| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表Abbreviations | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 花色素苷是观赏海棠呈色的重要物质 | 第10-11页 |
| 1.2 MYB类转录因子调控观赏海棠花色素苷生物合成 | 第11-12页 |
| 1.3 COP1泛素化降解MYB10调节花色素苷积累 | 第12-15页 |
| 1.3.1 COP1是光形态建成的抑制子 | 第12-13页 |
| 1.3.2 COP1调控观赏海棠植物花色素苷的生物合成 | 第13-15页 |
| 1.4 McMYB10可能在基因表达水平上反馈调节McCOP1基因表达 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第17-21页 |
| 2.1.1 植物材料的准备及取样 | 第17页 |
| 2.1.2 所用载体与菌株 | 第17-18页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第18页 |
| 2.1.4 化学试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.5 基础培养基配制方法 | 第19-20页 |
| 2.1.6 常用抗生素配制 | 第20页 |
| 2.1.7 所用激素溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.1.8 所用试剂溶液配制 | 第21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-34页 |
| 2.2.1 观赏海棠叶片图像采集及HPLC法检测叶片中类黄酮物质含量 | 第21-22页 |
| 2.2.2 植物总RNA提取与反转及qRT-PCR表达分析 | 第22-23页 |
| 2.2.3 McCOP1启动子克隆及序列分析 | 第23-25页 |
| 2.2.4 酵母单杂交(Y1H) | 第25-29页 |
| 2.2.5 凝胶迁移率(EMSA) | 第29页 |
| 2.2.6 酵母双杂(Y2H) | 第29页 |
| 2.2.7 双分子荧光互补(BiFC) | 第29-30页 |
| 2.2.8 瞬时转化 | 第30-31页 |
| 2.2.9 统计方法 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-52页 |
| 3.1 观赏海棠叶片不同发育时期的色泽变化 | 第34-35页 |
| 3.1.1 不同品种叶片表型特征 | 第34页 |
| 3.1.2 类黄酮物质的含量变化 | 第34-35页 |
| 3.2 观赏海棠叶片不同发育时期花色素苷生物合成相关基因的表达 | 第35-38页 |
| 3.2.1 花色苷相关结构基因表达 | 第35-36页 |
| 3.2.2 McMYB10与McCOP1s表达框架 | 第36-37页 |
| 3.2.3 McCOP1s与McMYB10及花色苷的相关性分析 | 第37-38页 |
| 3.3 光对‘王族’叶片中花色苷生物合成的影响 | 第38-43页 |
| 3.3.1 ‘王族’在光周期中的色泽变化 | 第38-39页 |
| 3.3.2 ‘王族’在光周期中结构基因表达 | 第39-40页 |
| 3.3.3 ‘王族’在光周期下McMYB10和McCOP1s基因的表达变化 | 第40-41页 |
| 3.3.4 ‘王族’光周期中McCOP1s与McMYB10及花色苷的相关性分析 | 第41-42页 |
| 3.3.5 24h光照改变花色苷的积累及相关基因的表达 | 第42-43页 |
| 3.4 McMYB10与McCOP1的相互作用 | 第43-45页 |
| 3.4.1 McCOP1的启动子序列分析 | 第43-44页 |
| 3.4.2 McMYB10与McCOP1启动子相互作用 | 第44-45页 |
| 3.5 McMYB10蛋白与McCOP1蛋白的互作 | 第45-46页 |
| 3.6 McMYB10的功能验证 | 第46-50页 |
| 3.6.1 TRV-GFP-McMYB10瞬时侵染苹果果实 | 第46-47页 |
| 3.6.2 TRV-GFP-McMYB10瞬时侵染观赏海棠叶片 | 第47-49页 |
| 3.6.3 McMYB10过表达观赏海棠叶片 | 第49-50页 |
| 3.7 McCOP1s的功能验证 | 第50-52页 |
| 3.7.1 TRV-GFP-McCOP1瞬时侵染海棠叶片 | 第50-51页 |
| 3.7.2 McCOP1-1过表达于观赏海棠叶片 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 MYB10是促进花色素苷积累的重要转录因子 | 第52页 |
| 4.2 MYBs类转录因子可能是COP1蛋白的底物 | 第52-53页 |
| 4.3 观赏海棠叶片中McMYB10可反馈调控McCOP1表达 | 第53页 |
| 4.4 McMYB10通过激活McCOP1的表达调控自己的表达 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 6 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 作者简历 | 第64页 |
