摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
缩略语表 | 第10-15页 |
第一章 前言和文献综述 | 第15-52页 |
·DNA转座子研究进展 | 第15-30页 |
·转座子的结构和分类 | 第16-21页 |
·转座子的转座机理 | 第21-26页 |
·转座子对基因组进化的影响 | 第26-28页 |
·鱼类DNA转座子 | 第28-29页 |
·展望 | 第29-30页 |
·高迁移率族蛋白研究进展 | 第30-43页 |
·HMGB1的分子结构 | 第31-33页 |
·HMGB1的分子进化 | 第33-35页 |
·HMGB1的核内功能 | 第35-38页 |
·HMGB1的核外功能 | 第38-40页 |
·HMGB1与转座子 | 第40-43页 |
·抑制性消减杂交技术介绍及应用 | 第43-51页 |
·基因差异表达研究技术 | 第43-46页 |
·SSH技术原理 | 第46-47页 |
·SSH技术操作流程 | 第47-48页 |
·SSH技术研究应用 | 第48-51页 |
·本项研究的目的和意义 | 第51-52页 |
第二章 TC1转座子在多倍体杂交鱼内的遗传变化 | 第52-84页 |
·材料和方法 | 第53-60页 |
·动物和杂交 | 第53-54页 |
·基因组DNA的提取和PCR扩增 | 第54-55页 |
·序列分析 | 第55页 |
·PCR扩增转座子的侧翼序列 | 第55-57页 |
·基因组大小的测定 | 第57页 |
·斑点杂交 | 第57-58页 |
·Southern Blot杂交 | 第58-59页 |
·聚类分析 | 第59-60页 |
·结果 | 第60-79页 |
·多倍体杂交鱼 | 第60页 |
·不同倍性鱼的Tc1转座子 | 第60-61页 |
·团头鲂分离出转座子Tmal的特征 | 第61-64页 |
·四倍体鲫鲂转座子Ttel | 第64-67页 |
·侧翼序列分析 | 第67-70页 |
·Tma1的分子遗传变异 | 第70-73页 |
·不同倍性鱼基因组大小 | 第73-75页 |
·不同倍性鱼的Tc1拷贝数 | 第75-78页 |
·Tma1的聚类分析 | 第78-79页 |
·讨论 | 第79-84页 |
第三章 不同倍性鲫鲂高迁移率族蛋白基因克隆和原核表达 | 第84-105页 |
·材料与方法 | 第85-93页 |
·材料和试剂 | 第85页 |
·总RNA提取 | 第85-86页 |
·引物设计与RT-PCR扩增 | 第86页 |
·RACE PCR克隆HMG1基因末端序列 | 第86-89页 |
·序列拼接和同源性分析 | 第89-90页 |
·生物信息学和系统进化分析 | 第90页 |
·重组HMG1原核表达载体的构建 | 第90-91页 |
·原核表达和SDS—PAGE检测 | 第91-93页 |
·结果 | 第93-102页 |
·总RNA提取和RT—PCR扩增结果 | 第93-94页 |
·HMG1基因cDNA全长拼接及同源性比较 | 第94-97页 |
·HMG生物信息学分析 | 第97-98页 |
·HMG1系统进化分析 | 第98-99页 |
·原核表达及SDS—PAGE检测 | 第99-102页 |
·讨论 | 第102-105页 |
第四章 雌核发育鱼卵巢发育基因鉴定和表达分析 | 第105-126页 |
·材料和方法 | 第106-114页 |
·动物材料 | 第106-107页 |
·卵巢组织学观察 | 第107-108页 |
·RNA的分离和cDNA的合成 | 第108页 |
·抑制性消减杂交 | 第108-110页 |
·构建SSH文库 | 第110页 |
·斑点杂交筛选SSH文库 | 第110-111页 |
·序列分析 | 第111页 |
·基因表达的RT—PCR分析 | 第111-112页 |
·定量RT—PCR分析 | 第112-113页 |
·PMC基因的RACE—PCR克隆和组织表达分析 | 第113-114页 |
·结果 | 第114-122页 |
·性腺结构观察 | 第114页 |
·增殖期卵巢cDNA接头连接效率 | 第114-115页 |
·消减文库cDNA克隆片段大小的鉴定 | 第115-116页 |
·筛选抑制性消减杂交文库 | 第116-117页 |
·差异表达基因的序列分析 | 第117-119页 |
·基因的表达分析 | 第119-120页 |
·PMC基因的定量RT—PCR分析 | 第120-121页 |
·PMC基因的RACE—PCR克隆和组织表达分析 | 第121-122页 |
·讨论 | 第122-126页 |
第五章 总结 | 第126-129页 |
参考文献 | 第129-143页 |
实验主要试剂与配制方法 | 第143-144页 |
攻读博士学位期间已发表和待发的学术论文 | 第144-145页 |
致谢 | 第145-147页 |