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定向分化人间充质干细胞自组装肝芽样组织

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
前言第11-21页
    1 肝损伤与治疗现状第11-13页
    2 肝脏组织工程的研究进展第13-15页
    3 组织工程的细胞来源第15-17页
    4 肝脏细胞的研究进展第17-18页
    5 研究思路和目的第18-21页
材料与方法第21-37页
    1 细胞和动物来源第21页
    2 主要试剂第21-22页
    3 试剂配制第22-24页
    4 主要仪器第24-25页
    5 人间充质干细胞向肝细胞的诱导分化第25-27页
        5.1 肝细胞的诱导分化第25-26页
        5.2 流式细胞术检测肝细胞表面标志物ASGPR1与分选第26页
        5.3 CytochromeP450诱导试验第26-27页
        5.4 CYP3A4活性的检测第27页
    6 人间充质干细胞向肝星状细胞和肝内皮细胞的诱导分化第27-31页
        6.1 肝星状细胞与肝内皮细胞的诱导分化第27-28页
        6.2 肝星状细胞与肝内皮细胞的流式检测和分选第28页
        6.3 肝星状细胞与肝内皮细胞的免疫荧光染色第28-29页
        6.4 肝星状细胞与肝内皮细胞的RT-qPCR分析第29-31页
        6.5 肝星状细胞的标志蛋白Desmin与α-SMA的免疫荧光染色第31页
    7 肝芽的组装第31-34页
        7.1 肝芽组装第31-32页
        7.2 肝芽的RT-qPCR检测第32页
        7.3 肝芽的免疫荧光染色第32-34页
        7.4 微阵列分析肝芽的基因表达谱第34页
    8 肝芽的移植与检测第34-37页
        8.1 肝芽的移植第34-35页
        8.2 存活率观察第35页
        8.3 ELISA第35页
        8.4 免疫荧光染色第35页
        8.5 微阵列分析第35-36页
        8.6 RT-qPCR第36页
        8.7 HE染色第36页
        8.8 数据分析第36-37页
结果第37-50页
    1 人间充质干细胞向肝细胞分化第37-38页
    2 人间充质干细胞向肝星状样细胞和肝内皮样细胞分化第38-44页
        2.1 诱导分化的肝星状样细胞与肝内皮样细胞的形态学第38-39页
        2.2 诱导分化的肝星状样细胞自荧光特性与肝内皮样细胞的VE-cadherin分子表达第39-40页
        2.3 诱导分化的肝星状样细胞相关基因的mRNA水平第40-42页
        2.4 诱导分化的肝星状样细胞表达标志蛋白Desmin与α-SMA第42-43页
        2.5 诱导分化的肝内皮样细胞相关基因的mRNA水平与VE-cadherin分子表达第43-44页
    3 人肝芽的组装第44-46页
        3.1 人肝芽的体外组装第44-45页
        3.2 人肝芽的早期肝脏标志物第45-46页
    4 肝芽的移植第46-50页
        4.1 肝芽移植提高急性肝损伤小鼠存活率伴ALB/AAT与ALB/CK8/18水平的回升第46-48页
        4.2 移植肝芽的成熟肝标志基因的表达谱和相关基因的mRNA水平第48-49页
        4.3 肝芽移植改善肝组织损伤第49-50页
讨论第50-57页
    1 肝细胞的诱导第50页
    2 肝星状细胞的诱导第50-52页
    3 肝内皮细胞的诱导第52-53页
    4 肝芽组织的组装与功能第53-55页
    5 细胞或组织移植免疫原性的探讨第55-57页
小结与展望第57-58页
参考文献第58-64页
附录第64-71页
在校期间发表的论文第71-72页
致谢第72-73页
英文缩略词表第73页

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