药用野生稻基因组文库构建与大片段DNA转化
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-59页 |
| 1 野生稻重要基因的发掘与利用 | 第13-17页 |
| ·野生稻是栽培稻改良的重要遗传资源 | 第13-14页 |
| ·药用野生稻是最有价值的野生稻资源之一 | 第14-16页 |
| ·野生稻利用存在的问题与对策 | 第16-17页 |
| 2 人工染色体载体与基因组文库 | 第17-21页 |
| ·人工染色体载体 | 第17-18页 |
| ·基因组文库 | 第18-21页 |
| 3 农杆菌介导的植物转化 | 第21-57页 |
| ·根癌农杆菌Ti质粒 | 第21-22页 |
| ·T-DNA导入植物基因组的分子机理 | 第22-33页 |
| ·农杆菌Ti质粒的改造及载体构建 | 第33-35页 |
| ·农杆菌介导植物转化的影响因素 | 第35-42页 |
| ·转基因植株的鉴定与分析 | 第42-43页 |
| ·外源基因在植物体内的整合 | 第43-45页 |
| ·外源基因的表达及提高外源基因表达的工程策略 | 第45-48页 |
| ·转基因在后代中的遗传及稳定性 | 第48-49页 |
| ·植物遗传转化中的问题与对策 | 第49-54页 |
| ·转基因植物现状及发展趋势 | 第54-57页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第57-59页 |
| 第二章 药用野生稻基因组文库的构建与分析 | 第59-76页 |
| 摘要 | 第59-60页 |
| Abstract | 第60-62页 |
| 1 引言 | 第62-64页 |
| 2 材料与方法 | 第64-68页 |
| ·BIBAC载体及其准备 | 第64-65页 |
| ·高分子量基因组DNA的制备 | 第65-66页 |
| ·基因组DNA的部分消化和体积选择 | 第66页 |
| ·连接与转化 | 第66-67页 |
| ·文库的构建与分析 | 第67页 |
| ·BIBAC克隆在大肠杆菌及农杆菌中的稳定性分析 | 第67页 |
| ·高密度膜的制备和文库的筛选 | 第67-68页 |
| 3 结果 | 第68-73页 |
| ·BIBAC文库构建及分析 | 第68-71页 |
| ·阳性克隆筛选及分析 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-76页 |
| 第三章 水稻BIBAC系统转化体系的建立 | 第76-92页 |
| 摘要 | 第76-77页 |
| Abstract | 第77-78页 |
| 1 引言 | 第78页 |
| 2 材料和方法 | 第78-82页 |
| ·植物材料、菌株和质粒 | 第78-80页 |
| ·水稻转化与影响转化效率有关因子的比较 | 第80-81页 |
| ·实验设计 | 第81页 |
| ·Gus检测 | 第81页 |
| ·PCR和Southern分析 | 第81-82页 |
| 3 结果和讨论 | 第82-92页 |
| ·培养基的组成。 | 第82-83页 |
| ·不同的水稻基因型对组织培养的反应 | 第83页 |
| ·预培养及预培养培养基pH值 | 第83-84页 |
| ·农杆菌悬浮培养基 | 第84-85页 |
| ·农杆菌的悬浮浓度对愈伤组织侵染的影响 | 第85页 |
| ·共培养温度对农杆菌侵染的影响 | 第85-86页 |
| ·农杆菌的去除与过渡培养 | 第86-87页 |
| ·选择和再生 | 第87-88页 |
| ·优化的BIBAC转化体系 | 第88-89页 |
| ·GUS检测，PCR和Southern分析 | 第89-92页 |
| 第四章 农杆菌介导的水稻大片段DNA转化 | 第92-109页 |
| 摘要 | 第92-93页 |
| Abstract | 第93-95页 |
| 1 引言 | 第95-96页 |
| 2 材料与方法 | 第96-100页 |
| ·植物材料，细菌菌株和质粒载体 | 第96-97页 |
| ·水稻转化与再生程序 | 第97-98页 |
| ·GUS检测 | 第98页 |
| ·PCR和Southern分析 | 第98-99页 |
| ·转基因植株的FISH检测 | 第99-100页 |
| 3 结果 | 第100-105页 |
| ·毒性辅助质粒及农杆菌菌株对转化效率的影响 | 第100-101页 |
| ·GUS检测，PCR和Southern分析 | 第101-103页 |
| ·转基因的FISH分析 | 第103-104页 |
| ·转基因植株表型 | 第104-105页 |
| 4 讨论 | 第105-109页 |
| 参考文献 | 第109-129页 |
| 附录 | 第129-150页 |
| 在读期间发表和待发表论文 | 第150-151页 |
| 致谢 | 第151页 |
