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Actin调控激酶MoArk1结合蛋白MoCAP和MoAbp1在稻瘟病菌发育和致病中的功能分析

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
引言第12-14页
上篇 文献综述第14-61页
    第一章 稻瘟病菌致病相关基因研究进展第15-35页
        1 稻瘟病及稻瘟病菌第15-17页
        2 稻瘟病菌分生孢子的形成机制第17-18页
        3 寄主植物表面的信号识别机制第18-19页
        4 稻瘟病菌附着胞的形成,成熟及对寄主的侵染机制第19-21页
        5 稻瘟病菌在寄主细胞内的形态变化及调控机制第21-25页
        6 展望第25-26页
        参考文献第26-35页
    第二章 真菌actin细胞骨架与膜泡运输研究进展第35-61页
        1 胞吞作用概述第35-36页
        2 运载蛋白分拣信号和接头蛋白第36-37页
        3 胞吞的起始第37-38页
        4 胞吞位点的成熟第38-39页
        5 Actin的组装机制第39-42页
            5.1 Actin的成核期第40页
            5.2 Actin的稳定期第40-41页
            5.3 Actin的动态平衡期第41-42页
        6 囊泡的剪切和脱包被第42-44页
        7 Actin对胞吞作用的调控第44-45页
        8 Actin对外泌作用的调控第45-46页
        9 稻瘟病菌中的actin细胞骨架及膜泡运输第46-48页
        参考文献第48-61页
下篇 研究内容第61-151页
    第—章 Actin加帽蛋白复合体MoCAP在稻瘟病菌发育及致病中的功能分析第63-119页
        1 材料与方法第66-75页
            1.1 供试菌株及培养条件第66-67页
            1.2 MoArk1互作蛋白的鉴定第67-68页
            1.3 MoCapA和MoCapB序列及系统发育树第68页
            1.4 稻瘟病菌DNA、RNA的提取和cDNA的合成第68-69页
            1.5 MoCAPA和MoCAPB基因缺失突变体的获得第69-71页
            1.6 MoCAPA和MoCAPB基因敲除突变体生长速率测定及产孢测定第71页
            1.7 MoCAPA和MoCAPB敲除突变体致病力测定第71-72页
            1.8 附着胞形成及膨压测定第72页
            1.9 胞吞作用观察及分析第72页
            1.10 效应分子分泌观察第72-73页
            1.11 侵染菌丝有丝分裂观察第73页
            1.12 自噬实验第73页
            1.13 Actin定位观察第73页
            1.14 Actin蛋白与MoCAP蛋白共定位观察第73-74页
            1.15 MoCAP蛋白磷酸化位点的鉴定第74-75页
            1.16 统计分析第75页
        2 结果与分析第75-111页
            2.1 MoArk1互作蛋白的鉴定第75-77页
            2.2 MoCapA和MoCapB的鉴定第77-78页
            2.3 MoCAP与MoArk1相互作用第78-80页
            2.4 MoCAPA和MoCAPB基因在各个阶段的表达分析第80-81页
            2.5 MoCAPA和MoCAPB基因敲除突变体及其互补菌株的获得第81-82页
            2.6 MoCAP参与调控稻瘟病菌的极性生长第82-86页
            2.7 MoCAP参与调控稻瘟病菌分生孢子的产生第86-87页
            2.8 MoCAP参与调控稻瘟病菌的致病力第87-90页
            2.9 MoCAP参与调控稻瘟病菌actin细胞骨架的组装第90-92页
            2.10 MoCAP参与调控稻瘟病菌的自噬过程第92-93页
            2.11 MoCAP参与调控稻瘟病菌的内吞作用第93-94页
            2.12 MoCAP参与调控稻瘟病菌效应分子的外泌第94页
            2.13 MoCAP与actin共定位第94-95页
            2.14 MoCAP通过F-actin加帽基序与F-actin相互作用第95-98页
            2.15 F-actin加帽基序的功能分析第98-99页
            2.16 MoCapA和MoCapB被蛋白激酶MoArk1磷酸化第99-101页
            2.17 MoCapA和MoCapB的磷酸化负调控稻瘟病菌的生长,产孢及致病力第101-104页
            2.18 MoCapA和MoCapB的磷酸化负调控稻瘟病菌的胞吞过程第104-105页
            2.19 MoCapA和MoCapB的磷酸化负调控F-actin的组装第105-106页
            2.20 磷酸化位点持续失活的MoCapA和MoCapB抑制AMoark1的生长,产孢和毒力缺陷第106-108页
            2.21 磷酸化位点持续失活的MoCapA和MoCapB能够抑制AMoark1的胞吞缺陷第108-109页
            2.22 磷酸化位点持续失活的MoCapA和MoCapB能够抑制AMoark1在actin细胞骨架的组装缺陷第109-110页
            2.23 MoCAP能够响应PIP2的水平而调控actin细胞骨架的组装第110-111页
        3 讨论第111-114页
        参考文献第114-119页
    第二章 Actin结合蛋白MoAbp1在稻瘟病菌发育及致病中的功能分析第119-151页
        1 材料与方法第121-124页
            1.1 供试菌株及培养条件第121页
            1.2 MoAbp1的序列分析及进化树第121-122页
            1.3 稻瘟病菌DNA、RNA的提取和cDNA的合成第122页
            1.4 稻瘟病菌MoABP1敲除突变体的获得第122页
            1.5 稻瘟病菌MoABP1缺失突变体的生长速率测定第122-123页
            1.6 MoABP1缺失突变体的致病力测定第123页
            1.7 MoABP1缺失突变体细胞内吞作用的观察第123页
            1.8 Actin定位观察第123页
            1.9 MoArk1荧光定位观察第123页
            1.10 MoCap1荧光定位观察第123页
            1.11 MoArk1的磷酸化测定第123页
            1.12 cAMP浓度测定第123-124页
        2 结果与分析第124-144页
            2.1 稻瘟病菌中MoAbp1的鉴定第124-125页
            2.2 MoAbp1与MoArk1相互作用第125-126页
            2.3 MoAbp1与actin相互作用第126-127页
            2.4 MoAbp1与MoCap1相互作用第127-129页
            2.5 MoABP1基因在各个阶段的表达分析第129-130页
            2.6 MoABP1基因敲除突变体及其互补菌株的获得第130-132页
            2.7 MoAbp1参与调控MoArk1的亚细胞定位及MoArk1的磷酸化第132-133页
            2.8 MoAbp1参与调控MoCap1的定位第133-134页
            2.9 MoAbp1参与调控稻瘟病菌actin细胞骨架的组装第134-135页
            2.10 MoAbp1参与调控稻瘟病菌的内吞作用第135-136页
            2.11 MoAbp1参与调控稻瘟病菌的营养生长第136-137页
            2.12 MoAbp1参与调控稻瘟病菌的致病力第137-139页
            2.13 MoAbp1通过不同的功能域分别与多个蛋白相互作用第139-141页
            2.14 ADFH功能域调控MoAbp1定位第141页
            2.15 MoAbp1的各功能域是actin细胞骨架的正确组装必需的第141-142页
            2.16 MoAbp1的各功能域是正常的胞吞过程必需的第142-143页
            2.17 MoAbp1的各功能域调控生长和致病过程第143-144页
        3 讨论第144-146页
        参考文献第146-151页
全文总结及创新点第151-153页
附录1第153-157页
附表1第157-161页
攻读博士学位期间发表的研究论文第161-163页
致谢第163页

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