摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 脂联素研究进展 | 第9-20页 |
·脂联素的发现 | 第9-10页 |
·脂联素基因 | 第10-11页 |
·脂联素蛋白质结构多态性 | 第11-13页 |
·体内脂联素的表达调控 | 第13-15页 |
·脂联素的功能 | 第15-18页 |
·脂联素受体 | 第18-19页 |
·本研究的目的意义 | 第19-20页 |
第二章 猪脂联素基因编码区和球状区的克隆、表达与抗血清制备 | 第20-28页 |
1 引言 | 第20页 |
2 材料与方法 | 第20-25页 |
·材料 | 第20-22页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·主要试剂及配制 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·方法 | 第22-25页 |
·引物设计 | 第22-23页 |
·猪脂肪组织总RNA提取 | 第23页 |
·目的基因片段的扩增与纯化 | 第23-24页 |
·表达载体构建与鉴定 | 第24页 |
·蛋白质表达 | 第24页 |
·包涵体提取与目的蛋白纯化 | 第24页 |
·抗血清制备 | 第24页 |
·ELISA法测效价 | 第24-25页 |
3 结果 | 第25-27页 |
·目的基因片段的扩增 | 第25页 |
·表达载体构建与鉴定 | 第25-26页 |
·蛋白质表达与纯化 | 第26-27页 |
·表达蛋白质的定量 | 第27页 |
·抗血清制备 | 第27页 |
4 讨论 | 第27-28页 |
第三章 半定量PCR检测瘦肉型和脂肪型猪脂肪组织脂联素mRNA表达差异 | 第28-32页 |
1 引言 | 第28页 |
2 材料与方法 | 第28-29页 |
·材料 | 第28页 |
·方法 | 第28-29页 |
·引物设计 | 第28页 |
·脂肪组织总RNA提取 | 第28页 |
·目的基因片段的扩增与测序 | 第28-29页 |
·PCR扩增指数期循环数的确定 | 第29页 |
·半定量 | 第29页 |
3 结果 | 第29-31页 |
·目的基因片段的扩增与测序 | 第29页 |
·PCR扩增指数期循环数的确定 | 第29-30页 |
·半定量 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-32页 |
第四章 竞争性PCR定量猪脂肪组织中脂联素mRNA | 第32-37页 |
1 引言 | 第32页 |
2 材料与方法 | 第32-33页 |
·材料 | 第32页 |
·方法 | 第32-33页 |
·引物设计 | 第32页 |
·目的基因片段扩增及测序 | 第32页 |
·竞争性模板构建 | 第32页 |
·PCR扩增 | 第32-33页 |
3 结果 | 第33-35页 |
·猪脂联素基因片段扩增与测序 | 第33页 |
·竞争性模板构建 | 第33-34页 |
·竞争性PCR | 第34-35页 |
·脂肪组织中脂联素mRNA的定量 | 第35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
第五章 用辐射杂种细胞系技术(RH)进行脂联素染色体定位 | 第37-41页 |
1 引言 | 第37页 |
2 材料与方法 | 第37-38页 |
·材料 | 第37页 |
·方法 | 第37-38页 |
·猪脂联素第二个内含子扩增 | 第37-38页 |
·引物设计和PCR扩增 | 第38页 |
·定位 | 第38页 |
3 结果 | 第38-39页 |
·猪脂联素第二个内含子扩增 | 第38页 |
·PCR扩增 | 第38页 |
·定位 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
参考文献 | 第41-49页 |
致谢 | 第49页 |