摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
前言 | 第11-21页 |
1 肝损伤与治疗现状 | 第11-13页 |
2 肝脏组织工程的研究进展 | 第13-15页 |
3 组织工程的细胞来源 | 第15-17页 |
4 肝脏细胞的研究进展 | 第17-18页 |
5 研究思路和目的 | 第18-21页 |
材料与方法 | 第21-37页 |
1 细胞和动物来源 | 第21页 |
2 主要试剂 | 第21-22页 |
3 试剂配制 | 第22-24页 |
4 主要仪器 | 第24-25页 |
5 人间充质干细胞向肝细胞的诱导分化 | 第25-27页 |
5.1 肝细胞的诱导分化 | 第25-26页 |
5.2 流式细胞术检测肝细胞表面标志物ASGPR1与分选 | 第26页 |
5.3 CytochromeP450诱导试验 | 第26-27页 |
5.4 CYP3A4活性的检测 | 第27页 |
6 人间充质干细胞向肝星状细胞和肝内皮细胞的诱导分化 | 第27-31页 |
6.1 肝星状细胞与肝内皮细胞的诱导分化 | 第27-28页 |
6.2 肝星状细胞与肝内皮细胞的流式检测和分选 | 第28页 |
6.3 肝星状细胞与肝内皮细胞的免疫荧光染色 | 第28-29页 |
6.4 肝星状细胞与肝内皮细胞的RT-qPCR分析 | 第29-31页 |
6.5 肝星状细胞的标志蛋白Desmin与α-SMA的免疫荧光染色 | 第31页 |
7 肝芽的组装 | 第31-34页 |
7.1 肝芽组装 | 第31-32页 |
7.2 肝芽的RT-qPCR检测 | 第32页 |
7.3 肝芽的免疫荧光染色 | 第32-34页 |
7.4 微阵列分析肝芽的基因表达谱 | 第34页 |
8 肝芽的移植与检测 | 第34-37页 |
8.1 肝芽的移植 | 第34-35页 |
8.2 存活率观察 | 第35页 |
8.3 ELISA | 第35页 |
8.4 免疫荧光染色 | 第35页 |
8.5 微阵列分析 | 第35-36页 |
8.6 RT-qPCR | 第36页 |
8.7 HE染色 | 第36页 |
8.8 数据分析 | 第36-37页 |
结果 | 第37-50页 |
1 人间充质干细胞向肝细胞分化 | 第37-38页 |
2 人间充质干细胞向肝星状样细胞和肝内皮样细胞分化 | 第38-44页 |
2.1 诱导分化的肝星状样细胞与肝内皮样细胞的形态学 | 第38-39页 |
2.2 诱导分化的肝星状样细胞自荧光特性与肝内皮样细胞的VE-cadherin分子表达 | 第39-40页 |
2.3 诱导分化的肝星状样细胞相关基因的mRNA水平 | 第40-42页 |
2.4 诱导分化的肝星状样细胞表达标志蛋白Desmin与α-SMA | 第42-43页 |
2.5 诱导分化的肝内皮样细胞相关基因的mRNA水平与VE-cadherin分子表达 | 第43-44页 |
3 人肝芽的组装 | 第44-46页 |
3.1 人肝芽的体外组装 | 第44-45页 |
3.2 人肝芽的早期肝脏标志物 | 第45-46页 |
4 肝芽的移植 | 第46-50页 |
4.1 肝芽移植提高急性肝损伤小鼠存活率伴ALB/AAT与ALB/CK8/18水平的回升 | 第46-48页 |
4.2 移植肝芽的成熟肝标志基因的表达谱和相关基因的mRNA水平 | 第48-49页 |
4.3 肝芽移植改善肝组织损伤 | 第49-50页 |
讨论 | 第50-57页 |
1 肝细胞的诱导 | 第50页 |
2 肝星状细胞的诱导 | 第50-52页 |
3 肝内皮细胞的诱导 | 第52-53页 |
4 肝芽组织的组装与功能 | 第53-55页 |
5 细胞或组织移植免疫原性的探讨 | 第55-57页 |
小结与展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
附录 | 第64-71页 |
在校期间发表的论文 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
英文缩略词表 | 第73页 |