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健骨二仙丸防治骨质疏松症机理及蛋白质组研究

中文摘要第1-17页
英文摘要第17-26页
前言:第26-39页
 一 背景第26页
 二 骨质疏松症的概念、分类和诊断标准第26-27页
 三 原发性骨质疏松症的病因与发病机理第27-30页
 四 原发性骨质疏松症的临床治疗进展第30-32页
 五 中医药防治原发性骨质疏松症的研究和临床进展第32-33页
 六 益气补肾法防治原发性骨质疏松症的研究第33-37页
 七 展望第37-39页
研究内容:第39-70页
 第一部分 健骨二仙丸对去卵巢大鼠骨质疏松防治的生物力学和骨形态计量学研究第39-54页
  1 实验材料第39-41页
  2 实验方法第41-44页
   2.1 动物造模及取材方法第41-42页
   2.2 生物力学测定方法第42页
   2.3 骨形态计量学分析方法第42-43页
   2.4 健骨二仙丸实验制剂药物成份分析第43-44页
   2.5 健骨二仙丸实验制剂和动物饲料化学成分检测第44页
  3 实验结果第44-54页
   3.1 大鼠体重的变化第44-45页
   3.2 大鼠子宫重量变化第45页
   3.3 骨生物力学实验结果第45-46页
   3.4 骨形态计量学结果第46-49页
   3.5 健骨二仙丸实验制剂药物成份分析第49-54页
 第二部分 健骨二仙丸对大鼠体外培养成骨细胞作用的研究第54-62页
  1 实验材料第54-56页
  2 实验方法第56-58页
   2.1 新生大鼠颅骨成骨细胞分离与培养第56页
   2.2 成骨细胞的鉴定第56页
   2.3 成骨细胞的药物处理第56-57页
   2.4 MTT法成骨细胞增殖和活性检测第57页
   2.5 Western免疫印迹检测蛋白激酶C(PKC),Bag-1表达第57-58页
  3 结果第58-62页
   3.1 成骨细胞的鉴定第58-59页
   3.2 MTT法成骨细胞增殖和活性检测结果第59-60页
   3.3 健骨二仙丸提取物和Premarin对培养成骨细胞蛋白激酶C的表达的影响,及Tamoxifen对其作用的影响。第60-61页
   3.4 健骨二仙丸提取物对培养成骨细胞抗凋亡蛋白Bag-1表达的影响第61-62页
 第三部分 健骨二仙丸对去卵巢大鼠骨质疏松防治的蛋白质组学学研究第62-70页
  1 实验材料第62-63页
  2 实验方法第63-66页
   2.1 取材及标本中总蛋白质提取、定量第63-64页
   2.2 蛋白质双向凝胶电泳及凝胶的银染第64-65页
   2.3 蛋白质双向电泳凝胶图象的扫描及其分析第65页
   2.4 差异蛋白质斑点的撷取和质谱上样前处理第65-66页
   2.5 差异蛋白质的基质辅助激光触吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析第66页
   2.6 蛋白质肽指纹图谱的数据库检索和分析第66页
  3 实验结果第66-70页
   3.1 蛋白质双向电泳图象及其差异蛋白分析第66页
   3.2 差异蛋白MALDI-TOF-MS肽指纹图谱(按1-11的编号顺序附后)第66页
   3.3 差异蛋白肽指纹图谱的数据库检索和分析结果第66-70页
讨论:第70-101页
 一、 关于实验设计中一些基本问题的讨论第70-73页
  1 实验动物与造模方式的选择第70页
  2 实验动物的分组第70页
  3 造模与治疗的时机和时间第70-71页
  4 动物给药剂量与治疗期限第71页
  5 关于动物饲料和实验药物的化学成分第71页
  6 实验设计的临床前研究目的第71页
  7 关于中药成分的分析第71-73页
 二、 健骨二仙丸防治去卵巢大鼠骨质疏松的生物力学和骨形态计量学结果讨论第73-80页
  1 去卵巢大鼠模型体重与子宫重量变化第73页
  2 各组实验动物骨生物力学的变化第73-75页
  3 各组实验动物骨形态计量学结果的分析第75-78页
  4 本实验生物力学与骨形态计量学结果的比较分析第78-79页
  5 小结第79-80页
 三、 健骨二仙丸对大鼠体外培养成骨细胞影响的讨论第80-87页
  1 关于体外研究在本实验中的意义第80页
  2 实验设计中一些基本参数的设定第80-81页
   2.1 实验选择他莫昔芬(Tamoxtfen)作为雌激素受体阻断剂的根据第80-81页
   2.2 雌激素受体阻滞剂Tamoxifen的浓度确定第81页
   2.3 健骨二仙丸实验制剂和Premarin用于体外培养细胞研究时的浓度确定第81页
   2.4 体外培养细胞研究中药物作用时间的确定第81页
  3 分离培养成骨细胞的鉴定第81页
  4 健骨二仙丸实验制剂和Premarin对大鼠成骨细胞增殖和活性的影响第81-82页
  5 健骨二仙丸不是通过雌激素受体途径生效,与Premarin有不同的作用机理第82-83页
  6 健骨二仙丸提取物和Premarin促进培养成骨细胞蛋白激酶C(PKC)的表达,及Tamoxifen对其作用的影响第83-84页
  7 Bag-1蛋白参与了健骨二仙丸的抗细胞凋亡作用机制和基因转录的核受体调节作用第84-86页
  8 体外成骨细胞培养研究与动物模型研究结果的对照分析第86页
  9 小结第86-87页
 四、 健骨二仙丸对去卵巢大鼠骨质疏松防治的蛋白质组学学研究第87-101页
  1 蛋白质组学方法在中医药现代研究中的意义和应用第87-89页
  2 本研究蛋白质组学实验结果第89-98页
   2.1 γ-氨基丁酸A受体(α)表达量在各实验组间的差异及其意义第89-90页
   2.2 血管生成素相关蛋白3表达量在各实验组间的差异及其意义第90-91页
   2.3 维生素D受体表达量在各实验组间的差异及其意义第91-92页
   2.4 PEST型酪氨酸磷酰酯酶结合蛋白表达量在各实验组间的差异及其意义第92-93页
   2.5 NFkB必须调节子表达量在各实验组间的差异及其意义第93-94页
   2.6 雌激素受体(β)表达量在各实验组间的差异及其意义第94-97页
   2.7 C激酶结合蛋白表达量在各实验组间的差异及其意义第97-98页
   2.8 关于其他未鉴定蛋白质的说明第98页
  3 从整体上分析蛋白质组学研究结果第98-100页
  4 小结第100-101页
结论:第101-105页
 1 本实验的主要结论和对健骨二仙丸防治骨质疏松症的综合评价第101页
 2 关于原发性骨质疏松症的一点理论构想及其依据第101-103页
 3 问题与展望第103-105页
主要参考文献第105-115页
致谢第115-116页
博士研究生期间的主要工作情况第116-117页
英文缩写词语表第117-118页
差异蛋白MALDI-TOF-MS肽指纹图谱第118-128页

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