| 致谢 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第12-19页 |
| 1.1 昆虫免疫系统 | 第12页 |
| 1.2 丝氨酸蛋白酶抑制剂简述 | 第12-15页 |
| 1.2.1 serpin分布与分类 | 第13页 |
| 1.2.2 serpin结构特点 | 第13页 |
| 1.2.3 serpin功能 | 第13-15页 |
| 1.3 关于柞蚕免疫和昆虫serpin的研究情况 | 第15-19页 |
| 2 引言 | 第19-22页 |
| 2.1 研究目的和研究的重要意义 | 第19页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第19-21页 |
| 2.2.1 柞蚕serpin-1like的克隆及原核表达 | 第19-20页 |
| 2.2.2 柞蚕serpin-1like多克隆抗体制备及效价检测 | 第20页 |
| 2.2.3 柞蚕serpin-1like组织表达特征分析 | 第20页 |
| 2.2.4 柞蚕serpin-1like时空表达分析 | 第20页 |
| 2.2.5 柞蚕serpin-1like在应答微生物刺激中的表达规律分析 | 第20-21页 |
| 2.3 技术路线 | 第21-22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第22页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第22-25页 |
| 3.2.1 主要实验仪器 | 第22-23页 |
| 3.2.2 主要生化试剂 | 第23页 |
| 3.2.3 主要溶液的配置 | 第23-25页 |
| 3.3 实验方法 | 第25-39页 |
| 3.3.1 柞蚕组织收集 | 第25页 |
| 3.3.2 柞蚕总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 3.3.3 提取总RNA质量的检测 | 第26页 |
| 3.3.4 柞蚕serpin-1like基因的克隆 | 第26-30页 |
| 3.3.5 柞蚕serpin-1like基因的原核表达 | 第30-32页 |
| 3.3.6 重组蛋白的检测 | 第32-34页 |
| 3.3.7 Ap-serpin-1like蛋白的纯化及多克隆抗体制备 | 第34-35页 |
| 3.3.8 多克隆抗体效价的检测 | 第35-36页 |
| 3.3.9 实时定量PCR | 第36页 |
| 3.3.10 组织中总蛋白的提取 | 第36-37页 |
| 3.3.11 组织表达分析 | 第37页 |
| 3.3.12 不同发育阶段Ap-serpin-1like表达情况 | 第37页 |
| 3.3.13 微生物刺激对柞蚕组织中Ap-serpin-1like表达的影响 | 第37-39页 |
| 4 结果与分析 | 第39-50页 |
| 4.1 柞蚕总RNA的提取与检测 | 第39页 |
| 4.2 柞蚕serpin-1like基因生物信息学分析 | 第39-41页 |
| 4.2.1 柞蚕serpin-1like进化树及同源性分析 | 第39-41页 |
| 4.2.2 Ap-serpin-1like蛋白的信号肽分析 | 第41页 |
| 4.3 柞蚕serpin-1like基因的克隆及双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| 4.3.1 柞蚕serpin-1like基因的ORF扩增 | 第41-42页 |
| 4.3.2 柞蚕serpin-1like双酶切鉴定 | 第42页 |
| 4.4 柞蚕serpin-1like重组质粒菌落PCR检测 | 第42-43页 |
| 4.5 柞蚕serpin-1like蛋白表达的SDS-PAGE和WesternBlot分析 | 第43-44页 |
| 4.6 纯化柞蚕serpin-1like蛋白 | 第44-45页 |
| 4.7 柞蚕serpin-1like抗体ELISA效价的检测 | 第45页 |
| 4.8 柞蚕serpin-1like组织表达分布 | 第45-46页 |
| 4.9 不同发育阶段柞蚕serpin-1like表达分析 | 第46页 |
| 4.10 免疫组织中柞蚕serpin-1like诱导表达模式 | 第46-50页 |
| 4.10.1 柞蚕serpin-1like在脂肪体中诱导表达模式 | 第47-48页 |
| 4.10.2 柞蚕serpin-1like在血淋巴中诱导表达模式 | 第48页 |
| 4.10.3 柞蚕serpin-1like在中肠中诱导表达模式 | 第48-50页 |
| 5 讨论 | 第50-52页 |
| 6 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 个人简介 | 第60-61页 |
| 在研期间发表论文 | 第61页 |
