| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-22页 |
| 1.1 课题背景及目的和意义 | 第9-10页 |
| 1.2 国内外研究现状及分析 | 第10-19页 |
| 1.2.1 MAEVELD1 简介 | 第10-11页 |
| 1.2.2 核仁素简介 | 第11-16页 |
| 1.2.3 DNA损伤及修复简介 | 第16-19页 |
| 1.2.4 本文的研究假设 | 第19页 |
| 1.3 主要研究内容 | 第19-21页 |
| 1.4 课题来源 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 细胞系、载体及菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 抗体 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验试剂及材料 | 第23页 |
| 2.1.4 试剂及配方 | 第23-25页 |
| 2.1.5 实验分析软件 | 第25页 |
| 2.1.6 PCR 扩增引物及 RNAi 片段序列 | 第25页 |
| 2.1.7 主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 细胞的传代培养 | 第26-27页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第27页 |
| 2.2.3 全细胞蛋白提取 | 第27-28页 |
| 2.2.4 细胞浆和细胞核蛋白提取 | 第28页 |
| 2.2.5 RNA提取 | 第28页 |
| 2.2.6 逆转录合成cDNA | 第28-29页 |
| 2.2.7 pGEX-4T-2/Nucleolin重组体构建系列方法 | 第29-31页 |
| 2.2.8 CaCl2 化学法感受态细胞制备 | 第31-32页 |
| 2.2.9 GST融合蛋白诱导表达 | 第32页 |
| 2.2.10 Western Blot免疫印记杂交 | 第32-33页 |
| 2.2.11 免疫荧光实验 | 第33页 |
| 2.2.12 免疫共沉淀（Co-IP） | 第33-34页 |
| 2.2.13 GST-pulldown | 第34-35页 |
| 第3章 MARVELD1 与核仁素的相互作用分析 | 第35-45页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 GST-MARVELD1 与核仁素相互作用分析 | 第35-36页 |
| 3.3 Co-IP检测MARVELD1 与核仁素的相互作用 | 第36-38页 |
| 3.3.1 MARVELD1 与核仁素免疫共沉淀 | 第36-37页 |
| 3.3.2 核仁素与MARVELD1 免疫共沉淀 | 第37-38页 |
| 3.4 GST-Nucleolin重组体构建及诱导表达 | 第38-42页 |
| 3.4.1 pGEX-4T2Nucleolin重组体构建 | 第38-39页 |
| 3.4.2 pGEX-4T2Nucleolin重组体筛选及验证 | 第39-40页 |
| 3.4.3 重组子质粒转化表达菌株及融合蛋白体外诱导表达 | 第40-42页 |
| 3.5 GST-Nucleolin与MARVELD1 相互作用分析 | 第42页 |
| 3.6 讨论 | 第42-43页 |
| 3.7 本章小结 | 第43-45页 |
| 第4章 DNA损伤修复中MARVELD1 与核仁素的关系 | 第45-54页 |
| 4.1 引言 | 第45页 |
| 4.2 MARVELD1 与核仁素的共定位分析 | 第45-47页 |
| 4.3 DNA损伤修复中MARVELD1 与核仁素的表达情况分析 | 第47-51页 |
| 4.3.1 UV诱导后MARVELD1 与核仁素的表达 | 第47-48页 |
| 4.3.2 射线（IR）照射后MARVELD1 与核仁素的表达 | 第48-49页 |
| 4.3.3 Etoposide诱导后MARVELD1 与核仁素的表达 | 第49-50页 |
| 4.3.4 UV及Etoposide联合处理后MARVELD1 与核仁素的表达变化 | 第50-51页 |
| 4.4 DNA损伤修复过程中MARVELD1 与核仁素结合情况变化 | 第51页 |
| 4.5 讨论 | 第51-53页 |
| 4.6 本章小结 | 第53-54页 |
| 第5章 MARVELD1 对核仁素亚细胞定位的影响 | 第54-58页 |
| 5.1 引言 | 第54页 |
| 5.2 DNA损伤时核仁素亚细胞定位的改变 | 第54-56页 |
| 5.2.1 UV诱导后核仁素亚细胞定位的改变 | 第54-55页 |
| 5.2.2 UV及Etoposide联合处理后核仁素亚细胞定位的改变 | 第55-56页 |
| 5.3 MARVELD1 表达沉默对核仁素亚细胞定位的影响 | 第56页 |
| 5.4 讨论 | 第56-57页 |
| 5.5 本章小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58页 |
| 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
