| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第8-16页 |
| 1.1 铜在植物中的作用 | 第8-9页 |
| 1.1.1 植物中的铜稳态 | 第8页 |
| 1.1.2 铜伴侣蛋白的抗氧化功能 | 第8-9页 |
| 1.2 铜伴侣蛋白ATX1的研究进展 | 第9-12页 |
| 1.2.1 ATXl-type铜伴侣蛋白的研究进展 | 第9-11页 |
| 1.2.2 CCH-tpye铜伴侣蛋白的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 铜应答元件对铜稳态的调节 | 第12-13页 |
| 1.4 杨树转基因的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第14-16页 |
| 2 PnATXs蛋白的抗氧化功能验证 | 第16-28页 |
| 2.1 材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 载体和菌种 | 第16页 |
| 2.1.2 试验所用试剂 | 第16-18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-23页 |
| 2.2.1 酵母表达载体的构建 | 第18-22页 |
| 2.2.2 酵母感受态的制备和转化 | 第22页 |
| 2.2.3 酵母功能互补试验 | 第22-23页 |
| 2.3 试验结果 | 第23-26页 |
| 2.3.1 酵母表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.3.2 PnATX基因抗氧化功能鉴定 | 第25-26页 |
| 2.4 讨论 | 第26页 |
| 2.5 本章小结 | 第26-28页 |
| 3 小黑杨PnATXs基因启动子的克隆与功能分析 | 第28-41页 |
| 3.1 材料 | 第28页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 3.1.2 载体、试剂和器材 | 第28页 |
| 3.2 试验方法 | 第28-33页 |
| 3.2.1 小黑杨PnATXs启动子的克隆 | 第28-29页 |
| 3.2.2 小黑杨PnATXs基因启动子元件分析 | 第29页 |
| 3.2.3 PnATXs的载体构建及农杆菌转化 | 第29-30页 |
| 3.2.4 农杆菌的感受态制备及转化 | 第30-31页 |
| 3.2.5 拟南芥的种植 | 第31-32页 |
| 3.2.6 拟南芥纯合转化系的获得 | 第32页 |
| 3.2.7 转基因拟南芥植株的GUS染色 | 第32-33页 |
| 3.2.8 不同铜浓度处理拟南芥转化株系 | 第33页 |
| 3.3 试验结果 | 第33-40页 |
| 3.3.1 小黑杨PnATX1和PnATX2启动子的克隆 | 第33页 |
| 3.3.2 启动子元件分析 | 第33-38页 |
| 3.3.3 小黑杨PnATXs启动子表达载体的构建 | 第38页 |
| 3.3.4 转基因拟南芥植株的GUS染色结果 | 第38-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 4 小黑杨PnATX1基因的遗传转化 | 第41-49页 |
| 4.1 材料 | 第41页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 4.1.2 菌种和载体 | 第41页 |
| 4.1.3 相关试剂 | 第41页 |
| 4.1.4 小黑杨组织培养所用培养基 | 第41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-44页 |
| 4.2.1 过量表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 4.2.2 小黑杨的遗传转化 | 第42-43页 |
| 4.2.3 小黑杨抗性植株的PCR检测 | 第43-44页 |
| 4.2.4 转基因小黑杨实时荧光定量PCR检测 | 第44页 |
| 4.3 试验结果 | 第44-47页 |
| 4.3.1 pROK II-PnATX1载体的构建 | 第44-45页 |
| 4.3.2 小黑杨转基因植株的获得 | 第45-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 4.5 本章小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
