中文摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-16页 |
课题研究假说与目标 | 第16-17页 |
技术路线图 | 第17-18页 |
实验研究 | 第18-59页 |
第一部分:青藤碱对DC.4细胞TLR2/TLR4的影响研究 | 第18-44页 |
1.实验材料 | 第18-24页 |
1.1 实验药物 | 第18页 |
1.2 细胞来源 | 第18页 |
1.3 主要试剂 | 第18-23页 |
1.4 主要实验仪器 | 第23-24页 |
2.实验方法 | 第24-34页 |
2.1 实验药物的配制 | 第24页 |
2.2 树突状细胞DC2.4的培养 | 第24-25页 |
2.2.1 DC2.4细胞的培养与换液 | 第24-25页 |
2.2.2 DC2.4细胞传代 | 第25页 |
2.2.3 DC2.4细胞的冻存 | 第25页 |
2.3 青藤碱对DC2.4细胞膜上TLR2、TLR4蛋白影响的测定 | 第25-31页 |
2.3.1 DC2.4细胞分组 | 第25-26页 |
2.3.2 DC2.4细胞的培养与收集 | 第26页 |
2.3.3 DC2.4细胞的裂解 | 第26页 |
2.3.4 Western-Blot检测TLR2、TLR4蛋白 | 第26-31页 |
2.4 青藤碱对DC2.4细胞内TLR2mRNA、TLR4mRNA影响测定 | 第31-34页 |
2.4.1 细胞样本RNA的提取 | 第31-32页 |
2.4.2 RNA的质量检测 | 第32页 |
2.4.3 Real-timePCR法检TLR2mRNA的表达 | 第32-34页 |
2.4.4 数据统计 | 第34页 |
3.实验结果 | 第34-44页 |
3.1 青藤碱对DC2.4细胞膜上TLR2蛋白的影响 | 第34-37页 |
3.1.1 DC2.4细胞显微观察 | 第34-35页 |
3.1.2 Western-Blot法检测TLR2蛋白的表达 | 第35-37页 |
3.2 青藤碱对DC2.4细胞膜上TLR4蛋白的影响 | 第37-38页 |
3.3 青藤碱对DC2.4细胞内TLR2mRNA的影响 | 第38-41页 |
3.3.1 总RNA的提取质量 | 第39页 |
3.3.2 TLR2mRNA的定量 | 第39-41页 |
3.4 青藤碱对DC.4细胞内TLR4mRNA的影响 | 第41-44页 |
第二部分:青藤碱对DC.4细胞MyD88依赖或非依赖途径活化影响的研究 | 第44-59页 |
1 实验材料 | 第44-50页 |
1.1 实验药物 | 第44页 |
1.2 细胞来源 | 第44页 |
1.3 主要试剂 | 第44-49页 |
1.4 主要实验仪器 | 第49-50页 |
2 实验方法 | 第50-52页 |
2.1 实验药物的配制 | 第50页 |
2.2 树突状细胞DC2.4的培养 | 第50页 |
2.2.1 DC2.4细胞的培养与换液 | 第50页 |
2.2.2 DC2.4细胞传代 | 第50页 |
2.2.3 DC2.4细胞的冻存 | 第50页 |
2.3 青藤碱对DC2.4细胞内MyD88、TRIF蛋白影响的测定 | 第50-51页 |
2.3.1 DC2.4细胞分组 | 第50页 |
2.3.2 DC2.4细胞的培养与收集 | 第50页 |
2.3.3 DC2.4细胞裂解 | 第50-51页 |
2.3.4 Western-Blot检测MyD88、TRIF蛋白 | 第51页 |
2.4 青藤碱对DC2.4细胞内MyD88mRNA、TRIFmRNA的影响 | 第51-52页 |
2.4.1 细胞样本RNA的提取 | 第51页 |
2.4.2 RNA的质量检测 | 第51页 |
2.4.3 Real-timePCR法检测MyD8mRNA、TRIFmRNA的表达 | 第51-52页 |
2.4.4 数据统计 | 第52页 |
3 实验结果 | 第52-59页 |
3.1 青藤碱对DC2.4细胞内MyD88蛋白的影响 | 第52-53页 |
3.2 青藤碱对DC2.4细胞内TRIF蛋白的影响 | 第53-55页 |
3.3 青藤碱对DC2.4细胞内MyD88mRNA的影响 | 第55-56页 |
3.4 青藤碱对DC.4细胞内TRIFmRNA的影响 | 第56-59页 |
讨论 | 第59-82页 |
1.中医学对类风湿性关节炎的认识 | 第59-62页 |
1.1 类风湿性关节炎的中医学源流 | 第59页 |
1.2 类风湿性关节炎的中医辨证论治 | 第59-62页 |
2.青藤碱治疗类风湿性关节炎的研究现状 | 第62-69页 |
2.1 青藤碱的本草学研究 | 第62页 |
2.2 青藤碱的现代医学研究 | 第62-66页 |
2.2.1 抗炎抗风湿作用 | 第62-63页 |
2.2.2 免疫抑制作用 | 第63页 |
2.2.3 镇痛作用 | 第63-64页 |
2.2.4 降压作用 | 第64页 |
2.2.5 抗心律失常作用 | 第64-65页 |
2.2.6 释放组织胺作用 | 第65页 |
2.2.7 抗肿瘤作用 | 第65-66页 |
2.2.8 其他作用 | 第66页 |
2.3 类风湿性关节炎的研究进展 | 第66-68页 |
2.4 青藤碱治疗类风湿性关节炎的临床疗效 | 第68-69页 |
3.类风湿性关节炎DC细胞和TLR2/TLR4受体的研究现状 | 第69-76页 |
3.1 DC细胞与类风湿关节炎 | 第69-70页 |
3.2 TLR2/4与类风湿关节炎 | 第70-73页 |
3.3 MyD88信号转导途径与类风湿关节炎 | 第73-76页 |
3.3.1 MyD88依赖传导途径 | 第73-75页 |
3.3.2 MyD88非依赖传导途径 | 第75-76页 |
4.论文研究的主要内容及思路 | 第76-78页 |
4.1 主要研究内容 | 第76-77页 |
4.2 课题研究思路 | 第77页 |
4.3 主要技术与方法 | 第77-78页 |
4.3.1 Western-blotting | 第77页 |
4.3.2 Real-timePCR | 第77-78页 |
5.实验结果分析 | 第78-81页 |
5.1 青藤碱对DC2.4细胞TLR2、TLR4的影响 | 第78-79页 |
5.2 青藤碱对DC2.4细胞MyD88、TRIF的影响 | 第79-81页 |
6.结论 | 第81-82页 |
创新与特色 | 第82-83页 |
问题与展望 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-93页 |
综述 青藤碱的现代药理研究 | 第93-102页 |
参考文献 | 第98-102页 |
附件1:在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第102-103页 |