| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-26页 |
| 1.1 生物发光共振能量转移的基本原理 | 第13-17页 |
| 1.1.1 BRET供体和受体的类型 | 第13-16页 |
| 1.1.2 BRET体系的类型 | 第16-17页 |
| 1.1.3 影响BRET效率的主要因素 | 第17页 |
| 1.2 BRET技术在生物分析中的应用 | 第17-22页 |
| 1.2.1 BRET技术在生物分析应用中的优势 | 第17-18页 |
| 1.2.2 BRET技术在蛋白质相互作用检测中的应用 | 第18-19页 |
| 1.2.3 BRET技术在小分子物质检测中的应用 | 第19-20页 |
| 1.2.4 BRET技术在疾病标识物检测中的应用 | 第20-22页 |
| 1.3 BRET在生物分析应用中的挑战 | 第22-23页 |
| 1.4 锌指结构域 | 第23-24页 |
| 1.5 转录激活子样效应因子蛋白 | 第24-25页 |
| 1.6 本工作出发点及主要内容 | 第25-26页 |
| 第二章 以DNA为模板的BRET信号模块构建 | 第26-43页 |
| 2.1 前言 | 第26页 |
| 2.2 材料与方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第28-31页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第31-42页 |
| 2.3.1 BRET供体、受体序列设计及分析 | 第31-33页 |
| 2.3.2 nLZ-1和mGA-1表达条件的探索 | 第33-37页 |
| 2.3.3 nLZ-1和mGA-1的提取和纯化 | 第37-39页 |
| 2.3.4 nLZ-1和mGA-1的功能分析 | 第39-41页 |
| 2.3.5 以DNA为模板的BRET信号模块的构建 | 第41-42页 |
| 2.4 结论 | 第42-43页 |
| 第三章 以DNA为模板的BRET信号模块优化 | 第43-57页 |
| 3.1 前言 | 第43页 |
| 3.2 材料与方法 | 第43-47页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第44-47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-56页 |
| 3.3.1 不同类型BRET供体和受体的设计与构建 | 第47-50页 |
| 3.3.2 不同类型BRET供体和受体的光谱性质 | 第50-51页 |
| 3.3.3 BRET信号模块中能量供体和受体的优化 | 第51-53页 |
| 3.3.4 BRET信号模块中能量供体和受体距离的优化 | 第53-54页 |
| 3.3.5 BRET信号模块中能量供体和受体比例的优化 | 第54-56页 |
| 3.4 结论 | 第56-57页 |
| 第四章 以DNA为模板的BRET/FRET信号模块的构建 | 第57-66页 |
| 4.1 引言 | 第57-58页 |
| 4.2 材料与方法 | 第58-59页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第58页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第58-59页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第59-65页 |
| 4.3.1 BRET/FRET信号模块的能量供体的设计 | 第59-60页 |
| 4.3.2 BRET/FRET信号模块的能量供体的表达、纯化及功能验证 | 第60-62页 |
| 4.3.3 以DNA为模板的BRET/FRET信号模块的构建 | 第62-65页 |
| 4.4 结论 | 第65-66页 |
| 第五章 基于TALE蛋白的生物发光体系的构建 | 第66-76页 |
| 5.1 前言 | 第66页 |
| 5.2 材料与方法 | 第66-70页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第66-67页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第67-70页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第70-75页 |
| 5.3.1 TALE蛋白单体DNA文库的构建 | 第70-71页 |
| 5.3.2 融合载体pNG-Luc和pTALE-TDRF-Luc的构建 | 第71-73页 |
| 5.3.3 蛋白质TDRF-Luc的表达与纯化 | 第73-74页 |
| 5.3.4 蛋白质TDRF-Luc的功能分析 | 第74-75页 |
| 5.4 结论 | 第75-76页 |
| 总结与展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 附录 已发表的论文目录 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
