| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 英文缩略词 | 第10-16页 |
| 引言 | 第16-19页 |
| 一 不同归经中药含药血清的制备及动物脏器组织取材 | 第19-21页 |
| 1 实验材料 | 第19-20页 |
| 1.1 实验动物选择 | 第19页 |
| 1.2 实验动物饲养 | 第19页 |
| 1.3 主要试剂和仪器 | 第19页 |
| 1.3.1 主要试剂来源 | 第19页 |
| 1.3.2 主要试剂配置 | 第19页 |
| 1.3.3 主要仪器 | 第19页 |
| 1.4 实验用品 | 第19-20页 |
| 2 试验方法 | 第20-21页 |
| 2.1 实验分组及给药 | 第20页 |
| 2.2 样品的采集和制备 | 第20-21页 |
| 2.2.1 含药血清的采集 | 第20页 |
| 2.2.2 含药血清的制备 | 第20页 |
| 2.2.3 动物脏器的采集 | 第20-21页 |
| 3 实验结果 | 第21页 |
| 3.1 大鼠一般情况及体征 | 第21页 |
| 4 小结 | 第21页 |
| 二 不同归经中药含药血清对骨髓间充质干细胞的实验研究 | 第21-28页 |
| 1 实验材料 | 第21-23页 |
| 1.1 实验动物 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第21-22页 |
| 1.2.1 主要试剂来源 | 第21-22页 |
| 1.2.2 主要试剂配制 | 第22页 |
| 1.2.3 主要仪器 | 第22页 |
| 1.3 实验用品 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-24页 |
| 2.1 BMSCs分离培养及鉴定 | 第23-24页 |
| 2.1.1 BMSCs分离培养 | 第23页 |
| 2.1.2 BMSCs传代培养 | 第23页 |
| 2.1.3 BMSCs形态观察 | 第23页 |
| 2.1.4 BMSCs表面标志物的检测 | 第23页 |
| 2.1.5 BMSCs增殖检测 | 第23-24页 |
| 2.2 含药血清作用BMSCs | 第24页 |
| 2.2.1 含药血清浓度和作用时间的确定 | 第24页 |
| 2.2.2 细胞种板与用药 | 第24页 |
| 3 实验结果 | 第24-27页 |
| 3.1 BMSCs形态观察 | 第24-25页 |
| 3.2 BMSCs表面标志物的检测结果 | 第25-26页 |
| 3.3 BMSCs增殖结果 | 第26-27页 |
| 3.4 药物血清作用BMSCs结果 | 第27页 |
| 3.4.1 BMSCs形态观察 | 第27页 |
| 4 小结 | 第27-28页 |
| 三 不同归经药物对BMSCs的表观修饰基因表达影响研究 | 第28-43页 |
| 1 实验材料 | 第28-29页 |
| 1.1 实验动物 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第28页 |
| 1.2.1 主要试剂来源 | 第28页 |
| 1.2.2 主要仪器 | 第28页 |
| 1.3 实验用品 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.1 BMSCs分离培养 | 第29页 |
| 2.2 含药血清作用BMSCs | 第29页 |
| 2.3 BMSCs总RNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.4 BMSCscDNA的合成 | 第30页 |
| 2.5 引物设计与合成 | 第30-31页 |
| 2.6 实时荧光定量聚合酶链反应(q-RT-PCR) | 第31-32页 |
| 2.7 RNA样品质量检测 | 第32页 |
| 2.7.1 超微量分光光度计检测 | 第32页 |
| 2.7.2 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第32页 |
| 2.8 数据处理 | 第32页 |
| 3 实验结果 | 第32-43页 |
| 3.1 RNA样品质量检测结果 | 第32-33页 |
| 3.1.1 超微量分光光度计检测结果 | 第32-33页 |
| 3.1.2 琼脂糖凝胶电泳检测结果 | 第33页 |
| 3.2 含药血清不同作用时间点BMSCsDNA甲基化酶3aDnmt3a的mRNA表达 | 第33-36页 |
| 3.2.1 β-actin和Dnmt3a的扩增效率扩增曲线溶解峰和溶解曲线 | 第33-34页 |
| 3.2.2 Dnmt3a的mRNA表达结果分析 | 第34-36页 |
| 3.3 含药血清不同作用时间点BMSCs钙调素赖氨酸甲基转移酶Camkmt与去甲基化酶Kdm1a的mRNA表达 | 第36-39页 |
