中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语 | 第11-13页 |
前言 | 第13-17页 |
研究现状、成果 | 第13-15页 |
研究目的、方法 | 第15-17页 |
一、HBV-DNAP能够促进肝癌细胞的恶性行为 | 第17-28页 |
1.1 材料和方法 | 第17-23页 |
1.1.1 实验材料 | 第17-18页 |
1.1.2 实验方法 | 第18-23页 |
1.1.3 统计学方法 | 第23页 |
1.2 结果 | 第23-27页 |
1.2.1 验证过表达质粒pCD3/Flag-HBV-DNAP的有效性 | 第23-24页 |
1.2.2 HBV-DNAP促进肝癌细胞的活性 | 第24页 |
1.2.3 HBV-DNAP促进肝癌细胞的克隆形成能力 | 第24-25页 |
1.2.4 HBV-DNAP促进肝癌细胞的迁移能力 | 第25页 |
1.2.5 HBV-DNAP促进肝癌细胞的侵袭能力 | 第25-26页 |
1.2.6 HBV-DNAP促进肝癌细胞EMT的发生 | 第26-27页 |
1.3 小结 | 第27-28页 |
二、HBV-DNAP在肝癌细胞中的作用机制 | 第28-43页 |
2.1 材料和方法 | 第28-38页 |
2.1.1 实验材料 | 第28-29页 |
2.1.2 实验方法 | 第29-38页 |
2.1.3 统计学方法 | 第38页 |
2.2 | 第38-42页 |
2.2.1 RIP-seq筛选HBV-DNAP相互作用的候选基因RNA | 第38-39页 |
2.2.2 Western blotting检测筛选基因过表达质粒的有效性 | 第39页 |
2.2.3 Western blotting检测HBV-DNAP对筛选基因蛋白表达水平的影响 | 第39-40页 |
2.2.4 RT-qPCR检测HBV-DNAP对VHL基因的mRNA水平的影响 | 第40-41页 |
2.2.5 RT-qPCR检测HBV-DNAP对VHL mRNA稳定性的影响 | 第41-42页 |
2.3 小结 | 第42-43页 |
三、VHL在肝癌细胞中的功能研究 | 第43-50页 |
3.1 材料和方法 | 第43-46页 |
3.1.1 实验材料 | 第43页 |
3.1.2 实验方法 | 第43-46页 |
3.1.3 统计学方法 | 第46页 |
3.2 结果 | 第46-49页 |
3.2.1 验证过表达质粒pCD3/Flag-VHL及敲降质粒shR-VHL的有效性 | 第46-47页 |
3.2.2 pCD3/Flag-VHL抑制了肝癌细胞Huh7和HepG2的活性 | 第47页 |
3.2.3 VHL抑制肝癌细胞Huh7和HepG2的克隆形成能力 | 第47-48页 |
3.2.4 VHL抑制肝癌细胞Huh7和HepG2的迁移能力 | 第48页 |
3.2.5 VHL抑制肝癌细胞Huh7和HepG2的侵袭能力 | 第48-49页 |
3.2.6 VHL抑制肝癌细胞EMT的发生 | 第49页 |
3.3 小结 | 第49-50页 |
四、过表达VHL后能够部分挽救HBV-DNAP的作用 | 第50-57页 |
4.1 材料和方法 | 第50-52页 |
4.1.1 实验材料 | 第50页 |
4.1.2 实验方法 | 第50-51页 |
4.1.3 统计学方法 | 第51-52页 |
4.2 结果 | 第52-56页 |
4.2.1 在肝癌细胞Huh7中过表达VHL能够挽救HBV-DNAP对VHL蛋白表达水平的抑制作用。 | 第52页 |
4.2.2 VHL可挽救HBV-DNAP对肝癌细胞活性的影响 | 第52-53页 |
4.2.3 VHL可挽救HBV-DNAP对肝癌细胞克隆形成能力的影响 | 第53-54页 |
4.2.4 VHL可挽救HBV-DNAP对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第54页 |
4.2.5 VHL可挽救HBV-DNAP对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第54-55页 |
4.2.6 Western blot检测过表达VHL能够挽救HBV-DNAP对肝癌细胞EMT的促进作用 | 第55-56页 |
4.3 小结 | 第56-57页 |
讨论 | 第57-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第66-67页 |
综述 HBV相关的肝癌发生机制 | 第67-81页 |
综述参考文献 | 第73-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
个人简历 | 第82页 |