中文摘要 | 第1-8页 |
引言 | 第8-9页 |
文献综述 | 第9-17页 |
实验部分 | 第17-39页 |
A 嗜水气单胞菌J-1株W菌毛的提纯及生化、免疫特性分析 | 第17-26页 |
摘要 | 第17-18页 |
1 材料与方法 | 第18-20页 |
1.1 W菌毛的提取 | 第18页 |
1.1.1 菌株复壮 | 第18页 |
1.1.2 电镜观察 | 第18页 |
1.1.3 W菌毛的提取 | 第18页 |
1.2 W菌毛的提纯 | 第18页 |
1.3 W菌毛的理化性质分析 | 第18-19页 |
1.3.1 分子量的测定 | 第18-19页 |
1.3.2 糖蛋白染色 | 第19页 |
1.4 W菌毛免疫学特性分析 | 第19页 |
1.4.1 W菌毛抗血清的制备 | 第19页 |
1.4.2 免疫转印 | 第19页 |
1.4.2.1 半干转印法免疫转印 | 第19页 |
1.4.2.2 酶联免疫复合物染色 | 第19页 |
1.5 W菌毛的表达特性 | 第19-20页 |
1.5.1 温度的影响 | 第19-20页 |
1.5.2 培养基的影响 | 第20页 |
1.5.3 不同抽提方法的比较 | 第20页 |
2 结果 | 第20-24页 |
2.1 电镜观察 | 第20-22页 |
2.2 W菌毛的纯化 | 第22页 |
2.3 W菌毛的理化性质 | 第22页 |
2.3.1 SDS-PAGE | 第22页 |
2.3.2 糖蛋白染色 | 第22页 |
2.4 W菌毛免疫学特性 | 第22-23页 |
2.5 W菌毛的表达特性 | 第23-24页 |
3 讨论 | 第24-26页 |
B 嗜水气单胞菌J-1株粘附素的粘附特性 | 第26-34页 |
摘要 | 第26-27页 |
1 材料与方法 | 第27-28页 |
1.1 试验菌株及培养 | 第27页 |
1.2 细胞培养 | 第27页 |
1.3 W菌毛提取及抗血清的制备 | 第27页 |
1.4 血凝特性分析 | 第27页 |
1.4.1 血凝试验 | 第27页 |
1.4.2 血凝抑制试验 | 第27页 |
1.5 细胞粘附 | 第27-28页 |
1.5.1 EPC细胞粘附 | 第27页 |
1.5.2 EPC细胞粘附抑制 | 第27-28页 |
1.5.3 HEp-2细胞粘附 | 第28页 |
1.5.4 HEp-2细胞粘附抑制 | 第28页 |
2 结果 | 第28-32页 |
2.1 血凝试验 | 第28-29页 |
2.2 血凝抑制试验 | 第29页 |
2.3 细胞粘附 | 第29-32页 |
2.3.1 EPC细胞粘附及粘附抑制试验 | 第29页 |
2.3.2 HEp-2细胞粘附 | 第29页 |
2.3.3 HEp-2细胞粘附抑制试验 | 第29-32页 |
3 讨论 | 第32-34页 |
C 嗜水气单胞菌J-1株W菌毛基因定位 | 第34-39页 |
摘要 | 第34页 |
1 材料与方法 | 第34-35页 |
1.1 重组质粒的构建 | 第34-35页 |
1.1.1 Ah J-1株基因组DNA的提取和酶切分析 | 第34页 |
1.1.2 线性化载体的获得和连接 | 第34-35页 |
1.1.3 连接物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第35页 |
1.2 重组菌的表达 | 第35页 |
1.3 阳性克隆的筛选 | 第35页 |
1.3.1 Dot-ELISA检测 | 第35页 |
1.3.2 免疫转印检测 | 第35页 |
1.4 重组质粒的酶切、鉴定 | 第35页 |
2 结果 | 第35-37页 |
2.1 限制性内切酶的选择 | 第35页 |
2.2 重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第35-37页 |
2.3 重组质粒的酶切、鉴定 | 第37页 |
3 讨论 | 第37-39页 |
结论 | 第39-40页 |
英文摘要 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
致谢 | 第48页 |