摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 抗菌肽的研究进展 | 第12-23页 |
·抗菌肽概述 | 第12页 |
·抗菌肽的结构与理化特性 | 第12-13页 |
·抗菌肽的结构 | 第12-13页 |
·抗菌肽的理化特性 | 第13页 |
·抗菌肽的种类 | 第13-15页 |
·抗菌肽的作用机制 | 第15-17页 |
·抗菌肽的应用及前景 | 第17-20页 |
·在转抗菌肽基因动、植物中的应用 | 第17-18页 |
·作为食品添加剂应用 | 第18-19页 |
·在饲料工业中的应用 | 第19页 |
·在医药工业中的应用 | 第19-20页 |
·抗菌肽的基因工程 | 第20-23页 |
·原核表达系统 | 第21页 |
·真核表达系统 | 第21-23页 |
第二章 HEPCIDIN 基因的研究进展 | 第23-29页 |
·HEPCIDIN 的鉴定与分子结构 | 第23-24页 |
·HEPCIDIN 在机体中的表达 | 第24-25页 |
·HEPCIDIN 基因的功能 | 第25-26页 |
·HEPCIDIN 的抗菌作用 | 第25页 |
·HEPCIDIN 的铁代谢调节作用 | 第25-26页 |
·HEPCIDIN 与铁代谢紊乱性的疾病 | 第26-29页 |
·遗传性血色素沉着病 | 第26-27页 |
·感染性或炎症性贫血 | 第27页 |
·缺铁性贫血和缺氧性疾病 | 第27-28页 |
·肝脏肿瘤性贫血 | 第28-29页 |
第三章 牦牛HEPCIDIN 基因的克隆 | 第29-41页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·动物组织、载体及菌株 | 第29页 |
·引物设计 | 第29页 |
·试剂 | 第29页 |
·主要的实验仪器和器械 | 第29-30页 |
·溶液配制 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-35页 |
·雄性牦牛肝脏总RNA 的提取 | 第31页 |
·牦牛肝脏总RNA 反转录 | 第31-32页 |
·扩增、回收目的基因 | 第32-33页 |
·重组质粒PGEM-T/HEPCIDIN 的构建 | 第33页 |
·重组质粒的鉴定和测序 | 第33-35页 |
·结果与分析 | 第35-39页 |
·RNA 的检测 | 第35页 |
·RT-PCR 产物 | 第35-36页 |
·重组质粒的PCR 鉴定和酶切鉴定 | 第36页 |
·序列分析 | 第36-37页 |
·序列比对 | 第37-38页 |
·同源性分析 | 第38页 |
·分子进化分析 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-40页 |
·小结 | 第40-41页 |
第四章 牦牛HEPCIDIN 基因的原核表达 | 第41-49页 |
·实验材料 | 第41-42页 |
·载体和菌株 | 第41页 |
·引物设计 | 第41页 |
·试剂 | 第41页 |
·溶液配制 | 第41-42页 |
·实验方法 | 第42-46页 |
·扩增带酶切位点的HEPCIDIN 编码区 | 第42页 |
·回收扩增产物 | 第42页 |
·获得PGEX-4T-1 表达载体 | 第42-43页 |
·酶切带有酶切位点的HEPCIDIN 基因和PGEX-4T-1 表达载体 | 第43页 |
·连接PGEX-4T-1 载体和HEPCIDIN 基因 | 第43页 |
·转化PGEX-4T-1/HEPCIDIN 至E.COLI BL21(DE3)并提取质粒 | 第43-44页 |
·PGEX-4T-1/HEPCIDIN 重组子的鉴定 | 第44页 |
·HEPCIDIN 蛋白的诱导表达 | 第44-46页 |
·结果与分析 | 第46-48页 |
·PGEX-4T-1/HEPCIDIN 重组子的鉴定 | 第46页 |
·牦牛HEPCIDIN 蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48页 |
·融合蛋白的鉴定及表达条件优化 | 第48页 |
·PGEX-4T-1 表达载体的选择 | 第48页 |
·小结 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
硕士期间发表论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |