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利用水稻启动子捕获系筛选水稻胚发育相关基因的初步研究

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
中文文摘第6-11页
第1章 绪论第11-27页
   ·课题背景第11页
   ·文献综述第11-25页
     ·植物胚胎发育分子生物学研究进展第11-18页
       ·原胚期第12-14页
       ·球形胚、心形胚过渡期第14-15页
       ·器官形成与成熟期第15-18页
     ·植物基因克隆的方法第18-25页
       ·PCR法第18页
       ·功能克隆第18-19页
       ·图位克隆第19页
       ·表型克隆第19-20页
       ·mRNA差异显示克隆第20页
       ·减法杂交技术第20-21页
       ·基因捕获第21-25页
   ·本课题的研究内容及技术路线第25-27页
第2章 水稻胚特异表达启动子捕获系的筛选第27-33页
   ·材料与方法第27-29页
     ·实验材料第27页
     ·实验方法第27-29页
       ·启动子捕获系的潮霉素抗性筛选第27页
       ·启动子捕获系的PCR分子检测第27-28页
       ·启动子捕获系的GUS活性检测第28-29页
   ·结果与分析第29-32页
     ·启动子捕获系潮霉素抗性筛选第29页
     ·启动子捕获系的PCR分子检测第29页
     ·启动子捕获系的GUS活性检测第29-32页
   ·讨论第32-33页
第3章 水稻胚倾向表达启动子捕获系W9154的获得及初步分析第33-43页
   ·材料与方法第33-36页
     ·水稻启动子捕获系W9154遗传分析第33页
     ·水稻启动子捕获系W9154的Southern blot分析第33页
     ·水稻启动子捕获系W9154的侧翼序列扩增及插入位点验证第33-34页
     ·候选基因OsG9154及其启动子OsP9154的生物信息学分析第34页
     ·候选基因OsG9154表达特征的RT-PCR分析第34-36页
       ·总RNA的提取:第34-35页
       ·DNaseI处理除基因组DNA第35页
       ·RT-PCR第35-36页
   ·结果与分析第36-41页
     ·水稻启动子捕获系W9154遗传分析第36页
     ·水稻启动子捕获系W9154捕获系的Southern blot分析第36页
     ·W9154捕获系T-DNA插入位点侧翼序列扩增及生物信息学分析第36-38页
     ·T-DNA插入位点验证第38页
     ·OsP9154的生物信息学分析第38-40页
     ·野生型水稻中候选基因OsG9154的表达特征分析第40-41页
   ·讨论第41-43页
第4章 水稻胚倾向表达基因OsG9154及其启动子OsP9154的克隆和功能初步分析第43-59页
   ·材料与方法第43-51页
     ·实验材料第43-45页
       ·供试水稻品种第43页
       ·菌株和质粒第43-44页
       ·主要试剂和仪器第44-45页
     ·实验方法第45-51页
       ·OsG9154基因及其启动子OsP9154的克隆第45-46页
       ·OsG9154及其启动子OsP9154的植物表达载体构建第46-49页
       ·表达载体转化农杆菌第49页
       ·农杆菌介导获得OsG9154及其启动子OsP9154的转基因水稻植株第49-50页
       ·转基因水稻植株的潮霉素检测第50页
       ·转基因水稻植株的GUS活性检测第50-51页
       ·转基因植株的分子检测第51页
   ·结果与分析第51-56页
     ·启动子OsP9154的克隆与植物表达载体构建第51-53页
     ·OsG9154基因分离及其正、反义表达载体的构建第53-55页
     ·农杆菌介导获得OsG9154及其启动子OsP9154的转基因水稻植株第55页
     ·启动子OsP9154转基因水稻植株的分子检测第55-56页
     ·启动子OsP9154转基因水稻植株组织器官的GUS活性检测第56页
   ·讨论第56-59页
结论第59-61页
附录第61-95页
参考文献第95-103页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第103-105页
致谢第105-107页
个人简历第107-109页

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