| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-17页 |
| ·苏云金芽孢杆菌的分布 | 第9页 |
| ·BT 杀虫晶体蛋白基因鉴定方法 | 第9-11页 |
| ·BT 杀虫晶体蛋白及其分类 | 第11-12页 |
| ·Bt 杀虫晶体蛋白及其分类 | 第11页 |
| ·对地下害虫蛴螬有杀虫活性的基因 | 第11-12页 |
| ·生物信息学（BIOINFORMATICS）的应用 | 第12页 |
| ·杀虫蛋白基因的应用 | 第12-14页 |
| ·转基因微生物 | 第12-13页 |
| ·转Bt 杀虫基因植物 | 第13-14页 |
| ·营养期杀虫蛋白(VEGETATIVE INSECTICIDAL PROTEINS ,VIPS) | 第14-16页 |
| ·营养期杀虫蛋白分类 | 第14页 |
| ·vip1A/vip2A 基因的杀虫活性 | 第14-15页 |
| ·Vip1A/Vip2A 蛋白的特性及其作用机理 | 第15页 |
| ·VIPs 应用前景 | 第15-16页 |
| ·本研究的立题依据和目的意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-29页 |
| ·材料 | 第17-21页 |
| ·土样的采集 | 第17-19页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·仪器设备 | 第20页 |
| ·供试昆虫 | 第20-21页 |
| ·研究方法 | 第21-29页 |
| ·采用醋酸钠-抗生素筛选法筛选苏云金芽孢杆菌 | 第21页 |
| ·Bt 菌株形态观察 | 第21页 |
| ·Bt 菌株的大质粒提取 | 第21页 |
| ·PCR 扩增引物 | 第21-22页 |
| ·PCR-RFLP 基因分析 | 第22-23页 |
| ·DNA 回收 | 第23页 |
| ·E. coli 质粒提取 | 第23页 |
| ·DNA 片段常规连接体系 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌热击感受态细胞制备 | 第24页 |
| ·大肠杆菌热击转化 | 第24页 |
| ·XPZ-5、XPZ-46 菌株中cry8Ea1 全长基因的扩增、克隆及序列测定 | 第24页 |
| ·新基因在大肠杆菌中表达 | 第24-25页 |
| ·基因诱导表达 | 第25页 |
| ·蛋白电泳检测 | 第25-26页 |
| ·vip1／vip2 类基因通用引物设计 | 第26页 |
| ·vip1／vip2 类基因全长引物的设计 | 第26-27页 |
| ·vip1／vip2 基因全长PCR 扩增 | 第27页 |
| ·含有cry8 基因的菌株的分泌蛋白的提取和检测 | 第27页 |
| ·室内杀虫活性测定 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-51页 |
| ·菌株分离 | 第29页 |
| ·BT 菌株的PCR 鉴定 | 第29-31页 |
| ·晶体蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第31-32页 |
| ·杀虫活性测定 | 第32-33页 |
| ·十二株含CRY8 基因的菌株进一步研究 | 第33-35页 |
| ·十二株含cry8 基因菌株的大质粒分析 | 第33页 |
| ·十二株含cry8 基因的PCR-RFLP 鉴定 | 第33-34页 |
| ·十二株Bt 菌株的晶体蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第34-35页 |
| ·菌株XPZ-5、XPZ-46 伴胞晶体形态分析 | 第35-36页 |
| ·CRY8 基因全长的克隆、表达及序列分析 | 第36-47页 |
| ·cry8 基因全长的克隆 | 第36页 |
| ·cry8 基因异源表达载体的构建 | 第36-38页 |
| ·cry8 基因在E. coli BL21（DE3）Rosstte 中表达 | 第38页 |
| ·全长基因的序列分析 | 第38-47页 |
| ·CRY8 基因表达蛋白生物活性测定 | 第47页 |
| ·VIP1／VIP2 基因的鉴定 | 第47-49页 |
| ·含有CRY8 基因的菌株的分泌蛋白 | 第49-50页 |
| ·提取分泌蛋白生物活性 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 在读期间发表论文 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
