| 第一章 有机磷降解酶及其基因工程研究进展 | 第1-15页 |
| ·有机磷农药简介 | 第8页 |
| ·有机磷农药的危害 | 第8-9页 |
| ·有机磷降解酶及其研究进展 | 第9-10页 |
| ·有机磷降解酶基因工程研究进展 | 第10-13页 |
| ·目前所发表有机磷降解酶基因及其同源性分析 | 第10-11页 |
| ·有机磷降解酶高效表达的研究 | 第11-12页 |
| ·分子水平上对有机磷降解酶底物特异性研究 | 第12-13页 |
| ·有机磷降解酶应用的初步研究 | 第13-14页 |
| ·有机磷降解酶固定化的研究 | 第13页 |
| ·有机磷降解酶应用研究初探 | 第13-14页 |
| ·研究中存在的问题及发展方向 | 第14页 |
| ·研究意义和目的 | 第14-15页 |
| 第二章 有机磷降解酶的分离纯化及酶学性质分析 | 第15-25页 |
| ·材料与方法 | 第15-18页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| ·试剂 | 第15页 |
| ·溶液 | 第15-16页 |
| ·培养基及培养条件 | 第16页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质电转及电洗脱 | 第16页 |
| ·菌株的分离和筛选 | 第16-17页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)粗酶液的提取 | 第17页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)的分离和纯化 | 第17页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)氨基酸序列测定 | 第17页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)的酶活性测定方法 | 第17页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)的酶学性质分析 | 第17-18页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)降解甲基对硫磷的动力学分析 | 第18页 |
| ·结果与分析 | 第18-23页 |
| ·有机磷降解菌的筛选 | 第18-19页 |
| ·菌种的鉴定及其生理生化特性 | 第19页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)在细胞上的定位 | 第19页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)的纯化 | 第19页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)氨基酸测序结果 | 第19-20页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第20页 |
| ·有机磷降解酶(OPHC2)酶学性质研究 | 第20-22页 |
| ·OPHC2降解甲基对硫磷的动力学分析 | 第22-23页 |
| ·讨论 | 第23-24页 |
| 本章小结 | 第24-25页 |
| 第三章 有机磷降解酶基因ophc2的克隆与表达 | 第25-37页 |
| ·材料与方法 | 第25-30页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·实验仪器、工具酶和试剂 | 第25页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 | 第25-26页 |
| ·连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌细胞电击转化 | 第27页 |
| ·筛选重组子 | 第27页 |
| ·质粒DNA的大量提取 | 第27-28页 |
| ·假产碱假单胞菌C2-1质粒的提取 | 第28页 |
| ·PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·质粒消除实验 | 第29页 |
| ·有机磷降解酶基因ophc2全长序列的获得 | 第29页 |
| ·有机磷降解酶基因ophc2的大肠杆菌重组表达质粒的构建 | 第29-30页 |
| ·有机磷降解酶基因ophc2在大肠杆菌中的诱导表达及检测 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-34页 |
| ·质粒消除实验的结果 | 第30页 |
| ·有机磷降解酶基因ophc2部分序列的获得 | 第30-31页 |
| ·有机磷降解酶基因ophc2全长序列的获得 | 第31页 |
| ·有机磷降解酶基因的克隆及原核表达重组质粒的构建 | 第31-34页 |
| ·有机磷降解酶基因ophc2在大肠杆菌中的诱导表达 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 本章小结 | 第36-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 作者简历 | 第44页 |
| 附: 攻读硕士学位期间所发表的论文 | 第44-54页 |
