| 提要 | 第1-8页 |
| 第一章 前言 | 第8-38页 |
| ·基因和基因工程的发展简史 | 第9-13页 |
| ·核酸的化学组成 | 第13-19页 |
| ·DNA 的生物合成 | 第19-23页 |
| ·DNA 的人工合成 | 第23-34页 |
| ·全基因合成策略与原则 | 第34-36页 |
| ·本研究目的与意义 | 第36-38页 |
| 第二章 材料与方法 | 第38-48页 |
| ·实验中用到的试剂 | 第38-39页 |
| ·实验中用到的仪器 | 第39-40页 |
| ·寡核苷酸的溶解 | 第40页 |
| ·DA-PCR 反应 | 第40-41页 |
| ·OE-PCR 反应 | 第41-42页 |
| ·T7 核酸内切酶I 处理 | 第42页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒DNA | 第42-43页 |
| ·限制性酶切反应 | 第43-44页 |
| ·重组载体连接反应 | 第44-45页 |
| ·重组载体的电击转化 | 第45-46页 |
| ·阳性克隆的PCR 法鉴定 | 第46-48页 |
| 第三章 基因合成策略与方案设计 | 第48-64页 |
| ·寡核苷酸拆分的长度 | 第48-52页 |
| ·重迭区域的片段长度 | 第52-54页 |
| ·化学合成寡核苷酸的质量 | 第54-57页 |
| ·密码子的选择 | 第57页 |
| ·拟合成序列的互补性 | 第57-60页 |
| ·必要元件的添加 | 第60页 |
| ·退火程序的优化 | 第60页 |
| ·T7 核酸内切酶Ⅰ处理 | 第60-61页 |
| ·DNA 聚合酶的选择 | 第61-64页 |
| 第四章 E.coli 偏爱密码子编码人生长激素基因的合成 | 第64-80页 |
| ·hGH 的氨基酸序列 | 第64-65页 |
| ·E.coli 密码子频率表 | 第65-66页 |
| ·E.coli 偏爱密码子编码的人生长激素基因 | 第66-68页 |
| ·拟合成序列全长 | 第68-69页 |
| ·寡核苷酸的拆分 | 第69-70页 |
| ·合成方案 | 第70-71页 |
| ·DA-PCR 条件优化及结果 | 第71-73页 |
| ·OE-PCR 结果 | 第73页 |
| ·测序载体pUC-hGH 的构建与转化 | 第73-75页 |
| ·测序结果 | 第75-80页 |
| 第五章 E.coli 偏爱密码子编码人白介素-18 基因的合成 | 第80-96页 |
| ·IL-18 的氨基酸序列 | 第81-82页 |
| ·E.coli 密码子频率表 | 第82页 |
| ·E.coli 偏爱密码子编码的人IL-18 基因 | 第82-83页 |
| ·拟合成序列全长 | 第83-84页 |
| ·寡核苷酸的拆分 | 第84-85页 |
| ·两步法合成方案 | 第85-86页 |
| ·DA-PCR 结果 | 第86-87页 |
| ·OE-PCR 结果 | 第87页 |
| ·一步法合成方案 | 第87-88页 |
| ·一步法合成结果 | 第88页 |
| ·测序载体pUC-hGH 的构建与转化 | 第88-89页 |
| ·测序结果 | 第89-96页 |
| 第六章 毕赤酵母偏爱密码子编码人集落刺激因子基因的合成 | 第96-118页 |
| ·G-CSF 的氨基酸序列 | 第98页 |
| ·Pichia pastoris 密码子频率表 | 第98-99页 |
| ·Pichia pastoris 偏爱密码子编码的人G-CSF 基因 | 第99-101页 |
| ·拟合成序列全长 | 第101页 |
| ·寡核苷酸的拆分 | 第101-102页 |
| ·合成方案 | 第102-103页 |
| ·基因合成结果 | 第103-104页 |
| ·测序载体pUC-G-CSF 的构建与转化 | 第104页 |
| ·测序结果 | 第104-118页 |
| 第七章 合成基因中错误碱基的修复 | 第118-126页 |
| ·合成基因中碱基错误的分布 | 第119-121页 |
| ·寡核苷酸覆盖法 | 第121-122页 |
| ·OCM 修正效果的验证 | 第122-126页 |
| 第八章 结论 | 第126-130页 |
| ·基因设计与密码子选择 | 第126-127页 |
| ·寡核苷酸的拆分与设计 | 第127页 |
| ·基于 PCR 的基因合成 | 第127页 |
| ·使用 T7 核酸内切酶 I | 第127页 |
| ·合成基因中错误碱基的修复 | 第127-128页 |
| ·合成方法的验证 | 第128-130页 |
| 参考文献 | 第130-134页 |
| 致谢 | 第134-136页 |
| 攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第136-138页 |
| 中文摘要 | 第138-140页 |
| Abstract | 第140-141页 |
