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对虾病毒复合检测技术的建立

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
第一章 对虾病毒及现代检测技术研究进展第7-25页
 第一节 对虾病毒研究进展第7-15页
  1 细小病毒科(Parvoviridae)第7-9页
   ·肝胰腺细小病毒(Hepatopancreatic Parvovirus,HPV)第7页
   ·传染性皮下及造血器官坏死病毒(Infectious Hypodermal and Haematopoietic Necrosis Virus,IHHNV)第7-9页
  2 杆状病毒(Baculoviridae)第9页
   ·对虾杆状病毒(Baculovirus Penaei,BP)第9页
   ·斑节对虾杆状病毒(Monodon Baculovirus,MBV)第9页
  3 Dicistroviridae第9-11页
  4 Nidoviridae第11页
   ·对虾黄头病毒(Yellow head virus,YHV)第11页
   ·鳃联病毒(Gill-associated Virus,GAV)第11页
  5 对虾白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)研究进展第11-15页
 第二节 现代生物检测技术和对虾病毒检测研究进展第15-24页
  1 免疫检测技术第16-18页
   ·酶联免疫检测技术第16页
   ·荧光免疫分析第16-17页
   ·免疫胶体金诊断技术第17-18页
  2 核酸检测技术第18-24页
   ·核酸杂交第18-19页
   ·聚合酶连反应(PCR)第19-24页
 第三节 本论文研究背景、目的和意义第24-25页
  1 本论文的研究背景第24页
  2 本论文的研究目的和意义第24-25页
第二章 复合核酸点杂交检测技术的建立第25-36页
 1 材料与方法第25-30页
   ·需要的溶液和试剂第25页
   ·探针的制备第25-27页
   ·样品处理第27页
   ·双探针点杂交检测程序第27-28页
   ·三探针点杂交检测程序第28-29页
   ·检测体系特异性和灵敏性的评估第29-30页
 2 结果与分析第30-33页
   ·探针浓度测定第30-31页
   ·检测结果判断第31页
   ·检测结果第31-33页
   ·检测特异性与灵敏性第33页
 3 讨论第33-36页
第三章 RT-PCR ELISA同时检测WSSV,TSV和HPV方法的建立第36-45页
 1 材料与方法第37-39页
   ·样品第37页
   ·总核酸的抽提第37页
   ·引物和探针的合成第37页
   ·复合RT-PCR标记地高辛第37-38页
   ·固相杂交检测第38-39页
   ·对照设置第39页
 2 结果与分析第39-42页
   ·复合RT-PCR标记体系的优化和扩增产物凝胶电泳分析第39-40页
   ·固相杂交条件优化第40页
   ·结果判断和检测特异性分析第40-42页
   ·样品检测与敏感性分析第42页
 3 讨论第42-45页
第四章 Taura Syndrome Virus主要结构蛋白基因克隆与原核表达第45-53页
 1 材料与方法第45-47页
   ·核酸、菌株与质粒第45页
   ·酶类及试剂第45页
   ·引物设计第45-46页
   ·基因扩增第46页
   ·目的片断的克隆第46-47页
   ·目的片断的表达第47页
 2 结果与分析第47-51页
   ·PCR扩增第47页
   ·重组克隆质粒的构建与酶切鉴定第47-48页
   ·表达重组质粒构建和酶切鉴定第48页
   ·基因的表达第48-50页
   ·可溶性检测第50-51页
 3 讨论第51-53页
参考文献第53-60页
致谢第60-61页
附录Ⅰ: 主要试剂的配置方法第61-62页
附录Ⅱ: 在读期间申请的专利和发表的论文第62页

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