中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-14页 |
英文缩略语简表 | 第14-17页 |
前言 | 第17-19页 |
第一部分 人野生型P53基因对人胃癌细胞的影响 | 第19-53页 |
主要仪器、材料和试剂 | 第19-23页 |
一、主要仪器 | 第19页 |
二、主要材料和试剂 | 第19-23页 |
主要实验方法 | 第23-32页 |
一、人野生型TP53基因真核表达载体的构建 | 第23-28页 |
二、SGC7901细胞的转染及筛选 | 第28页 |
三、细胞基因组DNA的分子杂交 | 第28-30页 |
四、转基因细胞形态及生长曲线测定 | 第30-31页 |
五、转基因细胞的流式细胞仪分析 | 第31-32页 |
六、细胞致瘤力观察 | 第32页 |
七、统计学处理 | 第32页 |
结果 | 第32-45页 |
一、质粒的酶切鉴定 | 第32-33页 |
二、质粒DNA的纯化 | 第33-34页 |
三、将wtTP53基因转入胃癌细胞 | 第34页 |
四、wtTP53基因对胃癌细胞形态及生长曲线的影响 | 第34-35页 |
五、细胞周期改变 | 第35-36页 |
六、SGC_(7901)/wtp53细胞肿瘤相关蛋白表达 | 第36-38页 |
七、SGC_(7901)/wtP53~+细胞致瘤力观察 | 第38-39页 |
照片 | 第39-45页 |
讨论 | 第45-53页 |
一.wtTP53基因真核表达载体的构建 | 第45-46页 |
二.目的基因的转移方法 | 第46-49页 |
三.外源性野生型TP53基因对胃癌细胞的影响 | 第49-53页 |
第二部分 HSV-TK基因治疗系统对人胃癌的治疗作用 | 第53-72页 |
主要仪器、材料和试剂 | 第53-54页 |
主要实验方法 | 第54-60页 |
一、HSV1-TK基因真核表达载体的构建 | 第54-56页 |
二、胃癌细胞系SGC-7901的转染及筛选 | 第56-57页 |
三、转基因细胞形态及生长曲线观察 | 第57页 |
四、细胞总RNA的分子杂交 | 第57-58页 |
五、SGC_(7901)/TK~+对GCV的体外敏感性测定(MTT法) | 第58-59页 |
六、旁观者效应测定 | 第59页 |
七、SGC_(7901)/TK~+对GCV的体内敏感性测定 | 第59-60页 |
结果 | 第60-67页 |
一、质粒的酶切鉴定 | 第60-61页 |
二、HSV1-TK基因对胃癌细胞形态及生长曲线的影响 | 第61页 |
三、RNA斑点杂交 | 第61-62页 |
四、GCV对SGC_(7901)/TK~+的杀伤作用 | 第62-63页 |
五、旁观者效应 | 第63页 |
六、GCV对SGC_(7901)/TK~+的体内抑制作用 | 第63-65页 |
照片 | 第65-67页 |
讨论 | 第67-72页 |
一、HSV-TK基因真核表达载体的构建 | 第67页 |
二、HSV1-TK基因转入胃癌细胞 | 第67-68页 |
三、噻唑蓝活细胞染色法在细胞毒性试验中应用 | 第68页 |
四、HSV-TK/GCV系统对胃癌细胞的杀伤作用 | 第68-70页 |
五、HSV-TK/GCV系统的旁观者效应 | 第70页 |
六、HSV-TK/GCV系统的缺陷 | 第70-72页 |
小结 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
文献综述 | 第82-112页 |
一、肿瘤的基因治疗 | 第82-88页 |
1.基因治疗的基本原理和方法 | 第82-83页 |
2.淋巴因子基因治疗 | 第83页 |
3.“疫苗”基因治疗 | 第83-84页 |
4.肿瘤相关基因治疗 | 第84-85页 |
5.细胞毒性基因治疗 | 第85-86页 |
6.化疗相关基因治疗 | 第86-88页 |
二、TP53基因与肿瘤的基因治疗 | 第88-101页 |
1.TP53基因及其产物P53蛋白 | 第88-89页 |
2.P53的功能 | 第89-91页 |
3.P53的作用机理 | 第91-93页 |
4.p53与细胞调亡 | 第93页 |
5.人类恶性肿瘤P53基因的异常 | 第93-95页 |
6.外源性野生型P53基因治疗人类恶性肿瘤的实验研究 | 第95-101页 |
三、肿瘤药物敏感基因与肿瘤的基因治疗 | 第101-112页 |
1.肿瘤药物敏感基因治疗系统 | 第101-104页 |
2.药物敏感基因治疗系统的旁观者效应 | 第104-105页 |
3.药物敏感基因转移治疗恶性肿瘤 | 第105-106页 |
4.药敏基因治疗的靶向性 | 第106-108页 |
5.药物敏感基因治疗的缺陷 | 第108-112页 |