| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.国内外肉羊生产的现状 | 第10-11页 |
| ·国外肉羊生产的现状 | 第10页 |
| ·我国肉用羊的生产现状 | 第10-11页 |
| 2.甘肃现代肉羊新品种选育群概况 | 第11页 |
| 3.GDF9基因、BMP15基因和GNRHR基因的研究进展 | 第11-18页 |
| ·GDF9基因的研究 | 第11-15页 |
| ·生长分化因子9的结构和功能 | 第11-12页 |
| ·生长分化因子9基因结构 | 第12-13页 |
| ·生长分化因子9基因的定位和多态性 | 第13-14页 |
| ·生长分化因子9基因与哺乳动物繁殖性能的关系 | 第14-15页 |
| ·BMP15基因的研究 | 第15-17页 |
| ·BMP15的结构和功能 | 第15页 |
| ·BMP15基因结构 | 第15页 |
| ·BMP15基因定位 | 第15-16页 |
| ·BMP15基因与哺乳动物繁殖性能的关系 | 第16-17页 |
| ·GnRHR基因的研究 | 第17-18页 |
| ·GnRHR基因结构、功能及定位 | 第17-18页 |
| ·GnRHR基因与动物繁殖性能的关系 | 第18页 |
| 4.PCR-SSCP技术的研究进展 | 第18-20页 |
| ·PCR-SSCP方法的原理 | 第19页 |
| ·PCR-SSCP的自身特点 | 第19页 |
| ·PCR-SSCP方法的应用 | 第19-20页 |
| 5.研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 甘肃肉羊新品种群羊GNRHR、BMP15和GDF9基因多态性检测及群体遗传学分析 | 第21-48页 |
| 1.材料和方法 | 第21-23页 |
| ·试验材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·分析软件 | 第22页 |
| ·有关试剂和溶液的配制 | 第22-23页 |
| 2.主要试验步骤 | 第23-30页 |
| ·基因组DNA的提取及检测 | 第23-24页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·DNA质量及浓度检测 | 第24页 |
| ·GDF9、BMP15和GnRHR基因PCR扩增 | 第24-26页 |
| ·引物的设计 | 第25页 |
| ·引物的稀释 | 第25-26页 |
| ·PCR反应体系和最佳PCR扩增条件 | 第26页 |
| ·GDF9、BMP15和GnRHR基因的SSCP分析 | 第26-28页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备与电泳 | 第27页 |
| ·硝酸银染色 | 第27页 |
| ·等位基因的辨型 | 第27-28页 |
| ·基因的克隆测序 | 第28-30页 |
| ·目的片段的回收 | 第28页 |
| ·连接反应 | 第28页 |
| ·感受态细胞的制备—氯化钙法 | 第28-29页 |
| ·转化 | 第29页 |
| ·质粒DNA的小规模提取—碱裂解法 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·序列的分析方法 | 第30页 |
| 3. 群体遗传学研究方法 | 第30-32页 |
| ·基因频率 | 第30页 |
| ·基因型频率 | 第30页 |
| ·基因位点Hardy-Weinberg平衡状态的检验 | 第30-31页 |
| ·群体遗传杂合度和遗传纯合度 | 第31页 |
| ·有效等位基因数(Effective number of alleles) | 第31-32页 |
| ·多态信息含量(Polymorphic information content,PIC) | 第32页 |
| ·BMP15基因、GDF9基因、GnRHR基因与新品种群羊繁殖力关系的研究 | 第32页 |
| 4. 结果与分析 | 第32-41页 |
| ·血样基因组DNA提取结果 | 第32页 |
| ·GDF9、BMP15和GnRHR基因PCR扩增结果 | 第32-35页 |
| ·GDF9、BMP15和GnRHR基因PCR-SSCP检测结果 | 第35-36页 |
| ·不同基因型个体测序结果及其序列分析 | 第36-38页 |
| ·突变位点的群体遗传学结果 | 第38-41页 |
| ·等位基因频率、基因型频率及Hardy-Weinberg平衡状态的检验 | 第38-39页 |
| ·群体遗传纯合度(Ho)、杂合度(He)、有效等位基因数及多态信息含量(PIC)分析 | 第39-40页 |
| ·BMP15、GDF9和GnRHR基因多态位点与新品种群羊产羔数的关联分析 | 第40-41页 |
| 5. 讨论 | 第41-47页 |
| ·GDF9基因、BMP15基因、GnRHR基因作为遗传标记的可行性讨论 | 第41页 |
| ·SSCP分析方法的可靠性讨论 | 第41页 |
| ·关于血液样品保存及基因组DNA的提取 | 第41-42页 |
| ·PCR扩增反应需注意的问题 | 第42-43页 |
| ·引物的设计 | 第42页 |
| ·模板的质量 | 第42-43页 |
| ·引物的浓度 | 第43页 |
| ·PCR反应的退火温度 | 第43页 |
| ·影响PCR-SSCP检测的因素 | 第43-45页 |
| ·PCR扩增片段的长度 | 第43-44页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶成分 | 第44页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳温度和电压 | 第44页 |
| ·SSCP结果的分析 | 第44-45页 |
| ·GDF9、BMP15和GnRHR基因群体遗传特性的分析 | 第45页 |
| ·检测结果对新品种群羊产羔数影响的分析 | 第45-47页 |
| 6. 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 作者简介 | 第54-55页 |
| 导师简介 | 第55-58页 |
| 附录:相关基因测序结果 | 第58-63页 |
