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外源性人野生型P53基因和单纯疱疹病毒的脱氧胸苷激酶基因治疗胃癌的实验研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-14页
英文缩略语简表第14-17页
前言第17-19页
第一部分 人野生型P53基因对人胃癌细胞的影响第19-53页
 主要仪器、材料和试剂第19-23页
  一、主要仪器第19页
  二、主要材料和试剂第19-23页
 主要实验方法第23-32页
  一、人野生型TP53基因真核表达载体的构建第23-28页
  二、SGC7901细胞的转染及筛选第28页
  三、细胞基因组DNA的分子杂交第28-30页
  四、转基因细胞形态及生长曲线测定第30-31页
  五、转基因细胞的流式细胞仪分析第31-32页
  六、细胞致瘤力观察第32页
  七、统计学处理第32页
 结果第32-45页
  一、质粒的酶切鉴定第32-33页
  二、质粒DNA的纯化第33-34页
  三、将wtTP53基因转入胃癌细胞第34页
  四、wtTP53基因对胃癌细胞形态及生长曲线的影响第34-35页
  五、细胞周期改变第35-36页
  六、SGC_(7901)/wtp53细胞肿瘤相关蛋白表达第36-38页
  七、SGC_(7901)/wtP53~+细胞致瘤力观察第38-39页
  照片第39-45页
 讨论第45-53页
  一.wtTP53基因真核表达载体的构建第45-46页
  二.目的基因的转移方法第46-49页
  三.外源性野生型TP53基因对胃癌细胞的影响第49-53页
第二部分 HSV-TK基因治疗系统对人胃癌的治疗作用第53-72页
 主要仪器、材料和试剂第53-54页
 主要实验方法第54-60页
  一、HSV1-TK基因真核表达载体的构建第54-56页
  二、胃癌细胞系SGC-7901的转染及筛选第56-57页
  三、转基因细胞形态及生长曲线观察第57页
  四、细胞总RNA的分子杂交第57-58页
  五、SGC_(7901)/TK~+对GCV的体外敏感性测定(MTT法)第58-59页
  六、旁观者效应测定第59页
  七、SGC_(7901)/TK~+对GCV的体内敏感性测定第59-60页
 结果第60-67页
  一、质粒的酶切鉴定第60-61页
  二、HSV1-TK基因对胃癌细胞形态及生长曲线的影响第61页
  三、RNA斑点杂交第61-62页
  四、GCV对SGC_(7901)/TK~+的杀伤作用第62-63页
  五、旁观者效应第63页
  六、GCV对SGC_(7901)/TK~+的体内抑制作用第63-65页
  照片第65-67页
 讨论第67-72页
  一、HSV-TK基因真核表达载体的构建第67页
  二、HSV1-TK基因转入胃癌细胞第67-68页
  三、噻唑蓝活细胞染色法在细胞毒性试验中应用第68页
  四、HSV-TK/GCV系统对胃癌细胞的杀伤作用第68-70页
  五、HSV-TK/GCV系统的旁观者效应第70页
  六、HSV-TK/GCV系统的缺陷第70-72页
小结第72-73页
致谢第73-74页
参考文献第74-82页
文献综述第82-112页
 一、肿瘤的基因治疗第82-88页
  1.基因治疗的基本原理和方法第82-83页
  2.淋巴因子基因治疗第83页
  3.“疫苗”基因治疗第83-84页
  4.肿瘤相关基因治疗第84-85页
  5.细胞毒性基因治疗第85-86页
  6.化疗相关基因治疗第86-88页
 二、TP53基因与肿瘤的基因治疗第88-101页
  1.TP53基因及其产物P53蛋白第88-89页
  2.P53的功能第89-91页
  3.P53的作用机理第91-93页
  4.p53与细胞调亡第93页
  5.人类恶性肿瘤P53基因的异常第93-95页
  6.外源性野生型P53基因治疗人类恶性肿瘤的实验研究第95-101页
 三、肿瘤药物敏感基因与肿瘤的基因治疗第101-112页
  1.肿瘤药物敏感基因治疗系统第101-104页
  2.药物敏感基因治疗系统的旁观者效应第104-105页
  3.药物敏感基因转移治疗恶性肿瘤第105-106页
  4.药敏基因治疗的靶向性第106-108页
  5.药物敏感基因治疗的缺陷第108-112页

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