摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
缩略词表 | 第6-9页 |
引言 | 第9-11页 |
第一章 绪论 | 第11-18页 |
1 ACO基因研究进展 | 第11-12页 |
1.1 ACO的发现 | 第11页 |
1.2 ACO基因的克隆 | 第11页 |
1.3 ACO基因的表达 | 第11-12页 |
2 枣属植物遗传转化研究进展 | 第12-15页 |
2.1 植物基因转化方法 | 第12-13页 |
2.2 农杆菌转化法的基本原理 | 第13页 |
2.3 影响根癌农杆菌转化效率的因素 | 第13-15页 |
3 基因工程保鲜技术研究进展 | 第15-17页 |
3.1 通过减少乙烯的合成 | 第15-16页 |
3.2 通过控制与细胞壁降解相关酶的活性 | 第16页 |
3.3 基因干扰育种技术展望 | 第16-17页 |
4 研究技术路线 | 第17-18页 |
第二章 靶标片段的融合及植物表达载体的构建 | 第18-32页 |
1 材料 | 第18-19页 |
1.1 菌种和质粒 | 第18页 |
1.2 工具酶与试剂 | 第18页 |
1.3 细菌培养基 | 第18页 |
1.4 主要试剂的配置 | 第18-19页 |
2 方法 | 第19-27页 |
2.1 质粒DNA的提取 | 第19-20页 |
2.2 感受态细胞的制备及转化 | 第20-21页 |
2.3 一步PCR法融合狗头枣ACOⅠ基因片段 | 第21-22页 |
2.4 RNAi植物表达载体的构建 | 第22-26页 |
2.5 RNAi表达载体转化农杆菌 | 第26-27页 |
3 结果与分析 | 第27-31页 |
3.1 一步PCR融合扩增ACOⅠ基因结果 | 第27-29页 |
3.2 CaMV 35S启动子驱动的中间干扰载体的构建 | 第29-30页 |
3.3 ACO Ⅰ_(3-4)基因RNAi表达载体的构建 | 第30-31页 |
3.4 工程农杆菌的PCR鉴定结果 | 第31页 |
4 讨论 | 第31-32页 |
第三章 农杆菌介导法对木枣的遗传转化研究 | 第32-40页 |
1 材料 | 第32-33页 |
1.1 外植体材料 | 第32页 |
1.2 菌株与质粒 | 第32页 |
1.3 试剂与培养基 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-35页 |
2.1 抗生素选择压的确定 | 第33页 |
2.2 工程农杆菌的活化与保存 | 第33-34页 |
2.3 农杆菌介导的叶盘转化法 | 第34页 |
2.4 转基因植株的检测 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-38页 |
3.1 抗生素选择压的确定 | 第35-36页 |
3.2 影响农杆菌遗传转化效果的因素 | 第36-37页 |
3.3 转化植株的PCR检测结果 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
4.1 抗生素抑菌效果及其对叶片再生的影响 | 第38-39页 |
4.2 遗传转化因子对转化效果的影响 | 第39-40页 |
第四章 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-49页 |
附图 | 第49-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
攻读学位期间科研成果 | 第52页 |