| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 MADS-box基因家族 | 第10-14页 |
| 1.1.1 MADS-box基因的进化 | 第10-11页 |
| 1.1.2 MADS-box基因的分类和结构 | 第11-12页 |
| 1.1.3 植物MADS-box基因的相关功能 | 第12-14页 |
| 1.2 AP1/FUL亚家族 | 第14-17页 |
| 1.2.1 AP1基因 | 第15-17页 |
| 1.2.2 FBP29基因 | 第17页 |
| 1.3 CRISPR/Cas9技术 | 第17-21页 |
| 1.3.1 CRISPR/Cas9的结构和原理 | 第17-19页 |
| 1.3.2 CRISPR/Cas9的研究进展 | 第19-21页 |
| 第2章 引言 | 第21-23页 |
| 2.1 研究背景及意义 | 第21-22页 |
| 2.2 技术路线 | 第22-23页 |
| 第3章 矮牵牛PhAP1与PhFBP29基因的序列比较 | 第23-37页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第23-24页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第23页 |
| 3.1.3 主要试剂和试剂盒 | 第23页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 3.1.5 主要试剂和常用培养基配制 | 第24页 |
| 3.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 3.2.1 植物材料的种植 | 第24页 |
| 3.2.2 矮牵牛营养器官DNA的获得 | 第24-25页 |
| 3.2.3 矮牵牛花器官cDNA的获得 | 第25-26页 |
| 3.2.4 检测DNA/RNA的浓度和质量 | 第26页 |
| 3.2.5 矮牵牛花器官cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
| 3.2.6 PCR引物设计及PCR扩增 | 第27页 |
| 3.2.7 回收目的DNA片段 | 第27-28页 |
| 3.2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| 3.2.9 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第29页 |
| 3.2.10 转化子的鉴定 | 第29页 |
| 3.2.11 矮牵牛PhAP1基因的生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 3.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 3.3.1 矮牵牛总RNA的检测 | 第30页 |
| 3.3.2 矮牵牛PhAP1基因ORF框的克隆 | 第30-31页 |
| 3.3.3 PhAP1基因组部分内含子的克隆 | 第31-32页 |
| 3.3.4 PhAP1蛋白序列基本特征预测及分析 | 第32-33页 |
| 3.3.5 PhAP1基因编码蛋白的同源分析 | 第33-34页 |
| 3.3.6 矮牵牛PhAP1基因的进化树分析 | 第34-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第4章 矮牵牛PhAP1与PhFBP29基因表达特性的差异 | 第37-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第37页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 4.2.1 植物不同时期和组织的选材 | 第37-38页 |
| 4.2.2 矮牵牛总RNA的提取和cDNA第一链的获得 | 第38页 |
| 4.2.3 矮牵牛PhAP1基因表达特性的实时荧光定量分析 | 第38页 |
| 4.3 结果与分析 | 第38-40页 |
| 4.3.1 总RNA提取与质量检测 | 第38-39页 |
| 4.3.2 矮牵牛PhAP1基因表达的定量分析 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第5章 PhAP1与PhFBP29超量表达和敲除突变体的表型差异 | 第42-69页 |
| 5.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 5.1.2 菌株与载体 | 第42页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第42页 |
| 5.1.4 主要试剂 | 第42页 |
| 5.1.5 常用试剂配制 | 第42-43页 |
| 5.1.6 矮牵牛转化基本培养基 | 第43页 |
| 5.2 实验方法 | 第43-50页 |
| 5.2.1 植物材料的处理 | 第43-44页 |
| 5.2.2 表达载体的构建 | 第44-47页 |
| 5.2.3 农杆菌感受态的制备及转化 | 第47页 |
| 5.2.4 电击法转化农杆菌感受态细胞 | 第47-48页 |
| 5.2.5 农杆菌介导转化矮牵牛 | 第48-49页 |
| 5.2.6 转基因植株的检测 | 第49页 |
| 5.2.7 叶片下表皮细胞的统计 | 第49-50页 |
| 5.2.8 转基因植株表型观察 | 第50页 |
| 5.3 结果与分析 | 第50-66页 |
| 5.3.1 植物表达载体的构建 | 第50-53页 |
| 5.3.2 转基因植株的获得 | 第53-54页 |
| 5.3.3 外源基因超量表达和基因敲除突变体植株的鉴定 | 第54-60页 |
| 5.3.4 矮牵牛突变体的表型观察 | 第60-66页 |
| 5.4 讨论 | 第66-69页 |
| 第6章 总结 | 第69-71页 |
| 6.1 结论 | 第69-70页 |
| 6.2 下一步计划 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 缩略词表 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 附录 | 第82页 |
