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嗜酸氧化亚铁硫杆菌中铁硫簇调控蛋白IscR的表达、纯化及性质研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
Content第7-9页
Chapter 1 Introductions第9-24页
   ·Structure, function, formation and regulation of biological iron-sulfur clusters第9-22页
     ·Structures and Properties of Biological [Fe-S] Clusters第9-12页
     ·Functions of Biological [Fe-S] Clusters第12-15页
     ·Formation of Biological [Fe-S] Clusters第15-19页
     ·IscR acts as an represses expression factor in response for the isc operon encoding [Fe-S] cluster assembly proteins in Escherichia coli第19-20页
     ·IscR acts as an activator in response to oxidative stress for the suf operon encoding Fe-S assembly proteins第20-22页
   ·The objective and main content of the present study第22-24页
     ·The objective of the present study第22-23页
     ·The main content of the present study第23-24页
Chapter 2 Expression, purification and characterization of an iron-sulfur cluster assembly Regulator IscR from A. ferrooxidans第24-34页
   ·Materials第25-26页
   ·Methods第26-28页
     ·Cloning of the IscR gene from A. ferrooxidans第26-27页
     ·Expression of recombinant protein of IscR from A. ferrooxidans第27页
     ·Purification of Isc R from A. ferrooxidans第27-28页
     ·UV-Vis scanning and EPR spectra第28页
     ·Determination of iron and sulfur content第28页
   ·Results and discussion第28-33页
     ·Cloning of the IscR gene from A. ferrooxidans第28-30页
     ·Expression and purification of IscR from A. ferrooxidans第30-31页
     ·UV-scanning and EPR spectra of the IscR from A. ferrooxidans第31-33页
   ·Conclusion第33-34页
Chapter 3 Site-directed mutagenesis of an iron-sulfur cluster assembly Regulator IscR from A. ferrooxidans and Iron-sulfur cluster assembly in apoIscR in vitro第34-48页
   ·Materials第34-35页
   ·Methods第35-38页
     ·Construction of A. ferrooxidans IscR mutant plasmids第35-36页
     ·Expression of the IscR of mutant proteins第36页
     ·Purification of the IscR of the mutant proteins第36-37页
     ·UV-Vis Scanning and EPR Spectra第37页
     ·Preparation of apoIscR第37页
     ·Iron-sulfur cluster assembly of IscR in vitro第37页
     ·Determination of iron and sulifde content of IscR第37-38页
   ·Results and discussion第38-47页
     ·The conserved residues for iron-sulfur cluster binding第38-39页
     ·Expression and Purification of IscR Mutant Proteins第39-40页
     ·Iron and sulfide content of IscR mutant proteins第40-41页
     ·UV-Scanning and EPR Spectra of IscR Mutant Proteins第41-43页
     ·The [2Fe2S] cluster assembly in IscR in vivo required scaffold proteins第43-47页
   ·Conclusion第47-48页
Chapter 4 Conclusion第48-49页
Abbreviations第49-50页
References第50-56页
Acknowledgements第56-58页
Main achievements第58页

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