| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 符号缩写表 | 第9-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-35页 |
| 1.1 蛋白质磷酸化修饰 | 第15-23页 |
| 1.1.1 蛋白质上的O-磷酸化修饰 | 第16-18页 |
| 1.1.2 蛋白质上的N-磷酸化 | 第18-21页 |
| 1.1.3 γ-[~(18)O_4]-ATP的合成与性质 | 第21-23页 |
| 1.2 二糖的结构及生物学功能 | 第23-28页 |
| 1.2.1 糖及糖基化修饰简介 | 第23-24页 |
| 1.2.2 二糖结构及其生物学功能 | 第24-27页 |
| 1.2.3 质谱应用于二糖的分析 | 第27-28页 |
| 1.2.4 主成分分析法 | 第28页 |
| 1.3 本论文课题的提出及主要研究内容 | 第28-30页 |
| 参考文献 | 第30-35页 |
| 第二章 以γ-[~(18)O_4]-ATP为探针鉴定精氨酸激酶McsB的底物 | 第35-63页 |
| 2.1 引言 | 第35-36页 |
| 2.2 本课题研究思路 | 第36-37页 |
| 2.3 实验部分 | 第37-49页 |
| 2.3.1 试剂 | 第37页 |
| 2.3.2 仪器与耗材 | 第37-38页 |
| 2.3.3 常用实验试剂配置 | 第38-40页 |
| 2.3.4 嗜热脂肪芽孢杆菌的培养及破碎 | 第40-41页 |
| 2.3.5 精氨酸激酶McsB及其底物CtsR的表达纯化 | 第41-44页 |
| 2.3.6 McsB激酶磷酸化底物反应条件优化 | 第44-45页 |
| 2.3.7 TiO_2富集磷酸化精氨酸多肽 | 第45-47页 |
| 2.3.8 Western Blot验证嗜热脂肪芽孢杆菌中的磷酸化精氨酸蛋白 | 第47-48页 |
| 2.3.9 Nano LC-MS检测McsB的底物 | 第48-49页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第49-61页 |
| 2.4.1 细菌总蛋白提取及检测 | 第49-50页 |
| 2.4.2 激酶McsB及其底物蛋白CtsR的表达与纯化 | 第50-52页 |
| 2.4.3 McsB体外磷酸化条件优化 | 第52-54页 |
| 2.4.4 TiO_2富集磷酸化精氨酸多肽 | 第54-57页 |
| 2.4.5 Western Blot验证湿热脂肪芽胞杆菌中的磷酸化精氨酸蛋白 | 第57-58页 |
| 2.4.6 Nano LC-MS检测McsB在嗜热脂肪芽孢杆菌中的底物蛋白 | 第58-61页 |
| 2.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 第三章 异亮氨酸辅助ESI-MS~2鉴定二糖异构体 | 第63-77页 |
| 3.1 引言 | 第63-64页 |
| 3.2 实验部分 | 第64-65页 |
| 3.2.1 试剂 | 第64页 |
| 3.2.2 样品制备及ESI-MS/MS质谱分析条件 | 第64-65页 |
| 3.2.3 数据统计分析 | 第65页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第65-74页 |
| 3.3.1 氨基酸-二糖-钾离子复合物的生成 | 第65-67页 |
| 3.3.2 异亮氨酸-二糖-钾离子复合物多级质谱裂解规律研究 | 第67-71页 |
| 3.3.3 PCA用于二糖结构的鉴定 | 第71-74页 |
| 3.4 本章小结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 第四章 论文总结与展望 | 第77-79页 |
| 4.1 以γ-[~(18)O_4]-ATP为探针鉴定精氨酸激酶McsB的底物蛋白 | 第77-78页 |
| 4.2 Ile辅助ESI-MS2鉴定二糖异构体 | 第78页 |
| 4.3 研究工作展望 | 第78-79页 |
| 附录Ⅰ 论文图表索引 | 第79-81页 |
| 附录Ⅱ 相关谱图 | 第81-94页 |
| 在研期间发表的研究成果 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
