摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-11页 |
材料与方法 | 第11-26页 |
1 实验动物 | 第11页 |
2 小鼠甲基化测序WGBS | 第11页 |
3 相关基因鉴定及蛋白测定实验部分 | 第11-19页 |
3.1 小鼠的基因鉴定 | 第11-13页 |
3.1.1 试剂及溶液的配制 | 第11-12页 |
3.1.2 实验仪器设备的使用 | 第12页 |
3.1.3 小鼠基因型鉴定 | 第12-13页 |
3.2 Real-timeqPCR检测相关基因 | 第13-16页 |
3.2.1 试剂及溶液的配制 | 第13-14页 |
3.2.2 实验仪器设备 | 第14页 |
3.2.3 提取RNA操作步骤 | 第14-15页 |
3.2.4 RNA逆转录 | 第15-16页 |
3.2.5 Real-time检测相关基因 | 第16页 |
3.3 Westernblot检测相关蛋白 | 第16-19页 |
3.3.1 试剂及溶液的配制 | 第16-17页 |
3.3.2 实验仪器设备 | 第17页 |
3.3.3 蛋白提取 | 第17-18页 |
3.3.4 Western blot步骤 | 第18-19页 |
4 场电位记录 | 第19-20页 |
4.1 溶液及试剂的配制 | 第19页 |
4.2 仪器及设备的使用 | 第19-20页 |
4.3 场电位fEPSP记录步骤 | 第20页 |
5 小鼠行为学实验部分 | 第20-25页 |
5.1 小鼠注射ST6Gal2抗体拮抗剂后行为学实验部分 | 第20-21页 |
5.1.1 试剂及溶液的配置 | 第20-21页 |
5.1.2 实验设备仪器的使用 | 第21页 |
5.1.3 手术部分:小鼠海马区埋管 | 第21页 |
5.1.4 套管给药部分 | 第21页 |
5.2 小鼠行为学测试部分 | 第21-23页 |
5.2.1 旷场实验(Open Field Test,OFT) | 第22页 |
5.2.2 高架十字迷宫实验(Elevated Plus Maze,EPM) | 第22页 |
5.2.3 高架十字迷宫实验(Elevated Plus Maze,EPM) | 第22-23页 |
5.2.4 高架十字迷宫实验(Elevated Plus Maze,EPM) | 第23页 |
5.3 小鼠注射AAV-st6gal2-shRNA后行为学实验部分 | 第23-25页 |
5.3.1 实验试剂和溶液配制 | 第23页 |
5.3.2 实验仪器设备 | 第23-24页 |
5.3.3 小鼠海马区病毒注射 | 第24页 |
5.3.4 确认病毒感染的部位 | 第24页 |
5.3.5 动物行为学测试 | 第24-25页 |
6 数据处理及统计学分析 | 第25-26页 |
结果 | 第26-37页 |
1.小鼠基因鉴定及敲除率检测 | 第26-27页 |
2.DNMTs蛋白表达的实验结果:条件性敲除小鼠海马区兴奋性神经元的dnmt3b引起DNMT1和DNMT3a的蛋白表达代偿性升高 | 第27-28页 |
3.WGBS结果显示:st6gal1、st8sia2、st8sia4、ncam 甲基化水平降低 | 第28-29页 |
4.st6gal2的Real-time qPCR和Western blot的检测结果 | 第29-30页 |
5.Real-time qPCR结果显示,αCaMKII-Cre;dnmt3b~(flox/flox)小鼠ncam和st8sia2表达显著下调,而st8sia4表达未受影响 | 第30页 |
6.场电位记录实验结果:I/O put,PPR,E-LTP,L-LTP | 第30-34页 |
7.旷场,高架十字迷宫,新位置识别和新物体识别行为学结果 | 第34-37页 |
讨论 | 第37-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
综述 | 第52-71页 |
综述参考文献 | 第61-71页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第71-72页 |
缩略词表 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |