| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第13-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-38页 |
| 1.1 朊病毒病概述 | 第15-31页 |
| 1.1.1 朊病毒病 | 第15-20页 |
| 1.1.2 朊蛋白(PrP~C及PrP~(Sc))的生物学特征 | 第20-25页 |
| 1.1.3 朊病毒病研究相关模型 | 第25-29页 |
| 1.1.4 朊病毒病与免疫反应 | 第29-31页 |
| 1.2 NF-κB信号通路概述 | 第31-34页 |
| 1.2.1 NF-κB家族 | 第31-32页 |
| 1.2.2 NF-κB信号通路 | 第32-34页 |
| 1.2.3 神经系统中的NF-κB | 第34页 |
| 1.3 TNF-α诱导细胞死亡的途径概述 | 第34-37页 |
| 1.3.1 TNF-α受体 | 第34-35页 |
| 1.3.2 TNF-α受体介导的信号通路 | 第35-37页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第37-38页 |
| 第二章 朊病毒病中NF-κB信号通路发生异常改变 | 第38-67页 |
| 2.1 实验仪器和材料 | 第38-41页 |
| 2.1.1 朊病毒毒株模型 | 第38-39页 |
| 2.1.2 主要仪器及设备 | 第39页 |
| 2.1.3 主要试剂及耗材 | 第39-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-49页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第41-42页 |
| 2.2.2 脑组织匀浆的制备 | 第42页 |
| 2.2.3 实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第42-44页 |
| 2.2.4 免疫印迹(Western bloting) | 第44-45页 |
| 2.2.5 免疫组织化学(IHC) | 第45-46页 |
| 2.2.6 免疫荧光(IFA) | 第46-47页 |
| 2.2.7 细胞核、细胞浆蛋白分离提取 | 第47页 |
| 2.2.8 引物的设计及重组质粒的构建 | 第47-48页 |
| 2.2.9 细胞瞬时转染 | 第48-49页 |
| 2.2.10 双萤光素酶报告系统 | 第49页 |
| 2.2.11 统计学分析 | 第49页 |
| 2.3 结果 | 第49-63页 |
| 2.3.1 朊病毒感染细胞中,NF-κB (p65)转录及表达水平下降 | 第49-51页 |
| 2.3.2 朊病毒感染细胞中,TNF-α所诱导的p-p65及p-IκB增速相对较慢 | 第51-54页 |
| 2.3.3 清除朊病毒感染细胞中的PrP~(Sc),NF-κB (p65)水平得到一定恢复 | 第54-56页 |
| 2.3.4 朊病毒感染细胞中,过表达p65对其PrP~(Sc)的复制无明显影响 | 第56-57页 |
| 2.3.5 朊病毒感染小鼠及仓鼠模型脑组织中,p65含量下降 | 第57-59页 |
| 2.3.6 在小鼠及仓鼠脑组织中,p65与NeuN存在共定位现象 | 第59-62页 |
| 2.3.7 朊病毒感染细胞及动物模型中,NF-κB相关调节分子含量下降 | 第62-63页 |
| 2.4 讨论 | 第63-67页 |
| 第三章 肿瘤坏死因子(TNF-α)对朊病毒感染细胞损伤机制的初步探究 | 第67-88页 |
| 3.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 3.1.1 细胞培养及相关试剂 | 第68页 |
| 3.1.2 免疫印迹相关抗体 | 第68页 |
| 3.1.3 其他相关试剂 | 第68页 |
| 3.2 实验方法 | 第68-71页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第68-69页 |
| 3.2.2 细胞活力的检测 | 第69页 |
| 3.2.3 细胞早期凋亡的检测 | 第69-70页 |
| 3.2.4 细胞因子阵列检测 | 第70页 |
| 3.2.5 针对TNF-α的酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第70-71页 |
| 3.2.6 细胞内Caspase-8酶活性的检测 | 第71页 |
| 3.2.7 统计学分析 | 第71页 |
| 3.3 结果 | 第71-85页 |
| 3.3.1 朊病毒感染细胞对活化的小胶质细胞条件培养基较敏感 | 第71-74页 |
| 3.3.2 活化的小胶质细胞条件培养基中,细胞因子TNF-α含量明显增高 | 第74-75页 |
| 3.3.3 TNF-α对阮病毒感染细胞的损伤作用较强 | 第75-78页 |
| 3.3.4 TNF-α诱导朊病毒感染细胞活性下降依赖于坏死性凋亡途径的激活 | 第78-81页 |
| 3.3.5 清除朊病毒感染细胞中的PrP~(Sc)后,TNF-α对其损伤作用减弱 | 第81-85页 |
| 3.4 讨论 | 第85-88页 |
| 第四章 全文结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-103页 |
| 论文综述 | 第103-118页 |
| 参考文献 | 第112-118页 |
| 致谢 | 第118-120页 |
| 作者简历 | 第120-121页 |
