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调节酿酒酵母糖感应系统对木糖代谢影响的研究

摘要第6-7页
Abstract第7页
缩略词表(Abbreviation)第8-9页
第一章 绪论第9-25页
    1.1 木糖高效利用是可再生能源木质纤维素乙醇生产中的关键问题之一第9-11页
    1.2 酿酒酵母糖感应信号传导调节机制和碳源利用第11-23页
        1.2.1 酿酒酵母cAMP-PKA途径第13-21页
        1.2.2 酿酒酵母Snf3/Rgt2信号途径第21-23页
    1.3 本论文的研究内容及意义第23-25页
第二章 扰动cAMP-PKA信号途径对酿酒酵母木糖代谢的影响第25-59页
    2.1 材料第25-30页
        2.1.1 主要试剂第25-27页
        2.1.2 培养基第27页
        2.1.3 主要仪器第27页
        2.1.4 引物第27-30页
        2.1.5 菌株与质粒第30页
    2.2 实验方法第30-34页
        2.2.1 引物合成与基因测序第30-31页
        2.2.2 酵母转化第31页
        2.2.3 酵母质粒提取第31页
        2.2.4 酵母基因组提取第31页
        2.2.5 KanMX选择标记的去除第31-32页
        2.2.6 Zero-Blunt载体的连接第32页
        2.2.7 大肠转化第32页
        2.2.8 大肠质粒提取第32页
        2.2.9 菌株保藏第32页
        2.2.10 菌株代谢能力测试第32-33页
        2.2.11 酵母胞内cAMP定量测定第33页
        2.2.12 酿酒酵母总RNA的提取和cDNA的制备第33页
        2.2.13 实时荧光定量PCR第33-34页
        2.2.14 海藻糖酶的酶活测定第34页
    2.3 结果与讨论第34-59页
        2.3.1 表达GPA2~(G132V)对酿酒酵母木糖代谢的影响研究第34-41页
        2.3.2 表达RAS2~(G19V)对酿酒酵母木糖代谢的影响研究第41-45页
        2.3.3 敲除磷酸酯酶PDE1/PDE2对酿酒酵母木糖代谢的影响研究第45-50页
        2.3.4 表达GPA2~(G132V)并敲除磷酸酯酶PDE1对酿酒酵母木糖代谢的影响第50-54页
        2.3.5 重组酿酒酵母菌株不同碳源条件下的cAMP和PKA水平第54-55页
        2.3.6 扰动cAMP-PKA途径对酿酒酵母主要代谢途径部分基因转录水平的影响第55-59页
第三章 调节Snf3/Rgt2信号途径对酿酒酵母木糖代谢的影响第59-69页
    3.1 材料第59-61页
        3.1.1 主要试剂第59页
        3.1.2 培养基第59页
        3.1.3 主要仪器第59页
        3.1.4 引物第59-60页
        3.1.5 菌株与质粒第60-61页
    3.2 实验方法第61-62页
        3.2.1 引物合成与基因测序第61页
        3.2.2 酵母转化第61页
        3.2.3 酵母基因组提取第61-62页
        3.2.4 KanMX选择标记的去除第62页
        3.2.5 大肠转化第62页
        3.2.6 大肠质粒提取第62页
        3.2.7 菌株保藏第62页
        3.2.8 菌株代谢能力测试第62页
        3.2.9 酿酒酵母总RNA的提取和cDNA的制备第62页
    3.3 结果与讨论第62-69页
        3.3.1 糖感应蛋白Snf3/Rgt2对木糖响应的研究第62-66页
        3.3.2 敲除转录因子基因RGT1对酿酒酵母木糖代谢影响的研究第66-69页
全文总结与展望第69-70页
参考文献第70-76页
致谢第76-77页
攻读学位期间发表的学术论文第77-78页
学位论文评阅及答辩情况表第78页

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