| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一部分 引言 | 第7-19页 |
| 1 基因工程抗体的发展及制备技术 | 第7-10页 |
| 1.1 单克隆抗体的制备及重组技术 | 第7-9页 |
| 1.2 单链抗体制备技术及应用 | 第9-10页 |
| 2 单抗临床治疗癌症应用的研究进展 | 第10-16页 |
| 2.1 单抗在癌症诊断方面的应用 | 第10-11页 |
| 2.2 单抗用于肿瘤治疗的应用 | 第11-13页 |
| 2.3 单抗用于乳腺癌治疗的研究进展 | 第13-16页 |
| 3 SHON概述及研究进展 | 第16-17页 |
| 4 研究内容、意义及创新点 | 第17-19页 |
| 4.1 研究内容 | 第17页 |
| 4.2 研究意义 | 第17-18页 |
| 4.3 研究创新点 | 第18-19页 |
| 第二部分 材料及方法 | 第19-35页 |
| 1 实验材料 | 第19-22页 |
| 1.1 载体、质粒及菌种 | 第19页 |
| 1.2 细胞株 | 第19页 |
| 1.3 引物的设计及合成 | 第19-20页 |
| 1.4 主要仪器及试剂 | 第20-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-35页 |
| 2.1 单克隆抗体细胞株的筛选 | 第22-28页 |
| 2.2 抗体可变区基因的获得 | 第28-31页 |
| 2.3 轻链和重链表达质粒的构建 | 第31-32页 |
| 2.4 全抗体在CHO细胞中的分泌表达及验证 | 第32页 |
| 2.5 单链抗体(anti-SHONscFv)基因表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.6 单链抗体的原核表达、纯化及验证 | 第33-35页 |
| 第三部分 实验结果 | 第35-47页 |
| 1 单克隆抗体的制备及杂交瘤株系的筛选 | 第35-39页 |
| 1.1 GST-SHON抗原蛋白的纯化及杂交瘤细胞的获得 | 第35页 |
| 1.2 单抗与胞内SHON蛋白的结合能力 | 第35-36页 |
| 1.3 单抗对MCF10A-SHON细胞生长的影响 | 第36-37页 |
| 1.4 单抗对MCF10A-SHON细胞克隆形成能力的影响 | 第37-38页 |
| 1.5 SHON单抗对MCF10A-SHON细胞迁移的影响 | 第38页 |
| 1.6 单抗与临床乳腺癌样本中SHON结合的特异性 | 第38-39页 |
| 2 可变区基因的克隆 | 第39-42页 |
| 2.1 ELISA筛选效价最高的单抗 | 第39-40页 |
| 2.2 抗体的亚型鉴定 | 第40页 |
| 2.3 抗体可变区基因的扩增 | 第40-42页 |
| 3 抗体的真核表达及验证 | 第42-43页 |
| 3.1 抗体真核表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.2 真核表达抗体与SHON蛋白的结合 | 第43页 |
| 3.3 真核表达抗体与SHON蛋白的结合 | 第43页 |
| 4 SHON单链抗体的表达、纯化及验证 | 第43-47页 |
| 4.1 单链抗体表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 4.2 单链抗体的表达 | 第44页 |
| 4.3 单链抗体的纯化 | 第44-45页 |
| 4.4 验证单链抗体与SHON蛋白结合 | 第45页 |
| 4.5 验证单链抗体与SHON蛋白结合 | 第45-47页 |
| 第四部分 结论 | 第47-48页 |
| 第五部分 讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
