| 部分英文缩写解释 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 木聚糖和木聚糖酶的研究概况 | 第12-17页 |
| 1.1.1 木聚糖 | 第12页 |
| 1.1.2 木聚糖提取 | 第12-14页 |
| 1.1.3 木聚糖酶 | 第14页 |
| 1.1.4 耐热木聚糖酶 | 第14-15页 |
| 1.1.5 木聚糖酶的耐热机制 | 第15-17页 |
| 1.2 易错PCR的相关研究概况 | 第17-20页 |
| 1.2.1 常见的突变手段 | 第17-19页 |
| 1.2.2 PCR技术 | 第19页 |
| 1.2.3 易错PCR | 第19-20页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 第2章 木聚糖的提取 | 第22-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 原材料 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
| 2.2 木聚糖提取 | 第22-23页 |
| 2.2.1 预处理 | 第22-23页 |
| 2.2.2 提取 | 第23页 |
| 2.2.3 后处理 | 第23页 |
| 2.2.4 验证 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-26页 |
| 2.4 小结 | 第26-27页 |
| 第3章 木聚糖酶1VBR突变株的构建及筛选 | 第27-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 3.1.1 菌种以及质粒 | 第27页 |
| 3.1.2 试剂盒、工具酶 | 第27-28页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第28页 |
| 3.1.4 常用试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.5 培养基 | 第29页 |
| 3.2 木聚糖酶1VBR突变菌株构建 | 第29-34页 |
| 3.2.1 大肠杆菌Top10及BL21感受态制备 | 第29-30页 |
| 3.2.2 提取含目的基因的重组质粒及pET-22b(+)质粒 | 第30页 |
| 3.2.3 易错PCR突变 | 第30-32页 |
| 3.2.4转化大肠杆菌宿主细胞Top10 | 第32页 |
| 3.2.5 克隆载体阳性克隆子筛选 | 第32-33页 |
| 3.2.6转化大肠杆菌宿主细胞BL21 | 第33页 |
| 3.2.7 表达载体阳性克隆子筛选 | 第33-34页 |
| 3.2.8 突变子初筛 | 第34页 |
| 3.2.9 突变子复筛 | 第34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-37页 |
| 3.3.1 突变株鉴定结果 | 第34-36页 |
| 3.3.2 筛选结果 | 第36-37页 |
| 3.4 小结 | 第37-38页 |
| 第4章 突变株酶学性质测定 | 第38-45页 |
| 4.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第38页 |
| 4.1.2 常用试剂 | 第38-39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 部分突变株最适反应温度检测 | 第39页 |
| 4.2.2 部分突变株最适反应pH检测 | 第39页 |
| 4.2.3 部分突变株在最适反应温度下的稳定性检测 | 第39页 |
| 4.2.4 部分突变株pH稳定性检测 | 第39-40页 |
| 4.3 结果分析 | 第40-44页 |
| 4.3.1 最适反应温度检测结果 | 第40-41页 |
| 4.3.2 最适反应pH检测结果 | 第41-42页 |
| 4.3.3 热稳定性检测结果 | 第42-43页 |
| 4.3.4 pH稳定性检测结果 | 第43页 |
| 4.3.5 测序结果分析 | 第43-44页 |
| 4.4 小结 | 第44-45页 |
| 第5章 部分突变株的米氏常数及比活力的测定 | 第45-52页 |
| 5.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 5.1.1 菌株 | 第45页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第45页 |
| 5.1.3 常用试剂及试剂盒 | 第45-46页 |
| 5.2 实验方法 | 第46-50页 |
| 5.2.1 硫酸铵沉淀 | 第46-47页 |
| 5.2.2 镍柱纯化及浓缩 | 第47页 |
| 5.2.3 木糖标曲的制作 | 第47页 |
| 5.2.4 比活力测定 | 第47-48页 |
| 5.2.5 米氏常数测定 | 第48-49页 |
| 5.2.6 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第49-50页 |
| 5.3 结果分析 | 第50-51页 |
| 5.3.1 木糖标曲 | 第50页 |
| 5.3.2 SDS-PAGE胶图 | 第50-51页 |
| 5.3.3 Km值与比酶活 | 第51页 |
| 5.4 小结 | 第51-52页 |
| 结论与展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录A 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59-60页 |
| 附录B 1VBR基因原始序列及优化后序列 | 第60页 |
