| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-25页 |
| 1.1 木糖高效利用是可再生能源木质纤维素乙醇生产中的关键问题之一 | 第9-11页 |
| 1.2 酿酒酵母糖感应信号传导调节机制和碳源利用 | 第11-23页 |
| 1.2.1 酿酒酵母cAMP-PKA途径 | 第13-21页 |
| 1.2.2 酿酒酵母Snf3/Rgt2信号途径 | 第21-23页 |
| 1.3 本论文的研究内容及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 扰动cAMP-PKA信号途径对酿酒酵母木糖代谢的影响 | 第25-59页 |
| 2.1 材料 | 第25-30页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.2 培养基 | 第27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 2.1.4 引物 | 第27-30页 |
| 2.1.5 菌株与质粒 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.2.1 引物合成与基因测序 | 第30-31页 |
| 2.2.2 酵母转化 | 第31页 |
| 2.2.3 酵母质粒提取 | 第31页 |
| 2.2.4 酵母基因组提取 | 第31页 |
| 2.2.5 KanMX选择标记的去除 | 第31-32页 |
| 2.2.6 Zero-Blunt载体的连接 | 第32页 |
| 2.2.7 大肠转化 | 第32页 |
| 2.2.8 大肠质粒提取 | 第32页 |
| 2.2.9 菌株保藏 | 第32页 |
| 2.2.10 菌株代谢能力测试 | 第32-33页 |
| 2.2.11 酵母胞内cAMP定量测定 | 第33页 |
| 2.2.12 酿酒酵母总RNA的提取和cDNA的制备 | 第33页 |
| 2.2.13 实时荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 2.2.14 海藻糖酶的酶活测定 | 第34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-59页 |
| 2.3.1 表达GPA2~(G132V)对酿酒酵母木糖代谢的影响研究 | 第34-41页 |
| 2.3.2 表达RAS2~(G19V)对酿酒酵母木糖代谢的影响研究 | 第41-45页 |
| 2.3.3 敲除磷酸酯酶PDE1/PDE2对酿酒酵母木糖代谢的影响研究 | 第45-50页 |
| 2.3.4 表达GPA2~(G132V)并敲除磷酸酯酶PDE1对酿酒酵母木糖代谢的影响 | 第50-54页 |
| 2.3.5 重组酿酒酵母菌株不同碳源条件下的cAMP和PKA水平 | 第54-55页 |
| 2.3.6 扰动cAMP-PKA途径对酿酒酵母主要代谢途径部分基因转录水平的影响 | 第55-59页 |
| 第三章 调节Snf3/Rgt2信号途径对酿酒酵母木糖代谢的影响 | 第59-69页 |
| 3.1 材料 | 第59-61页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第59页 |
| 3.1.2 培养基 | 第59页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第59页 |
| 3.1.4 引物 | 第59-60页 |
| 3.1.5 菌株与质粒 | 第60-61页 |
| 3.2 实验方法 | 第61-62页 |
| 3.2.1 引物合成与基因测序 | 第61页 |
| 3.2.2 酵母转化 | 第61页 |
| 3.2.3 酵母基因组提取 | 第61-62页 |
| 3.2.4 KanMX选择标记的去除 | 第62页 |
| 3.2.5 大肠转化 | 第62页 |
| 3.2.6 大肠质粒提取 | 第62页 |
| 3.2.7 菌株保藏 | 第62页 |
| 3.2.8 菌株代谢能力测试 | 第62页 |
| 3.2.9 酿酒酵母总RNA的提取和cDNA的制备 | 第62页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第62-69页 |
| 3.3.1 糖感应蛋白Snf3/Rgt2对木糖响应的研究 | 第62-66页 |
| 3.3.2 敲除转录因子基因RGT1对酿酒酵母木糖代谢影响的研究 | 第66-69页 |
| 全文总结与展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第77-78页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第78页 |
