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白花泡桐DREB转录因子基因的克隆与表达分析

致谢第4-7页
摘要第7-8页
英汉缩略词对照第8-9页
1 文献综述第9-17页
    1.1 植物抗逆分子机制第9-12页
        1.1.1 在逆境胁迫中直接发挥功能的蛋白第9-10页
            1.1.1.1 LEA蛋白第9-10页
            1.1.1.2 水通道蛋白第10页
            1.1.1.3 Na~+/H~+逆向转运蛋白第10页
        1.1.2 渗透调节因子第10-11页
            1.1.2.1 脯氨酸第11页
            1.1.2.2 甜菜碱第11页
        1.1.3 抗氧化防御相关酶第11-12页
            1.1.3.1 POD第11-12页
            1.1.3.2 SOD第12页
        1.1.4 感应传导胁迫信号、调控基因表达相关基因第12页
    1.2 植物抗逆相关转录因子第12-13页
        1.2.1 bZIP转录因子第12-13页
        1.2.2 MYB转录因子第13页
        1.2.3 WRKY转录因子第13页
        1.2.4 AP2/EREBP转录因子第13页
    1.3 DREB转录因子第13-15页
        1.3.1 DREB转录因子的结构特点第14页
        1.3.2 DREB转录因子的表达调控第14页
        1.3.3 DREB基因在植物抗逆基因工程中的作用第14-15页
    1.4 实时荧光定量PCR的应用第15-16页
    1.5 白花泡桐概述第16-17页
2 引言第17-18页
3 材料与方法第18-32页
    3.1 实验材料第18页
        3.1.1 植物材料第18页
        3.1.2 实验主要试剂和试剂盒第18页
        3.1.3 实验主要仪器第18页
        3.1.4 常用溶液配方第18页
    3.2 实验方法第18-32页
        3.2.1 植物材料培养及胁迫处理第18-19页
            3.2.1.1 材料的培养和实验取样第18-19页
            3.2.1.2 幼苗的胁迫处理第19页
        3.2.2 白花泡桐DNA的提取(CTAB法)和检测第19页
            3.2.2.1 白花泡桐DNA的提取第19页
            3.2.2.2 白花泡桐DNA的检测第19页
        3.2.3 白花泡桐RNA的提取和检测第19-20页
            3.2.3.1 白花泡桐RNA的提取第19-20页
            3.2.3.2 白花泡桐RNA的检测第20页
        3.2.4 第一链cDNA的合成第20-21页
        3.2.5 泡桐DREB基因保守序列的获得第21-22页
            3.2.5.1 设计合成引物第21页
            3.2.5.2 PCR扩增第21-22页
        3.2.6 利用3'RACE、5'RACE克隆已知保守序列的3'端、5'端序列第22-27页
            3.2.6.1 巢式PCR扩增3'端序列第22-24页
            3.2.6.2 巢式PCR扩增5'端序列第24-27页
        3.2.7 白花泡桐DREB基因全长序列的获得第27页
        3.2.8 不同胁迫处理下白花泡桐DREB基因的表达分析第27-32页
            3.2.8.1 实时荧光定量PCR相关引物设计第27-28页
            3.2.8.2 引物的特异性检测第28页
            3.2.8.3 检测引物二聚体第28-29页
            3.2.8.4 绘制梯度稀释标准曲线DNA模板的制备第29-30页
            3.2.8.5 不同逆境条件下目的基因表达的实时荧光定量分析第30-32页
4 结果与分析第32-39页
    4.1 白花泡桐DREB基因序列的获得第32-33页
        4.1.1 白花泡桐基因组DNA、RNA检测第32页
        4.1.2 白花泡桐DREB保守序列的获得第32页
        4.1.3 DREB基因3,端、5,端序列的获得第32-33页
        4.1.4 DREB基因全长序列第33页
    4.2 白花泡桐DREB基因生物信息学分析第33-36页
    4.3 不同胁迫处理下白花泡桐DREB基因的表达分析第36-39页
        4.3.1 引物的特异性检测第36-37页
        4.3.2 引物二聚体检测第37页
        4.3.3 不同胁迫下目的基因表达的实时荧光定量分析结果第37-39页
5 结论与讨论第39-41页
    5.1 白花泡桐DREB基因的克隆第39页
    5.2 白花泡桐DREB基因全长序列的分析第39-40页
    5.3 白花泡桐DREB基因的不同胁迫条件下表达分析第40-41页
参考文献第41-49页
ABSTRACT第49-50页

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