中文摘要 | 第16-19页 |
ABSTRACT | 第19-22页 |
第一章 前言 | 第24-36页 |
1. 昆虫表皮 | 第24-25页 |
1.1 表皮结构 | 第24-25页 |
1.2 表皮成分 | 第25页 |
2. 几丁质 | 第25-30页 |
2.1 几丁质简介 | 第25页 |
2.2 几丁质的合成和降解 | 第25-26页 |
2.3 几丁质排列 | 第26-27页 |
2.4 几丁质排列关键基因研究现状 | 第27-30页 |
2.4.1 几丁质脱乙酰基酶研究现状 | 第28-29页 |
2.4.2 Knickkopf的功能及研究进展 | 第29页 |
2.4.3 Retroactive的功能及研究进展 | 第29-30页 |
3. 昆虫的蜕皮过程 | 第30-31页 |
4. RNA干扰(RNAi)研究现状 | 第31-32页 |
5. 本论文的选题依据 | 第32页 |
6. 研究内容和意义 | 第32-36页 |
6.1 研究内容 | 第32页 |
6.2 研究目的和意义 | 第32-34页 |
6.3 技术路线图 | 第34-36页 |
第二章 飞蝗几丁质脱乙酰基酶基因(LmCDAs)鉴定和分子特性 | 第36-50页 |
1. 实验材料 | 第36-37页 |
1.1 供试昆虫 | 第36-37页 |
1.2 供试药剂 | 第37页 |
1.3 主要仪器设备 | 第37页 |
2. 实验方法 | 第37-41页 |
2.1 飞蝗LmCDAs的全长cDNA验证 | 第37-39页 |
2.1.1 飞蝗LmCDAs全长cDNA引物设计 | 第37-38页 |
2.1.2 飞蝗cDNA模板制备 | 第38页 |
2.1.3 PCR扩增 | 第38-39页 |
2.1.4 PCR产物纯化、连接、转化和测序 | 第39页 |
2.2 基因结构分析 | 第39页 |
2.3 功能域预测 | 第39-40页 |
2.4 系统进化树构建 | 第40页 |
2.5 不同组织部位和发育龄期的表达 | 第40-41页 |
2.5.1 不同组织部位表达 | 第40-41页 |
2.5.2 不同发育天数表达 | 第41页 |
3. 结果分析 | 第41-46页 |
3.1 鉴定LmCDAs | 第41-44页 |
3.1.1 LmCDAs全长cDNA扩增 | 第41页 |
3.1.2 LmCDAs编码氨基酸功能域分析 | 第41-42页 |
3.1.3 LmCDAs基因结构分析 | 第42-43页 |
3.1.4 不同昆虫CDAs聚类分析 | 第43-44页 |
3.2 LmCDAs分子特性研究 | 第44-46页 |
3.2.1 LmCDAs组织部位表达特性 | 第44-45页 |
3.2.2 LmCDAs在体壁不同发育天数的表达特性 | 第45-46页 |
4. 讨论 | 第46-50页 |
第三章 飞蝗LmCDAs的生物学功能 | 第50-75页 |
1. 实验材料 | 第50-51页 |
1.1 供试昆虫 | 第50页 |
1.2 实验试剂 | 第50-51页 |
1.3 主要仪器设备 | 第51页 |
2. 实验方法 | 第51-56页 |
2.1 飞蝗LmCDAs沉默后的表型观察 | 第51-53页 |
2.1.1 dsLmCDAs的体外合成 | 第51-53页 |
2.1.2 dsLmCDAs的沉默效率检测和表型观察 | 第53页 |
2.2 表皮的显微结构观察 | 第53-55页 |
2.2.1 苏木精-伊红(HE)染色 | 第53页 |
2.2.2 壳聚糖染色 | 第53-54页 |
2.2.3 免疫组化 | 第54-55页 |
2.3 超微结构观察 | 第55页 |
2.4 几丁质含量测定 | 第55-56页 |
3. 结果分析 | 第56-72页 |
3.1 LmCDAs对飞蝗蜕皮和生长发育的影响 | 第56-58页 |
3.2 注射dsLmCDAs后表皮的显微结构观察 | 第58-67页 |
3.2.1 注射dsLmCDAs后表皮的苏木精-伊红(HE)染色结果 | 第58-59页 |
3.2.2 注射dsLmCDs后表皮的壳聚糖染色结果 | 第59页 |
3.2.3 LmCDAs的细胞定位 | 第59-67页 |
3.3 注射dsLmCDAs后表皮的透射电镜观察 | 第67-69页 |
3.3.1 注射dsLmCDA1和dsLmCDA2后表皮透射电镜观察 | 第67-68页 |
3.3.2 注射dsLmCDA4和dsLmCDA5后表皮透射电镜观察 | 第68-69页 |
