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st6gal2在dnmt3b敲除引起的识别记忆障碍中的作用与机制探讨

摘要第2-4页
abstract第4-5页
引言第8-11页
材料与方法第11-26页
    1 实验动物第11页
    2 小鼠甲基化测序WGBS第11页
    3 相关基因鉴定及蛋白测定实验部分第11-19页
        3.1 小鼠的基因鉴定第11-13页
            3.1.1 试剂及溶液的配制第11-12页
            3.1.2 实验仪器设备的使用第12页
            3.1.3 小鼠基因型鉴定第12-13页
        3.2 Real-timeqPCR检测相关基因第13-16页
            3.2.1 试剂及溶液的配制第13-14页
            3.2.2 实验仪器设备第14页
            3.2.3 提取RNA操作步骤第14-15页
            3.2.4 RNA逆转录第15-16页
            3.2.5 Real-time检测相关基因第16页
        3.3 Westernblot检测相关蛋白第16-19页
            3.3.1 试剂及溶液的配制第16-17页
            3.3.2 实验仪器设备第17页
            3.3.3 蛋白提取第17-18页
            3.3.4 Western blot步骤第18-19页
    4 场电位记录第19-20页
        4.1 溶液及试剂的配制第19页
        4.2 仪器及设备的使用第19-20页
        4.3 场电位fEPSP记录步骤第20页
    5 小鼠行为学实验部分第20-25页
        5.1 小鼠注射ST6Gal2抗体拮抗剂后行为学实验部分第20-21页
            5.1.1 试剂及溶液的配置第20-21页
            5.1.2 实验设备仪器的使用第21页
            5.1.3 手术部分:小鼠海马区埋管第21页
            5.1.4 套管给药部分第21页
        5.2 小鼠行为学测试部分第21-23页
            5.2.1 旷场实验(Open Field Test,OFT)第22页
            5.2.2 高架十字迷宫实验(Elevated Plus Maze,EPM)第22页
            5.2.3 高架十字迷宫实验(Elevated Plus Maze,EPM)第22-23页
            5.2.4 高架十字迷宫实验(Elevated Plus Maze,EPM)第23页
        5.3 小鼠注射AAV-st6gal2-shRNA后行为学实验部分第23-25页
            5.3.1 实验试剂和溶液配制第23页
            5.3.2 实验仪器设备第23-24页
            5.3.3 小鼠海马区病毒注射第24页
            5.3.4 确认病毒感染的部位第24页
            5.3.5 动物行为学测试第24-25页
    6 数据处理及统计学分析第25-26页
结果第26-37页
    1.小鼠基因鉴定及敲除率检测第26-27页
    2.DNMTs蛋白表达的实验结果:条件性敲除小鼠海马区兴奋性神经元的dnmt3b引起DNMT1和DNMT3a的蛋白表达代偿性升高第27-28页
    3.WGBS结果显示:st6gal1、st8sia2、st8sia4、ncam 甲基化水平降低第28-29页
    4.st6gal2的Real-time qPCR和Western blot的检测结果第29-30页
    5.Real-time qPCR结果显示,αCaMKII-Cre;dnmt3b~(flox/flox)小鼠ncam和st8sia2表达显著下调,而st8sia4表达未受影响第30页
    6.场电位记录实验结果:I/O put,PPR,E-LTP,L-LTP第30-34页
    7.旷场,高架十字迷宫,新位置识别和新物体识别行为学结果第34-37页
讨论第37-44页
结论第44-45页
参考文献第45-52页
综述第52-71页
    综述参考文献第61-71页
攻读学位期间的研究成果第71-72页
缩略词表第72-73页
致谢第73-74页

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