| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 主要符号表 | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-22页 |
| 1.1 鱼类常见细菌性疾病病原 | 第13-15页 |
| 1.2 渔用疫苗研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 鱼类常见病原菌外膜蛋白的免疫原性 | 第17-19页 |
| 1.3.1 鱼类常见病原菌外膜蛋白亚单位疫苗 | 第17-18页 |
| 1.3.2 鱼类常见病原菌外膜蛋白多联疫苗 | 第18-19页 |
| 1.4 存在的问题 | 第19-20页 |
| 1.5 本文研究内容及意义 | 第20-22页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第20页 |
| 1.5.2 研究意义 | 第20-22页 |
| 第2章 迟钝爱德华氏菌与创伤弧菌外膜蛋白基因表达载体的构建、表达与纯化 | 第22-48页 |
| 2.1 前言 | 第22页 |
| 2.2 材料与方法 | 第22-29页 |
| 2.2.1 主要仪器及试剂 | 第22-25页 |
| 2.2.2 菌株与质粒 | 第25页 |
| 2.2.3 DNA模板制备 | 第25页 |
| 2.2.4 外膜蛋白基因的扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.5 重组表达载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.2.6 重组外膜蛋白的原核表达 | 第28-29页 |
| 2.3 结果 | 第29-46页 |
| 2.3.1 DNA模板制备 | 第29-30页 |
| 2.3.2 外膜蛋白基因PCR扩增结果 | 第30-31页 |
| 2.3.3 质粒双酶切 | 第31-32页 |
| 2.3.4 重组T载双酶切 | 第32-33页 |
| 2.3.5 菌落PCR鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.6 双酶切鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.7 序列分析 | 第35-40页 |
| 2.3.8 重组外膜蛋白亲水性分析 | 第40-41页 |
| 2.3.9 重组外膜蛋白免疫原性预测 | 第41-42页 |
| 2.3.10 重组蛋白表达条件 | 第42-44页 |
| 2.3.11 重组蛋白表达形式的鉴定 | 第44-45页 |
| 2.3.12 表达蛋白的纯化与复性 | 第45-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-48页 |
| 2.4.1 迟钝爱德华氏菌和创伤弧菌外膜蛋白的筛选 | 第46页 |
| 2.4.2 表达载体的构建 | 第46页 |
| 2.4.3 连接与转化 | 第46-47页 |
| 2.4.4 重组蛋白表达 | 第47-48页 |
| 第3章 迟钝爱德华氏菌重组外膜蛋白的免疫原性研究 | 第48-62页 |
| 3.1 前言 | 第48页 |
| 3.2 材料与方法 | 第48-52页 |
| 3.2.1 主要仪器材料 | 第48-49页 |
| 3.2.2 主要试剂及配制 | 第49页 |
| 3.2.3 菌株与鳗鲡 | 第49页 |
| 3.2.4 鳗鲡免疫注射及样品采集 | 第49-50页 |
| 3.2.5 全血细胞的培养与转化试验 | 第50页 |
| 3.2.6 ELISA法测定鳗鲡血清抗体效价 | 第50页 |
| 3.2.7 溶菌酶含量测定 | 第50-51页 |
| 3.2.8 补体活性测定 | 第51页 |
| 3.2.9 血清与全血细胞相对杀菌率 | 第51-52页 |
| 3.2.10 攻毒感染与免疫保护率测定 | 第52页 |
| 3.2.11 统计学分析 | 第52页 |
| 3.3 结果 | 第52-58页 |
| 3.3.1 全血细胞的培养与转化 | 第52-53页 |
| 3.3.2 血清抗体效价 | 第53页 |
| 3.3.3 溶菌酶含量 | 第53-55页 |
| 3.3.4 补体活性 | 第55-56页 |
| 3.3.5 相对杀菌率 | 第56-57页 |
| 3.3.6 相对免疫保护率 | 第57-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-62页 |
| 3.4.1 全血细胞培养与转化 | 第59页 |
| 3.4.2 抗体效价 | 第59页 |
| 3.4.3 溶菌酶含量 | 第59-60页 |
| 3.4.4 补体活性 | 第60页 |
| 3.4.5 相对杀菌率 | 第60页 |
| 3.4.6 相对免疫保护率 | 第60-62页 |
| 第4章 创伤弧菌重组外膜蛋白的免疫原性研究 | 第62-72页 |
| 4.1 前言 | 第62页 |
| 4.2 材料与方法 | 第62-63页 |
| 4.2.1 主要仪器材料 | 第62页 |
| 4.2.2 主要试剂及配制 | 第62页 |
| 4.2.3 菌株与鳗鲡 | 第62页 |
| 4.2.4 鳗鲡免疫注射及样品采集 | 第62-63页 |
| 4.2.5 全血细胞的培养与转化试验 | 第63页 |
| 4.2.6 ELISA法测定鳗鲡血清抗体效价 | 第63页 |
| 4.2.7 溶菌酶含量测定 | 第63页 |
| 4.2.8 补体活性测定 | 第63页 |
| 4.2.9 血清与全血细胞相对杀菌率 | 第63页 |
| 4.2.10 攻毒感染与免疫保护率测定 | 第63页 |
| 4.2.11 统计学分析 | 第63页 |
| 4.3 结果 | 第63-70页 |
| 4.3.1 全血细胞的培养与转化 | 第63-64页 |
| 4.3.2 血清抗体效价 | 第64-65页 |
| 4.3.3 溶菌酶含量 | 第65-67页 |
| 4.3.4 补体活性 | 第67页 |
| 4.3.5 相对杀菌率 | 第67-68页 |
| 4.3.6 相对免疫保护率 | 第68-70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-72页 |
| 第5章 总结与展望 | 第72-74页 |
| 5.1 论文主要成果 | 第72页 |
| 5.2 论文主要创新点 | 第72-73页 |
| 5.3 展望 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 在学期间科研成果情况 | 第86页 |