| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-26页 |
| ·A.FERROOXIDANS能量代谢系统介绍 | 第9-17页 |
| ·A.ferrooxidans铁氧化系统的介绍 | 第9-14页 |
| ·A.ferrooxidans硫氧化系统的介绍 | 第14-17页 |
| ·细胞色素C氧化酶 | 第17-20页 |
| ·细胞色素c氧化酶的功能 | 第17-18页 |
| ·细胞色素c氧化酶的结构 | 第18-19页 |
| ·细胞色素c氧化酶的电子传递机制 | 第19-20页 |
| ·铁硫簇合成介绍 | 第20-22页 |
| ·ISCR介绍 | 第22-24页 |
| ·IscR的功能 | 第22-24页 |
| ·IscR的结构 | 第24页 |
| ·课题的研究目的与研究内容 | 第24-26页 |
| ·依据和目的 | 第24-25页 |
| ·论文的主要研究内容 | 第25页 |
| ·论文课题受资助情况 | 第25-26页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第26-40页 |
| ·实验材料 | 第26-30页 |
| ·菌种 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·A.f基因组抽提试剂 | 第27-28页 |
| ·质粒提取试剂 | 第28页 |
| ·不连续体系SDS—PAGE电泳 | 第28-29页 |
| ·SDS-PAGE胶保存试剂及装置 | 第29页 |
| ·蛋白亲和纯化试剂 | 第29页 |
| ·试验仪器 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-36页 |
| ·PCR扩增 | 第30-32页 |
| ·PCR扩增产物的鉴定 | 第32页 |
| ·载体和目的片段连接反应 | 第32页 |
| ·克隆的转化 | 第32页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第32-33页 |
| ·蛋白质的表达转化 | 第33页 |
| ·蛋白质的表达最佳条件的确定 | 第33页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第33-35页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第35页 |
| ·细胞色素C活性测定 | 第35-36页 |
| ·定点突变 | 第36-39页 |
| ·突变引物的设计 | 第36-38页 |
| ·PCR扩增 | 第38-39页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第39页 |
| ·突变蛋白质的表达及纯化 | 第39页 |
| ·测试分析方法 | 第39-40页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第39页 |
| ·紫外分光光度计(UV Scanning) | 第39-40页 |
| 第三章 细胞色素C氧化酶蛋白的表达、纯化及活性测定 | 第40-45页 |
| ·细胞色素C氧化酶蛋白的克隆、筛选 | 第40-41页 |
| ·细胞色素c氧化酶蛋白基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·连接反应及阳性克隆的筛选 | 第41页 |
| ·细胞色素C氧化酶各亚基蛋白的表达 | 第41-43页 |
| ·细胞色素c氧化酶蛋白表达条件的确定 | 第41-42页 |
| ·细胞色素c氧化酶大规模的表达 | 第42页 |
| ·SDS-PAGE分析细胞色素c氧化酶蛋白 | 第42-43页 |
| ·UV/Vis分析细胞色素c氧化酶蛋白 | 第43页 |
| ·细胞色素C氧化酶活性测定 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 ISCR蛋白定点突变研究 | 第45-52页 |
| ·IscR蛋白序列的同源比对 | 第45-46页 |
| ·IscR突变蛋白质的表达 | 第46-47页 |
| ·突变蛋白质的SDS-PAGE检测 | 第47页 |
| ·UV/Vis分析突变蛋白 | 第47-48页 |
| ·突变蛋白铁硫元素含量分析 | 第48-49页 |
| ·IscR E43位点突变蛋白的表达 | 第49页 |
| ·IscR E43A突变蛋白的SDS-PAGE检测 | 第49页 |
| ·IscR E43A突变蛋白UV/Vis分析突变蛋白 | 第49-50页 |
| ·IscR E43位点突变蛋白铁硫元素含量分析 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 研究成果 | 第62-63页 |
