| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 主要英文略缩词 | 第10-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-25页 |
| 1.1 氧化应激与APAP药物性肝损伤 | 第15-16页 |
| 1.2 铁代谢与APAP药物性肝损伤 | 第16-17页 |
| 1.3 APAP药物性肝损伤的传统细胞死亡方式 | 第17-19页 |
| 1.4 Ferroptosis与APAP诱导的肝损伤 | 第19-22页 |
| 1.4.1 Ferroptosis及其生物学特征 | 第19-21页 |
| 1.4.2 Ferroptosis与APAP肝损伤可能的机制 | 第21-22页 |
| 1.5 (+)-黄皮酰胺及其药理活性 | 第22-23页 |
| 1.5.1 (+)-黄皮酰胺简介 | 第22页 |
| 1.5.2 (+)-黄皮酰胺药理活性 | 第22-23页 |
| 1.6 立题依据 | 第23-25页 |
| 第二章 (+)-黄皮酰胺对APAP诱导肝损伤的影响 | 第25-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 药品与试剂 | 第25页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第25页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.2.1 动物分组及处理 | 第26-27页 |
| 2.2.2 肝组织石蜡切片制作 | 第27页 |
| 2.2.3 肝组织石蜡切片H&E染色 | 第27页 |
| 2.2.4 ALT、AST试剂盒检测血清中ALT、AST水平 | 第27-28页 |
| 2.2.5 MDA试剂盒检测肝组织中MDA含量 | 第28-29页 |
| 2.2.6 Westernblotting检测肝组织中GPX4蛋白表达 | 第29-30页 |
| 2.2.7 统计学处理 | 第30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-33页 |
| 2.3.1 (+)-黄皮酰胺降低APAP诱导的小鼠血清ALT和AST水平 | 第30-31页 |
| 2.3.2 (+)-黄皮酰胺改善APAP诱导的小鼠肝脏组织形态学改变 | 第31-32页 |
| 2.3.3 (+)-黄皮酰胺降低APAP诱导的小鼠肝组织MDA水平 | 第32页 |
| 2.3.4 (+)-黄皮酰胺降低 APAP 诱导的小鼠肝组织中 GPX4 蛋白表达 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 (+)-黄皮酰胺抑制ferroptosis保护APAP诱导的肝损伤 | 第35-57页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 3.1.1 药品与试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.2 实验动物 | 第36页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第36-37页 |
| 3.1.4 试剂配制 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-46页 |
| 3.2.1 动物分组和处理 | 第38-39页 |
| 3.2.2 肝组织石蜡切片制作 | 第39页 |
| 3.2.3 肝组织石蜡切片H&E染色 | 第39页 |
| 3.2.4 ALT、AST试剂盒检测血清中ALT、AST水平 | 第39页 |
| 3.2.5 MDA试剂盒检测肝组织中MDA含量 | 第39页 |
| 3.2.6 HPLC-ECD检测小鼠肝组织中GSH含量 | 第39-40页 |
| 3.2.7 TUNEL试剂盒检测组织中细胞死亡 | 第40-41页 |
| 3.2.8 免疫组织化学检测肝脏4-HNE表达 | 第41页 |
| 3.2.9 Q-PCR检测组织中基因表达 | 第41-43页 |
| 3.2.10 Westernblotting检测肝组织中蛋白表达 | 第43页 |
| 3.2.11 LC-MS检测肝组织中GPX4酶活性 | 第43-45页 |
| 3.2.12 NADPH试剂盒检测小鼠肝组织NADPH含量 | 第45-46页 |
| 3.2.13 统计学处理 | 第46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-56页 |
| 3.3.1 (+)-黄皮酰胺降低APAP和erastin诱导的肝损伤小鼠血清中ALT和AST水平 | 第46-47页 |
| 3.3.2 (+)-黄皮酰胺改善APAP和erastin诱导的小鼠肝脏形态学变化 | 第47-49页 |
| 3.3.3 (+)-黄皮酰胺减少APAP和erastin诱导的肝细胞死亡数目 | 第49-50页 |
| 3.3.4 (+)-黄皮酰胺降低APAP和erastin诱导的小鼠肝脏中MDA和4-HNE水平 | 第50-51页 |
| 3.3.5 (+)-黄皮酰胺增加APAP和erastin诱导的小鼠肝脏GSH和NADPH水平 | 第51-53页 |
| 3.3.6 (+)-黄皮酰胺调控APAP和erastin诱导的ferroptosis蛋白及下游通路 | 第53-54页 |
| 3.3.7 (+)-黄皮酰胺上调APAP和erastin诱导的GPX4酶活性 | 第54-56页 |
| 3.4 小结 | 第56-57页 |
| 第四章 (+)-黄皮酰胺抑制ferroptosis损伤的机制研究 | 第57-75页 |
| 4.1 实验材料 | 第57-59页 |
| 4.1.1 药品与试剂 | 第57-58页 |
| 4.1.2 实验细胞 | 第58页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第58页 |
| 4.1.4 主要溶液的配制 | 第58-59页 |
| 4.2 实验方法 | 第59-63页 |
| 4.2.1 HepaRG细胞传代培养及冻存 | 第59-60页 |
| 4.2.2 (+)-黄皮酰胺对肝损伤细胞模型存活率的影响(MTT和LDH释放法) | 第60-61页 |
| 4.2.3 HPLC-ECD检测(+)-黄皮酰胺对肝细胞损伤模型中GSH含量的影响 | 第61-62页 |
| 4.2.4 NADPH试剂盒检测(+)-黄皮酰胺对肝细胞损伤模型中NADPH含量的影响 | 第62页 |
| 4.2.5 激光共聚焦成像法检测(+)-黄皮酰胺对肝细胞损伤模型中脂质过氧化水平的影响 | 第62-63页 |
| 4.2.6 流式细胞术检测(+)-黄皮酰胺对肝细胞损伤模型中脂质过氧化水平的影响 | 第63页 |
| 4.2.7 (+)-黄皮酰胺作用靶标的预测和分子对接 | 第63页 |
| 4.3 实验结果 | 第63-73页 |
| 4.3.1 肝细胞ferroptosis细胞模型的建立 | 第63-65页 |
| 4.3.2 (+)-黄皮酰胺改善HepaRG细胞ferroptosis损伤及细胞形态学 | 第65-66页 |
| 4.3.3 (+)-黄皮酰胺增加肝细胞内GSH和NADPH含量 | 第66-67页 |
| 4.3.4 (+)-黄皮酰胺调控ferroptosis通路蛋白 | 第67-68页 |
| 4.3.5 (+)-黄皮酰胺抑制脂质过氧化水平 | 第68-69页 |
| 4.3.6 (+)-黄皮酰胺肝保护作用潜在的靶点 | 第69-73页 |
| 4.4 小结 | 第73-75页 |
| 第五章 结论与展望 | 第75-78页 |
| 5.1 总结 | 第75-76页 |
| 5.2 创新点 | 第76页 |
| 5.3 研究展望 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 致谢 | 第87-92页 |
| 在学期间发表的论文 | 第92页 |
