摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
前言 | 第11页 |
1 文献综述 | 第11-24页 |
·不同鹅种的主要生产性能差异 | 第11-15页 |
·产肝性能 | 第11-12页 |
·生长速度与屠宰性状 | 第12-13页 |
·肉质性状 | 第13-15页 |
·基因差异表达的研究方法 | 第15-20页 |
·消减杂交法(Subtractive Hybridization) | 第15页 |
·mRNA差异显示(mRNA differential display) | 第15-16页 |
·代表性序列差异分析(Representational Difference Analysis) | 第16-17页 |
·基因表达系统分析(serial analysis of gene expression,SAGE) | 第17页 |
·基因芯片(Gene chips) | 第17-18页 |
·抑制消减杂交(Suppression subtractive hybridization) | 第18-20页 |
·抑制消减杂交技术在分离差异表达基因中的应用 | 第20-23页 |
·SSH在医学疾病方面的应用 | 第21页 |
·SSH在动物发育生物学方面的应用 | 第21-22页 |
·SSH在畜禽功能基因组研究中的应用 | 第22-23页 |
·研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-43页 |
·实验样品 | 第24页 |
·仪器和试剂 | 第24-28页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·主要试剂盒和试剂 | 第25页 |
·主要试剂配制 | 第25-28页 |
·试验方法 | 第28-43页 |
·肝脏细胞的培养 | 第28-29页 |
·肝细胞中总RNA的提取 | 第29-30页 |
·mRNA分离纯化 | 第30-31页 |
·抑制性消减杂交 | 第31-37页 |
·消减文库生成 | 第37-39页 |
·消减cDNA文库的斑点杂交筛选 | 第39-41页 |
·序列测定 | 第41页 |
·差异表达EST生物信息学分析 | 第41-43页 |
3 结果 | 第43-62页 |
·肝细胞的形态及活性变化 | 第43-44页 |
·肝细胞中总RNA提取、MRNA纯化及检测 | 第44-45页 |
·抑制消减杂交 | 第45-49页 |
·双链cDNA(dscDNA)的合成与酶切 | 第45-46页 |
·接头连接效率检测 | 第46页 |
·消减产物第二次PCR扩增 | 第46-47页 |
·消减效率检测 | 第47-49页 |
·消减文库中插入片段的PCR鉴定 | 第49页 |
·斑点杂交 | 第49-50页 |
·差异表达克隆序列分析 | 第50-62页 |
·测序、序列同源性检索及EST分类 | 第51页 |
·差异表达克隆中已知基因序列的分析 | 第51页 |
·差异表达克隆中已知EST分析 | 第51-52页 |
·差异表达克隆中全新的EST | 第52页 |
·差异表达基因功能相关分析 | 第52-62页 |
4 讨论 | 第62-70页 |
·肝细胞的分离和纯化 | 第62页 |
·肝细胞的活性检测 | 第62-63页 |
·抑制消减杂交的质量检测 | 第63-64页 |
·斑点杂交筛选阳性差异表达克隆 | 第64页 |
·已分离的差异表达基因的特征 | 第64-70页 |
·肌动蛋白(actin rprotein,ACTB) | 第65-66页 |
·结缔组织生长因子(conective tissue gowth factor,CTGF) | 第66-67页 |
·长链脂肪酸延伸酶(Elongation of long-chain fatty acids,ELOVL) | 第67-68页 |
·丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase) | 第68-69页 |
·翻译起始因子(eukaryotic translation initiationfactor,eIF) | 第69-70页 |
5 结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读学位期间所参与科研项目和发表的学术论文 | 第80页 |