| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-24页 |
| ·植物生长物质及其化学调控作用 | 第10-11页 |
| ·乙烯的生理作用 | 第11-15页 |
| ·乙烯在植物生长发育中的作用 | 第11-12页 |
| ·乙烯与营养生长 | 第11页 |
| ·乙烯与生殖生长 | 第11页 |
| ·乙烯与果实成熟 | 第11-12页 |
| ·乙烯与器官脱落 | 第12页 |
| ·乙烯与次生物质的排出 | 第12页 |
| ·乙烯在植物抗逆反应中的作用 | 第12-15页 |
| ·乙烯与水份胁迫 | 第13页 |
| ·乙烯与干旱胁迫 | 第13-14页 |
| ·乙烯与其他胁迫 | 第14页 |
| ·乙烯与植物的抗病性 | 第14-15页 |
| ·乙烯的生物合成途径研究进展 | 第15-23页 |
| ·乙烯的生物合成途径 | 第15-16页 |
| ·乙烯生物合成影响因素 | 第16页 |
| ·乙烯生物合成途径的分子生物学研究进展 | 第16-23页 |
| ·ACS 基因与ACO 基因的克隆及研究进展 | 第17-20页 |
| ·ACS 基因与 ACO 基因的启动子研究进展 | 第20-21页 |
| ·ACS 与 ACO 基因的表达特性研究 | 第21-23页 |
| ·乙烯生物合成的基因工程研究进展 | 第23页 |
| ·本研究的内容与意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-33页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·供试菌种和质粒 | 第24页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·主要分子生物学及生化试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·果蔗总RNA 的提取 | 第25页 |
| ·总RNA 提取方法 | 第25页 |
| ·总RNA 完整性及纯度检验 | 第25页 |
| ·果蔗基因组DNA 的提取及纯化 | 第25-26页 |
| ·基因组DNA 的提取方法（CTAB 法） | 第25-26页 |
| ·基因组DNA 的纯化（饱和苯酚法） | 第26页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的PCR 扩增 | 第26-27页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因的基因组DNA 的PCR 扩增 | 第26页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因的基因组cDNA 的PCR 扩增 | 第26-27页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的PCR 产物目的片段的回收 | 第27-28页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶（ACO）的PCR 产物目的片段的克隆 | 第28-30页 |
| ·目的片段与T 载体的连接 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第28页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第28页 |
| ·重组子质粒提取 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA的PCR鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组子酶切验证 | 第30页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的PCR 产物序列测定与比对分析 | 第30页 |
| ·基因测序 | 第30页 |
| ·序列的比对、分析 | 第30页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的southern 杂交分析 | 第30-32页 |
| ·探针的制备 | 第30-31页 |
| ·基因组DNA 的酶切 | 第31页 |
| ·凝胶电泳分离目的片段 | 第31页 |
| ·分子杂交 | 第31-32页 |
| ·免疫检测（显色） | 第32页 |
| ·半定量RT-PCR 法检测果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的转录表达 | 第32页 |
| ·ACC 氧化酶基因在根和叶片中的表达 | 第32页 |
| ·乙烯利诱导ACC 氧化酶基因的表达 | 第32页 |
| ·植物原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达蛋白表达 | 第32-33页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·ACC 氧化酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第33页 |
| ·植物真核表达载体的构建 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-47页 |
| ·果蔗基因组DNA 与总RNA 的提取 | 第33-34页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）在13 个果蔗材料中的PCR 扩增 | 第34页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的DNA 测序 | 第34-36页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的核苷酸序列分析 | 第36-37页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的氨基酸序列分析 | 第37-40页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的蛋白质结构分析 | 第40-41页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因编码蛋白的疏水性分析 | 第40-41页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因编码蛋白的二级结构分析 | 第41页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）系统进化分析 | 第41-42页 |
| ·果蔗基因组中ACC 氧化酶基因（ACO）的拷贝数分析 | 第42-43页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）的转录表达检测 | 第43-44页 |
| ·果蔗ACC 氧化酶基因（ACO）在根和叶中的表达 | 第43页 |
| ·乙烯利诱导ACO 基因的转录表达检测 | 第43-44页 |
| ·果蔗ACO基因原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达 | 第44-47页 |
| ·果蔗ACO 基因原核表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·目的蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第45页 |
| ·果蔗ACO 基因真核表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 4 讨论与结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录A 在 GeneBank 登录序列 | 第56-58页 |
| 附录B 果蔗 ACO 蛋白四级结构 | 第58-59页 |
| 附录C 缩写词表 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
