| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 乙醛酸简介 | 第14-15页 |
| 1.1.1 乙醛酸的理化性质及其应用 | 第14页 |
| 1.1.2 乙醛酸合成方法 | 第14-15页 |
| 1.2 乙醛酸的生物合成研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.1 酶法合成研究 | 第15-16页 |
| 1.2.2 生物法合成研究 | 第16-17页 |
| 1.3 生物法合成乙醇酸的研究 | 第17-18页 |
| 1.4 体外酶法合成的简介 | 第18-19页 |
| 1.5 木糖的发酵利用 | 第19-20页 |
| 1.6 选题的背景与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 乙醛酸生产菌株的构建及培养 | 第22-38页 |
| 2.1 前言 | 第22-23页 |
| 2.2 材料与方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 质粒与菌株 | 第23页 |
| 2.2.2 材料和仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.3 培养基和抗生素的配置 | 第24页 |
| 2.2.4 常用分子生物学试剂 | 第24页 |
| 2.2.5 实验室基础方法 | 第24-26页 |
| 2.2.5.1 无菌操作 | 第24页 |
| 2.2.5.2 高温蒸汽灭菌 | 第24页 |
| 2.2.5.3 摇瓶发酵和取样 | 第24-25页 |
| 2.2.5.4 吸光度测定 | 第25页 |
| 2.2.5.5 高效液相色谱分析 | 第25页 |
| 2.2.5.6 分子生物学操作 | 第25-26页 |
| 2.3 乙醛酸合成突变体构建 | 第26-33页 |
| 2.3.1 aceB基因缺失突变体E.coli Xg2的构建 | 第27-30页 |
| 2.3.2 aceB、glcB基因缺失的突变体E.coli Xg3的构建 | 第30-31页 |
| 2.3.3 aceB、glcB、gcl基因缺失的突变体E.coli Xg4的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.4 aceB、glcB、gcl、ycdW基因缺失的突变体E.coli Xg5的构建 | 第32-33页 |
| 2.4 乙醛酸合成重组菌的构建 | 第33-36页 |
| 2.4.1 乙醛酸合成重组菌的构建 | 第33-34页 |
| 2.4.2 乙醛酸合成重组菌的培养 | 第34页 |
| 2.4.3 乙醛酸合成重组菌的培养结果与分析 | 第34-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-38页 |
| 第三章 相关内源性基因过表达对乙醛酸合成的影响 | 第38-52页 |
| 3.1 前言 | 第38页 |
| 3.2 实验材料和实验方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 质粒与菌株 | 第38-39页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 3.2.2.1 摇瓶发酵和取样 | 第39-40页 |
| 3.2.2.2 H_2O_2的测定 | 第40页 |
| 3.3 质粒构建 | 第40-47页 |
| 3.3.1 大肠杆菌基因组提取 | 第40页 |
| 3.3.2 乙醇酸氧化酶过表达载体的构建 | 第40-43页 |
| 3.3.3 乙醇酸氧化酶和过氧化氢酶共表达载体的构建 | 第43-47页 |
| 3.3.3.1 过氧化氢酶过表达载体的构建 | 第43-45页 |
| 3.3.3.2 乙醇酸氧化酶和过氧化氢酶共表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.4 乙醛酸合成相关基因过表达菌株构建以及培养 | 第47-51页 |
| 3.4.1 过表达乙醇酸氧化酶对细胞生长和乙醛酸合成的影响 | 第47-49页 |
| 3.4.2 过表达过氧化物酶对细胞生长和乙醛酸合成的影响 | 第49-51页 |
| 3.5 本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 体外酶催化合成乙醇酸的研究 | 第52-62页 |
| 4.1 前言 | 第52页 |
| 4.2 实验材料和实验方法 | 第52-54页 |
| 4.2.1 质粒与菌株 | 第52-53页 |
| 4.2.2 实验室基础方法 | 第53-54页 |
| 4.2.2.1 摇瓶发酵 | 第53页 |
| 4.2.2.2 细胞收集与裂解 | 第53页 |
| 4.2.2.3 胞内总蛋白提取分析 | 第53-54页 |
| 4.3 质粒构建 | 第54-56页 |
| 4.3.1 大肠杆菌基因组的提取 | 第54页 |
| 4.3.2 蛋白质表达质粒的构建 | 第54-56页 |
| 4.4 体外酶反应相关酶的表达 | 第56页 |
| 4.5 体外酶催化合成乙醇酸的反应 | 第56-57页 |
| 4.6 实验结果 | 第57-61页 |
| 4.6.1 蛋白表达结果 | 第57-58页 |
| 4.6.2 体外酶催化合成乙醇酸结果 | 第58-61页 |
| 4.7 本章小结 | 第61-62页 |
| 第五章 结论、创新点及展望 | 第62-64页 |
| 5.1 结论 | 第62-63页 |
| 5.2 创新点 | 第63页 |
| 5.3 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 附录 | 第68-78页 |
| 研究成果及发表论文 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 作者与导师简介 | 第82-84页 |
| 附件 | 第84-86页 |