3.4 注射dsLmCDAs后对表皮几丁质含量的影响 | 第69-70页 |
3.5 LmCDAs对前肠影响 | 第70-72页 |
3.5.1 注射dsLmCDA1对前肠的影响 | 第70-71页 |
3.5.2 注射dsLmCDA2对前肠的影响 | 第71-72页 |
4. 讨论 | 第72-75页 |
第四章 飞蝗Knickkopf(Knk)的生物学功能 | 第75-90页 |
1. 实验材料 | 第75页 |
1.1 供试昆虫 | 第75页 |
1.2 供试药剂 | 第75页 |
1.3 主要仪器设备 | 第75页 |
2. 实验方法 | 第75-79页 |
2.1 飞蝗LmKnk全长cDNA验证 | 第75-77页 |
2.2 基因结构分析 | 第77页 |
2.3 功能域预测 | 第77页 |
2.4 系统进化树构建 | 第77页 |
2.5 不同组织部位和发育龄期的表达 | 第77-78页 |
2.5.1 不同组织部位表达 | 第77页 |
2.5.2 不同发育阶段表达 | 第77-78页 |
2.6 LmKnk的生物学功能 | 第78-79页 |
2.6.2 注射dsLmKnk后表皮的HE染色 | 第78-79页 |
2.6.3 注射dsLmKnk后表皮的几丁质染色 | 第79页 |
2.6.4 免疫组化 | 第79页 |
2.6.5 注射dsLmKnk后表皮几丁质含量测定 | 第79页 |
2.6.6 注射dsLmKnk后表皮的透射电镜观察 | 第79页 |
3. 结果分析 | 第79-87页 |
3.1 LmKnk全长cDNA序列 | 第79-80页 |
3.2 不同昆虫Knk聚类分析 | 第80-81页 |
3.3 LmKnk组织部位和发育阶段表达特性 | 第81-82页 |
3.4 LmKnk对飞蝗生长发育的影响 | 第82-84页 |
3.5 注射dsLmKnk后表皮的苏木精-伊红(HE)染色观察结果 | 第84-85页 |
3.6 注射dsLmKnk后表皮的几丁质染色结果 | 第85页 |
3.7 注射dsLmKnk后表皮的几丁质含量检测 | 第85-86页 |
3.8 注射dsLmKnk后表皮的透射电镜观察 | 第86-87页 |
3.9 LmKnk的细胞组织定位 | 第87页 |
4. 讨论 | 第87-90页 |
第五章 飞蝗Retroactive(Rtv)的生物学功能 | 第90-100页 |
1. 实验材料 | 第90页 |
1.1 供试昆虫 | 第90页 |
1.2 供试药剂 | 第90页 |
1.3 主要仪器设备 | 第90页 |
2. 实验方法 | 第90-93页 |
2.1 飞蝗LmRtv全长cDNA验证 | 第90-92页 |
2.2 基因结构分析 | 第92页 |
2.3 功能域预测 | 第92页 |
2.4 不同组织部位和发育龄期表达 | 第92-93页 |
2.4.1 不同组织部位表达 | 第92页 |
2.4.2 不同发育阶段表达 | 第92-93页 |
2.5 LmRtv的生物学功能 | 第93页 |
2.5.1 dsLmRtv的体外合成 | 第93页 |
2.5.2 dsLmRtv沉默效率检测和表型观察 | 第93页 |
2.5.3 注射dsLmRtv后表皮HE染色 | 第93页 |
2.5.4 注射dsLmRtv后表皮透射电镜观察 | 第93页 |
2.5.5 注射dsLmRtv后表皮几丁质含量测定 | 第93页 |
3. 结果分析 | 第93-98页 |
3.1 LmRtv全长cDNA序列 | 第93-94页 |
3.2 LmRtv组织部位和发育阶段表达特性 | 第94-95页 |
3.3 LmRtv对飞蝗生长发育影响 | 第95-96页 |
3.4 注射dsLmRtv后苏木精-伊红(HE)染色观察 | 第96-97页 |
3.5 注射dsLmRtv后几丁质含量检测 | 第97页 |
3.6 注射dsLmRtv后透射电镜观察 | 第97-98页 |
4. 讨论 | 第98-100页 |
全文总结 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-112页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第112-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
个人简况及联系方式 | 第116页 |