摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
中文文摘 | 第6-11页 |
第1章 绪论 | 第11-27页 |
·课题背景 | 第11页 |
·文献综述 | 第11-25页 |
·植物胚胎发育分子生物学研究进展 | 第11-18页 |
·原胚期 | 第12-14页 |
·球形胚、心形胚过渡期 | 第14-15页 |
·器官形成与成熟期 | 第15-18页 |
·植物基因克隆的方法 | 第18-25页 |
·PCR法 | 第18页 |
·功能克隆 | 第18-19页 |
·图位克隆 | 第19页 |
·表型克隆 | 第19-20页 |
·mRNA差异显示克隆 | 第20页 |
·减法杂交技术 | 第20-21页 |
·基因捕获 | 第21-25页 |
·本课题的研究内容及技术路线 | 第25-27页 |
第2章 水稻胚特异表达启动子捕获系的筛选 | 第27-33页 |
·材料与方法 | 第27-29页 |
·实验材料 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-29页 |
·启动子捕获系的潮霉素抗性筛选 | 第27页 |
·启动子捕获系的PCR分子检测 | 第27-28页 |
·启动子捕获系的GUS活性检测 | 第28-29页 |
·结果与分析 | 第29-32页 |
·启动子捕获系潮霉素抗性筛选 | 第29页 |
·启动子捕获系的PCR分子检测 | 第29页 |
·启动子捕获系的GUS活性检测 | 第29-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
第3章 水稻胚倾向表达启动子捕获系W9154的获得及初步分析 | 第33-43页 |
·材料与方法 | 第33-36页 |
·水稻启动子捕获系W9154遗传分析 | 第33页 |
·水稻启动子捕获系W9154的Southern blot分析 | 第33页 |
·水稻启动子捕获系W9154的侧翼序列扩增及插入位点验证 | 第33-34页 |
·候选基因OsG9154及其启动子OsP9154的生物信息学分析 | 第34页 |
·候选基因OsG9154表达特征的RT-PCR分析 | 第34-36页 |
·总RNA的提取: | 第34-35页 |
·DNaseI处理除基因组DNA | 第35页 |
·RT-PCR | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-41页 |
·水稻启动子捕获系W9154遗传分析 | 第36页 |
·水稻启动子捕获系W9154捕获系的Southern blot分析 | 第36页 |
·W9154捕获系T-DNA插入位点侧翼序列扩增及生物信息学分析 | 第36-38页 |
·T-DNA插入位点验证 | 第38页 |
·OsP9154的生物信息学分析 | 第38-40页 |
·野生型水稻中候选基因OsG9154的表达特征分析 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第4章 水稻胚倾向表达基因OsG9154及其启动子OsP9154的克隆和功能初步分析 | 第43-59页 |
·材料与方法 | 第43-51页 |
·实验材料 | 第43-45页 |
·供试水稻品种 | 第43页 |
·菌株和质粒 | 第43-44页 |
·主要试剂和仪器 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-51页 |
·OsG9154基因及其启动子OsP9154的克隆 | 第45-46页 |
·OsG9154及其启动子OsP9154的植物表达载体构建 | 第46-49页 |
·表达载体转化农杆菌 | 第49页 |
·农杆菌介导获得OsG9154及其启动子OsP9154的转基因水稻植株 | 第49-50页 |
·转基因水稻植株的潮霉素检测 | 第50页 |
·转基因水稻植株的GUS活性检测 | 第50-51页 |
·转基因植株的分子检测 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-56页 |
·启动子OsP9154的克隆与植物表达载体构建 | 第51-53页 |
·OsG9154基因分离及其正、反义表达载体的构建 | 第53-55页 |
·农杆菌介导获得OsG9154及其启动子OsP9154的转基因水稻植株 | 第55页 |
·启动子OsP9154转基因水稻植株的分子检测 | 第55-56页 |
·启动子OsP9154转基因水稻植株组织器官的GUS活性检测 | 第56页 |
·讨论 | 第56-59页 |
结论 | 第59-61页 |
附录 | 第61-95页 |
参考文献 | 第95-103页 |
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第103-105页 |
致谢 | 第105-107页 |
个人简历 | 第107-109页 |