| 3.3.1 Camkmt和Kdm1a的扩增效率扩增曲线溶解峰和溶解曲线 | 第36页 |
| 3.3.2 Camkmt的mRNA表达结果分析 | 第36-38页 |
| 3.3.3 Kdm1a的mRNA表达结果分析 | 第38-39页 |
| 3.4 含药血清不同作用时间点BMSCs组蛋白乙酰化酶2aKat2a与去乙酰化酶Hdac1的mRNA表达 | 第39-43页 |
| 3.4.1 Kat2a和Hdac1的扩增效率扩增曲线溶解峰和溶解曲线 | 第39-40页 |
| 3.4.2 Kat2a的mRNA表达结果分析 | 第40-41页 |
| 3.4.3 Hdac1的mRNA表达结果分析 | 第41-43页 |
| 4 小结 | 第43页 |
| 四 不同归经药物对脏器组织的表观修饰基因表达影响研究 | 第43-59页 |
| 1 实验材料 | 第43-44页 |
| 1.1 实验动物 | 第43-44页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第44页 |
| 1.2.1 主要试剂来源 | 第44页 |
| 1.2.2 主要仪器 | 第44页 |
| 1.3 实验用品 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-48页 |
| 2.1 实验分组及给药 | 第44-45页 |
| 2.2 动物脏器组织的采集 | 第45页 |
| 2.3 肝脏肾脏和脾脏总RNA的提取 | 第45页 |
| 2.4 肝脏肾脏和脾脏cDNA的合成 | 第45-46页 |
| 2.5 引物设计与合成 | 第46-47页 |
| 2.6 实时荧光定量聚合酶链反应(q-RT-PCR) | 第47-48页 |
| 2.7 RNA样品质量检测 | 第48页 |
| 2.7.1 超微量分光光度计检测 | 第48页 |
| 2.7.2 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第48页 |
| 2.8 数据处理 | 第48页 |
| 3 实验结果 | 第48-58页 |
| 3.1 RNA样品质量检测结果 | 第48-49页 |
| 3.1.1 超微量分光光度计检测结果 | 第48-49页 |
| 3.1.2 琼脂糖凝胶电泳检测结果 | 第49页 |
| 3.2 肝肾和脾脏DNA甲基化酶3aDnmt3a的mRNA表达 | 第49-51页 |
| 3.2.1 β-actin和Dnmt3a的扩增效率扩增曲线溶解峰和溶解曲线 | 第50页 |
| 3.2.2 Dnmt3a的mRNA表达结果分析 | 第50-51页 |
| 3.3 肝肾和脾脏钙调素赖氨酸甲基转移酶Camkmt与去甲基化酶Kdm1a的mRNA表达 | 第51-55页 |
| 3.3.1 Camkmt和Kdm1a的扩增效率扩增曲线溶解峰和溶解曲线 | 第51页 |
| 3.3.2 Camkmt的mRNA表达结果分析 | 第51-53页 |
| 3.3.3 Kdm1a的mRNA表达结果分析 | 第53-55页 |
| 3.4 肝肾和脾脏组蛋白乙酰化酶2aKat2a与去乙酰化酶Hdac1的mRNA表达 | 第55-58页 |
| 3.4.1 Kat2a和Hdac1的扩增效率扩增曲线溶解峰和溶解曲线 | 第55页 |
| 3.4.2 Kat2a的mRNA表达结果分析 | 第55-56页 |
| 3.4.3 Hdac1的mRNA表达结果分析 | 第56-58页 |
| 4 小结 | 第58-59页 |
| 讨论 | 第59-68页 |
| 1 各组含药血清的制备及动物取材 | 第59-61页 |
| 1.1 归经中药的选择 | 第59页 |
| 1.2 含药血清的采集 | 第59-60页 |
| 1.3 含药血清的制备 | 第60页 |
| 1.4 动物脏器的采集 | 第60-61页 |
| 2 各组归经含药血清对骨髓间充质干细胞的实验研究 | 第61-64页 |
| 2.1 BMSCs首次换液时间的选择 | 第61页 |
| 2.2 BMSCs分离方法的选择 | 第61-62页 |
| 2.3 BMSCs表面标志物的鉴定 | 第62-63页 |
| 2.4 检测BMSCs增殖方法的选择 | 第63-64页 |
| 3 不同归经药物对脏器组织BMSCs的表观遗传修饰相关基因表达影响研究 | 第64-68页 |
| 3.1 DNA甲基化与组蛋白甲基化表达 | 第64-65页 |
| 3.2 组蛋白乙酰化与组蛋白去乙酰化表达 | 第65-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 创新性与特色 | 第69-70页 |
| 问题与展望 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 综述 | 第78-85页 |
| 参考文献 | 第83-85页 |
| 在读期间公开发表的学术论文专著及科研成果 | 第85-86页 |
