| 摘要 | 第14-15页 |
| Abstract | 第15页 |
| 第一章 绪论 | 第21-48页 |
| 1.1 药物跨膜转运方式 | 第21-22页 |
| 1.1.1 药物的简单扩散 | 第21页 |
| 1.1.2 转运体介导的转运 | 第21-22页 |
| 1.1.3 膜动转运 | 第22页 |
| 1.2 药物转运体 | 第22-31页 |
| 1.2.1 溶质转运体 | 第22-23页 |
| 1.2.2 ATP结合盒转运体 | 第23-31页 |
| 1.3 P-糖蛋白概述 | 第31-35页 |
| 1.3.1 P-糖蛋白的结构、分布及功能 | 第31-32页 |
| 1.3.2 P-糖蛋白的单核苷酸多态性 | 第32-33页 |
| 1.3.3 P-糖蛋白与疾病 | 第33-34页 |
| 1.3.4 P-糖蛋白的底物和抑制剂 | 第34-35页 |
| 1.4 乳腺癌耐药蛋白概述 | 第35-38页 |
| 1.4.1 乳腺癌耐药蛋白的结构、分布及功能 | 第35-36页 |
| 1.4.2 乳腺癌耐药蛋白的单核苷酸多态性 | 第36页 |
| 1.4.3 乳腺癌耐药蛋白与疾病 | 第36-37页 |
| 1.4.4 乳腺癌耐药蛋白的底物与抑制剂 | 第37-38页 |
| 1.5 多药耐药相关蛋白2概述 | 第38-41页 |
| 1.5.1 多药耐药相关蛋白2 的结构、分布及功能 | 第38-39页 |
| 1.5.2 多药耐药相关蛋白2 的单核苷酸多态性 | 第39页 |
| 1.5.3 多药耐药相关蛋白2 与疾病 | 第39-40页 |
| 1.5.4 多药耐药相关蛋白2 的底物及抑制剂 | 第40-41页 |
| 1.6 ABC转运体研究模型概述 | 第41-46页 |
| 1.6.1 体外模型 | 第41-44页 |
| 1.6.2 体内模型 | 第44-46页 |
| 1.7 研究意义及创新点 | 第46-48页 |
| 第二章 基于3D类器官的BCRP及 MRP2 研究模型的构建 | 第48-67页 |
| 2.1 实验材料 | 第48-51页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第48页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第48-49页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第49页 |
| 2.1.4 实验主要试剂的配制 | 第49-51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-61页 |
| 2.2.1 3D类器官的培养 | 第51-52页 |
| 2.2.2 3D类器官形态的观察 | 第52页 |
| 2.2.3 3D类器官中BCRP及 MRP2 mRNA水平上的表达检测 | 第52-55页 |
| 2.2.4 3D类器官中的BCRP及 MRP2 蛋白水平上的检测 | 第55-58页 |
| 2.2.5 3D类器官中BCRP、MRP2 荧光底物的检测 | 第58-61页 |
| 2.3 实验结果 | 第61-67页 |
| 2.3.1 3D类器官生长形态观察 | 第61页 |
| 2.3.2 3D类器官中BCRP、MRP2在m RNA水平的表达情况 | 第61-63页 |
| 2.3.3 3D类器官中BCRP、MRP2 在蛋白水平的表达情况 | 第63-65页 |
| 2.3.4 BCRP和 MRP2 荧光底物的标准曲线 | 第65-66页 |
| 2.3.5 BCRP和 MRP2 的阳性抑制剂对其荧光底物转运的影响 | 第66-67页 |
| 第三章 基于CRISPR/Cas9 技术构建大鼠P-gp敲除模型的研究 | 第67-87页 |
| 3.1 实验材料 | 第67-70页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第67页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第67-68页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第68页 |
| 3.1.4 主要实验试剂的配制 | 第68-70页 |
| 3.2 实验方法 | 第70-80页 |
| 3.2.1 敲除靶点的选择 | 第70页 |
| 3.2.2 sg RNA及 Cas9 mRNA转录模板的体外构建 | 第70页 |
| 3.2.3 Cas9/sg RNA的显微共注射与移植 | 第70-71页 |
| 3.2.4 敲除大鼠DNA的提取 | 第71页 |
| 3.2.5 F_0 代敲除大鼠基因型的鉴定 | 第71-73页 |
| 3.2.6 纯合子大鼠的繁育 | 第73-74页 |
| 3.2.7 脱靶位点的预测及验证 | 第74页 |
| 3.2.8 敲除大鼠蛋白水平上的验证 | 第74页 |
| 3.2.9 敲除大鼠血清生理指标检测 | 第74-75页 |
| 3.2.10 在mRNA水平上检测敲除大鼠的代偿性变化 | 第75-77页 |
| 3.2.11 敲除大鼠功能上的验证 | 第77-80页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第80-87页 |
| 3.3.1 Mdr1a/1b敲除大鼠基因型鉴定及繁育 | 第80页 |
| 3.3.2 Mdr1a/1b敲除大鼠中P-gp蛋白的表达 | 第80-81页 |
| 3.3.3 Mdr1a/1b敲除对大鼠生理指标的影响 | 第81-83页 |
| 3.3.4 Mdr1a/1b敲除大鼠的代偿性变化情况 | 第83-84页 |
| 3.3.5 Mdr1a/1b敲除对大鼠体内地高辛药代动力学的影响 | 第84-87页 |
| 第四章 讨论 | 第87-95页 |
| 第五章 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-114页 |
| 附录 Ⅰ 缩略词及中英文对照表 | 第114-116页 |
| 附录 Ⅱ 科研成果 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
