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猪脂联素基因的染色体定位、克隆、原核表达、抗血清制备及体内表达调控研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第一章 脂联素研究进展第9-20页
   ·脂联素的发现第9-10页
   ·脂联素基因第10-11页
   ·脂联素蛋白质结构多态性第11-13页
   ·体内脂联素的表达调控第13-15页
   ·脂联素的功能第15-18页
   ·脂联素受体第18-19页
   ·本研究的目的意义第19-20页
第二章 猪脂联素基因编码区和球状区的克隆、表达与抗血清制备第20-28页
 1 引言第20页
 2 材料与方法第20-25页
   ·材料第20-22页
     ·实验材料第20-21页
     ·主要试剂及配制第21-22页
     ·主要仪器第22页
   ·方法第22-25页
     ·引物设计第22-23页
     ·猪脂肪组织总RNA提取第23页
     ·目的基因片段的扩增与纯化第23-24页
     ·表达载体构建与鉴定第24页
     ·蛋白质表达第24页
     ·包涵体提取与目的蛋白纯化第24页
     ·抗血清制备第24页
     ·ELISA法测效价第24-25页
 3 结果第25-27页
   ·目的基因片段的扩增第25页
   ·表达载体构建与鉴定第25-26页
   ·蛋白质表达与纯化第26-27页
   ·表达蛋白质的定量第27页
   ·抗血清制备第27页
 4 讨论第27-28页
第三章 半定量PCR检测瘦肉型和脂肪型猪脂肪组织脂联素mRNA表达差异第28-32页
 1 引言第28页
 2 材料与方法第28-29页
   ·材料第28页
   ·方法第28-29页
     ·引物设计第28页
     ·脂肪组织总RNA提取第28页
     ·目的基因片段的扩增与测序第28-29页
     ·PCR扩增指数期循环数的确定第29页
     ·半定量第29页
 3 结果第29-31页
   ·目的基因片段的扩增与测序第29页
   ·PCR扩增指数期循环数的确定第29-30页
   ·半定量第30-31页
 4 讨论第31-32页
第四章 竞争性PCR定量猪脂肪组织中脂联素mRNA第32-37页
 1 引言第32页
 2 材料与方法第32-33页
   ·材料第32页
   ·方法第32-33页
     ·引物设计第32页
     ·目的基因片段扩增及测序第32页
     ·竞争性模板构建第32页
     ·PCR扩增第32-33页
 3 结果第33-35页
   ·猪脂联素基因片段扩增与测序第33页
   ·竞争性模板构建第33-34页
   ·竞争性PCR第34-35页
   ·脂肪组织中脂联素mRNA的定量第35页
 4 讨论第35-37页
第五章 用辐射杂种细胞系技术(RH)进行脂联素染色体定位第37-41页
 1 引言第37页
 2 材料与方法第37-38页
   ·材料第37页
   ·方法第37-38页
     ·猪脂联素第二个内含子扩增第37-38页
     ·引物设计和PCR扩增第38页
     ·定位第38页
 3 结果第38-39页
   ·猪脂联素第二个内含子扩增第38页
   ·PCR扩增第38页
   ·定位第38-39页
 4 讨论第39-41页
参考文献第41-49页
致谢第49页

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