| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-36页 |
| ·微生物冶金(Bioleaching) | 第11-18页 |
| ·研究进展 | 第11-12页 |
| 1..1.2 面临的主要挑战 | 第12页 |
| ·A.ferrooxidans菌及其硫氧化系统介绍 | 第12-18页 |
| ·亚硫酸还原酶(Sulfite Reductase,SiR) | 第18-34页 |
| ·亚硫酸还原酶 | 第18-23页 |
| ·α亚基黄素蛋白 | 第23-29页 |
| ·β亚基血红素蛋白 | 第29-33页 |
| ·电子传递机理 | 第33-34页 |
| ·课题的研究目的与研究内容 | 第34-36页 |
| ·依据和目的 | 第34-35页 |
| ·论文的主要研究内容 | 第35页 |
| ·论文课题受资助情况 | 第35-36页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第36-49页 |
| ·实验材料 | 第36-40页 |
| ·菌种 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·A.ferrooxidans菌基因组抽提试剂 | 第37页 |
| ·PCR产物回收试剂盒 | 第37页 |
| ·DNA快速纯化回收试剂盒(胶回收试剂盒) | 第37-38页 |
| ·质粒提取试剂 | 第38页 |
| ·不连续体系SDS-PAGE电泳 | 第38-39页 |
| ·SDS-PAGE胶保存试剂及装置 | 第39页 |
| ·蛋白亲和纯化试剂 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-46页 |
| ·PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·酶切PCR产物及载体pLM1 | 第41页 |
| ·载体和目的片段连接反应 | 第41-42页 |
| ·转化 | 第42页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第42-43页 |
| ·蛋白质表达转化 | 第43页 |
| ·蛋白质的条件表达 | 第43页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第43-45页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第45-46页 |
| ·定点突变 | 第46-47页 |
| ·引物的设计 | 第46页 |
| ·PCR扩增 | 第46页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第46-47页 |
| ·突变蛋白质的表达及纯化 | 第47页 |
| ·测试分析方法 | 第47-49页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第47页 |
| ·紫外分光光度计(UV Scanning) | 第47页 |
| ·电子顺磁共振(EPR) | 第47-48页 |
| ·基质辅助激光解吸串联分行时间质谱(MALDI-TOF) | 第48页 |
| ·分子结构模型图的模拟 | 第48-49页 |
| 第三章 α亚基黄素蛋白的表达、纯化、活性测定及分子模型 | 第49-59页 |
| ·黄素蛋白编码cysJ基因的克隆 | 第49-51页 |
| ·cysJ的克隆 | 第49-50页 |
| ·连接反应及阳性克隆的筛选 | 第50-51页 |
| ·阳性克隆送样测序 | 第51页 |
| ·黄素蛋白的表达 | 第51-57页 |
| ·黄素蛋白表达条件的确定 | 第51-52页 |
| ·黄素蛋白大规模的表达 | 第52页 |
| ·SDS-PAGE分析黄素蛋白 | 第52-53页 |
| ·UV/Vis分析黄素蛋白 | 第53-54页 |
| ·黄素蛋白(SiR-FP)活性测定 | 第54-55页 |
| ·分子模拟黄素蛋白 | 第55-57页 |
| ·本章小结 | 第57-59页 |
| 第四章 β亚基血红素蛋白的表达、纯化、定点突变及分子模型 | 第59-71页 |
| ·血红素蛋白的编码基因cysI的克隆 | 第59-61页 |
| ·cysI的克隆 | 第59-60页 |
| ·连接反应及阳性克隆的筛选 | 第60-61页 |
| ·阳性克隆送样测序 | 第61页 |
| ·血红素蛋白的表达 | 第61-67页 |
| ·血红素蛋白蛋白表达条件的确定 | 第61-62页 |
| ·血红素蛋白大规模的表达 | 第62页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析纯化的样品 | 第62-63页 |
| ·UV/Vis分析血红素蛋白 | 第63-64页 |
| ·电子顺磁共振波谱(EPR) | 第64-65页 |
| ·分子模拟血红素蛋白 | 第65-67页 |
| ·血红素蛋白的定点突变 | 第67-70页 |
| ·血红素蛋白的定点突变 | 第67页 |
| ·突变蛋白质的表达、纯化 | 第67-68页 |
| ·突变蛋白质的SDS-PAGE电泳检测 | 第68页 |
| ·UV/Vis分析突变蛋白 | 第68-70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 第五章 亚硫酸还原酶的α亚基黄素蛋白和β亚基血红素蛋白的相互作用 | 第71-74页 |
| ·黄素蛋白和血红素蛋白的相互作用 | 第71-72页 |
| ·相互作用 | 第71页 |
| ·非变性电泳分析相互作用结果 | 第71-72页 |
| ·黄素蛋白与合成亚硫酸还原酶的活性的对比测定 | 第72-73页 |
| ·本章小结 | 第73-74页 |
| 第六章 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第83页 |
