69-72页
 6 利用RLT-PCR观察pmag-1、 2在临床标本中的表达第72-74页
 7 讨论第74-79页
总结第79-81页
参考文献第81-85页
致谢第85-86页
文献综述第86-102页
在读期间发表的论文及参加的会议交流等第102-103页

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