| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第11-28页 |
| 1. HCC研究现状 | 第11-14页 |
| 1.1 HCC流行病学分布 | 第11页 |
| 1.2 HCC的诊断 | 第11-12页 |
| 1.3 HCC治疗进展 | 第12-14页 |
| 2. MEN1基因 | 第14-24页 |
| 2.1 Menin连接转录因子及组蛋白修饰复合物 | 第14-15页 |
| 2.2 细胞及动物模型的建立 | 第15页 |
| 2.3 Menin结构与功能的关系 | 第15-17页 |
| 2.4 Menin C端的研究现状 | 第17-19页 |
| 2.4.1 meninC端存在核定位序列 | 第17页 |
| 2.4.2 meninC端剪切体在细胞质中发挥作用 | 第17-18页 |
| 2.4.3 meninC端相互作用的蛋白 | 第18-19页 |
| 2.5 MEN1突变的相关研究 | 第19-22页 |
| 2.6 MEN1与肝癌 | 第22-24页 |
| 3. Menin错义突变的泛素化修饰 | 第24-26页 |
| 3.1 泛素化-蛋白酶体系统(UPS) | 第24-25页 |
| 3.2 泛素修饰位点 | 第25页 |
| 3.3 Menin的突变与泛素化降解 | 第25-26页 |
| 4. 立项依据 | 第26-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-40页 |
| 1. HCC患者血液及肝癌组织样本 | 第28页 |
| 2. 细胞来源及培养条件 | 第28页 |
| 3. 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第28-30页 |
| 4. 实时荧光定量逆转录PCR | 第30-31页 |
| 5. 质粒构建及逆转录病毒包装、感染 | 第31-36页 |
| 6. 蛋白质稳定性试验 | 第36-37页 |
| 7. MG132 | 第37页 |
| 8. CoIP | 第37-38页 |
| 9. 生物信息学分析 | 第38页 |
| 10. 统计分析 | 第38页 |
| 11. 试剂信息表 | 第38-39页 |
| 12. Western blotting抗体信息表 | 第39-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-57页 |
| 1. 肝癌组织中MEN1基因突变筛查 | 第40-42页 |
| 2. 蛋白质结构预测 | 第42-46页 |
| 3. 质粒构建,稳定细胞系构建 | 第46-54页 |
| 3.1 质粒构建及鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2 构建细胞系蛋白水平,拷贝数检测 | 第47-48页 |
| 3.3 构建细胞系蛋白水平,转录水平检测 | 第48-49页 |
| 3.4 G503D,L551P,P595L蛋白质稳定性特点 | 第49-51页 |
| 3.5 Menin突变体L551P通过泛素化蛋白酶体途径降解 | 第51-52页 |
| 3.6 Menin突变体L551P在细胞内被泛素化 | 第52页 |
| 3.7 P595L突变体影响了menin C端剪切 | 第52-54页 |
| 4. Menin C末端在维持蛋白质的稳定性起到了重要的作用 | 第54-55页 |
| 5. HCC病例分析 | 第55-57页 |
| 5.1 L551P突变体对应病例分析 | 第56页 |
| 5.2 P595L突变体对应病例分析 | 第56-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-62页 |
| 参考文献 | 第62-74页 |
