摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-16页 |
1.1 昆虫Methuselah-like受体及其激动剂研究进展 | 第10-12页 |
1.2 RNAi技术在昆虫中的研究进展 | 第12-13页 |
1.3 转基因果蝇技术的研究进展 | 第13-14页 |
1.4 舞毒蛾研究进展 | 第14页 |
1.5 本论文研究目的及意义 | 第14-16页 |
2 舞毒蛾Methuselah-like受体激动剂性肽基因鉴定及特性分析 | 第16-32页 |
2.1 试验材料 | 第16-17页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第16页 |
2.1.2 实验仪器 | 第16页 |
2.1.3 主要试剂(盒) | 第16-17页 |
2.2 试验方法 | 第17-21页 |
2.2.1 试虫处理 | 第17页 |
2.2.2 总RNA提取 | 第17-18页 |
2.2.3 反转录合成第一链cDNA | 第18页 |
2.2.4 LdSP基因全长载体构建 | 第18页 |
2.2.5 PCR检测及胶回收 | 第18-20页 |
2.2.6 LdSP基因生物信息学分析 | 第20页 |
2.2.7 不同发育阶段舞毒蛾LdSP基因表达量分析 | 第20-21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-30页 |
2.3.1 RNA提取和消化 | 第21页 |
2.3.2 LdSP基因克隆 | 第21-22页 |
2.3.3 LdSP基因特性分析 | 第22-29页 |
2.3.4 舞毒蛾LdSP基因不同发育阶段表达 | 第29-30页 |
2.4 小结与讨论 | 第30-32页 |
2.4.1 舞毒蛾LdSP基因鉴定与分析 | 第30页 |
2.4.2 舞毒蛾LdSP基因发育特异性表达分析 | 第30-32页 |
3 RNAi介导舞毒蛾性肽LdSP基因功能分析 | 第32-44页 |
3.1 试验材料 | 第32页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第32页 |
3.1.2 实验仪器 | 第32页 |
3.1.3 主要试剂(盒) | 第32页 |
3.2 研究方法 | 第32-36页 |
3.2.1 引物设计 | 第32-33页 |
3.2.2 含T7启动子序列模板的制备 | 第33页 |
3.2.3 dsRNA的合成 | 第33-34页 |
3.2.4 舞毒蛾LdSP基因沉默效率检测 | 第34页 |
3.2.5 显微注射及累计增长率和营养指标检测 | 第34-35页 |
3.2.6 LdSP基因沉默舞毒蛾抗逆性分析 | 第35-36页 |
3.3 结果与分析 | 第36-41页 |
3.3.1 含有T7启动子的质粒模板的PCR检测 | 第36页 |
3.3.2 dsRNA合成电泳检测 | 第36页 |
3.3.3 基因沉默效率分析 | 第36-38页 |
3.3.4 LdSP基因沉默对幼虫生长发育及表型影响 | 第38-39页 |
3.3.5 与LdSP基因沉默舞毒蛾抗逆性分析 | 第39-41页 |
3.4 小结与讨论 | 第41-44页 |
4 转基因果蝇介导LdSP基因功能分析 | 第44-56页 |
4.1 试验材料 | 第44页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第44页 |
4.1.2 主要试剂 | 第44页 |
4.2 研究方法 | 第44-49页 |
4.2.1 转基因果蝇载体构建 | 第44-46页 |
4.2.2 转基因果蝇的建立与检测 | 第46-47页 |
4.2.3 转基因果蝇表型及验证 | 第47-48页 |
4.2.4 转LdSP基因果蝇对生长发育的影响 | 第48页 |
4.2.5 转LdSP基因果蝇抗逆性分析 | 第48-49页 |
4.3 结果与分析 | 第49-53页 |
4.3.1 转LdSP基因果蝇载体构建 | 第49页 |
4.3.2 转LdSP基因果蝇表型及目的基因检测 | 第49-50页 |
4.3.3 转LdSP基因果蝇对其生长发育的影响 | 第50-51页 |
4.3.4 转LdSP基因果蝇抗逆性分析 | 第51-53页 |
4.4 小结与讨论 | 第53-56页 |
结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
附录 | 第64-65页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
个人简历 | 第67-68页 |