摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第11-26页 |
1.1 南大洋的形成 | 第12-13页 |
1.2 南极鱼的进化 | 第13-14页 |
1.3 在长期寒冷水域中的生存适应性变化 | 第14-19页 |
1.3.1 稳定低温下生命所需的功能的获得 | 第14-17页 |
1.3.2 在稳定的低温下生命所允许的功能的丧失 | 第17-19页 |
1.4 ROS的产生 | 第19-20页 |
1.5 SEPP | 第20-24页 |
1.5.1 SEPP的介绍 | 第20页 |
1.5.2 SEPP的起源及进化 | 第20-21页 |
1.5.3 真核生物中SEPP的结构进化 | 第21-23页 |
1.5.4 SEPP的表达 | 第23页 |
1.5.5 SEPP在抗氧化损伤方面的作用 | 第23-24页 |
1.6 研究目的及意义 | 第24-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-43页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 实验主要仪器与材料 | 第26-27页 |
2.2.1 细胞系及质粒菌种 | 第26页 |
2.2.2 试剂与抗体 | 第26-27页 |
2.2.3 实验主要仪器 | 第27页 |
2.3 实验步骤与方法 | 第27-43页 |
2.3.1 细胞培养及低温处理 | 第27-29页 |
2.3.2 质粒鉴定提取 | 第29-30页 |
2.3.3 Dm-SEPP-FLAG过表达载体构建 | 第30-32页 |
2.3.4 Em-SEPPshRNA质粒构建及细胞转染 | 第32-36页 |
2.3.5 RT-qPCR监测转录水平 | 第36-39页 |
2.3.6 WesternBlot监测蛋白水平 | 第39-41页 |
2.3.7 细胞活性氧ROS监测 | 第41-42页 |
2.3.8 细胞存活率监测 | 第42-43页 |
第三章 结果 | 第43-53页 |
3.1 Dm-SEPPcDNA特征分析及进化分析 | 第43-47页 |
3.1.1 Dm-SEPPcDNA特征分析 | 第43-45页 |
3.1.2 Dm-SEPP进化树分析 | 第45-47页 |
3.2 低温下Dm-SEPP对HEK-293T细胞的保护作用 | 第47-49页 |
3.2.1 Dm-SEPP的成功表达 | 第47页 |
3.2.2 低温下Dm-SEPP的表达调控 | 第47-48页 |
3.2.3 低温下Dm-SEPP的表达调控对ROS及细胞存活率的影响 | 第48-49页 |
3.3 低温下斑马鱼ZF4细胞中Em-SEPP的调控 | 第49-53页 |
3.3.1 低温诱导ZF4细胞内源性Em-SEPP的表达 | 第49-50页 |
3.3.2 ZF4细胞内Em-SEPP内源性敲降实验 | 第50-51页 |
3.3.3 Em-SEPP敲降对ZF4细胞存活率及ROS的影响 | 第51-53页 |
第四章 结论与讨论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-68页 |
附录 | 第68-69页 |
发表文章及会议摘要 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |