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牦牛Hepcidin基因的克隆与原核表达

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 抗菌肽的研究进展第12-23页
   ·抗菌肽概述第12页
   ·抗菌肽的结构与理化特性第12-13页
     ·抗菌肽的结构第12-13页
     ·抗菌肽的理化特性第13页
   ·抗菌肽的种类第13-15页
   ·抗菌肽的作用机制第15-17页
   ·抗菌肽的应用及前景第17-20页
     ·在转抗菌肽基因动、植物中的应用第17-18页
     ·作为食品添加剂应用第18-19页
     ·在饲料工业中的应用第19页
     ·在医药工业中的应用第19-20页
   ·抗菌肽的基因工程第20-23页
     ·原核表达系统第21页
     ·真核表达系统第21-23页
第二章 HEPCIDIN 基因的研究进展第23-29页
   ·HEPCIDIN 的鉴定与分子结构第23-24页
   ·HEPCIDIN 在机体中的表达第24-25页
   ·HEPCIDIN 基因的功能第25-26页
     ·HEPCIDIN 的抗菌作用第25页
     ·HEPCIDIN 的铁代谢调节作用第25-26页
   ·HEPCIDIN 与铁代谢紊乱性的疾病第26-29页
     ·遗传性血色素沉着病第26-27页
     ·感染性或炎症性贫血第27页
     ·缺铁性贫血和缺氧性疾病第27-28页
     ·肝脏肿瘤性贫血第28-29页
第三章 牦牛HEPCIDIN 基因的克隆第29-41页
   ·实验材料第29-31页
     ·动物组织、载体及菌株第29页
     ·引物设计第29页
     ·试剂第29页
     ·主要的实验仪器和器械第29-30页
     ·溶液配制第30-31页
   ·实验方法第31-35页
     ·雄性牦牛肝脏总RNA 的提取第31页
     ·牦牛肝脏总RNA 反转录第31-32页
     ·扩增、回收目的基因第32-33页
     ·重组质粒PGEM-T/HEPCIDIN 的构建第33页
     ·重组质粒的鉴定和测序第33-35页
   ·结果与分析第35-39页
     ·RNA 的检测第35页
     ·RT-PCR 产物第35-36页
     ·重组质粒的PCR 鉴定和酶切鉴定第36页
     ·序列分析第36-37页
     ·序列比对第37-38页
     ·同源性分析第38页
     ·分子进化分析第38-39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-41页
第四章 牦牛HEPCIDIN 基因的原核表达第41-49页
   ·实验材料第41-42页
     ·载体和菌株第41页
     ·引物设计第41页
     ·试剂第41页
     ·溶液配制第41-42页
   ·实验方法第42-46页
     ·扩增带酶切位点的HEPCIDIN 编码区第42页
     ·回收扩增产物第42页
     ·获得PGEX-4T-1 表达载体第42-43页
     ·酶切带有酶切位点的HEPCIDIN 基因和PGEX-4T-1 表达载体第43页
     ·连接PGEX-4T-1 载体和HEPCIDIN 基因第43页
     ·转化PGEX-4T-1/HEPCIDIN 至E.COLI BL21(DE3)并提取质粒第43-44页
     ·PGEX-4T-1/HEPCIDIN 重组子的鉴定第44页
     ·HEPCIDIN 蛋白的诱导表达第44-46页
   ·结果与分析第46-48页
     ·PGEX-4T-1/HEPCIDIN 重组子的鉴定第46页
     ·牦牛HEPCIDIN 蛋白的SDS-PAGE 分析第46-48页
   ·讨论第48页
     ·融合蛋白的鉴定及表达条件优化第48页
     ·PGEX-4T-1 表达载体的选择第48页
   ·小结第48-49页
结论第49-50页
参考文献第50-56页
硕士期间发表论文第56-57页
致谢第57页

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